技术领域
[0001] 本发明属于微生物降解多环芳烃技术领域,具体地,涉及一种生物修复材料,该生物修复材料在降解多环芳烃中的应用,以及一种基于该生物修复材料的多环芳烃污染土壤的生物修复方法。
相关背景技术
[0002] 在石油勘探、开采、运输、提炼等过程中,由于操作不当或者事故泄漏,部分石油洒落到土壤中,造成土壤的石油烃污染。全世界每年通过落地原油及事故泄漏等途径排入到6
环境中的石油污染物约为8×10 t,石油烃污染已成为世界关注的焦点。20世纪80年代,美国出现了严重的石油烃土壤污染问题,其45万块棕色土地中有一半左右存在石油烃污染,同期加拿大石油烃污染的场地高达60%,英国许多地区和工厂也存在严重的油类污染,德国、荷兰、英国等国家已制定了相关的修复工程计划,强化石油烃污染土壤的修复与治理。
[0003] 我国自1978年跻身于世界十大产油国以来,越来越多的油气藏和油气田被勘探与开发,石油企业增多,每年约开采70万吨原油,其中约十分之一进入了土壤环境,致使我国每一年新增的受污染土壤达到了10万吨左右。土壤石油烃污染的形势严峻,阻碍了我国可持续发展的进程。
[0004] 多环芳烃是指含两个或两个以上苯环的芳烃,简称PAHs。根据苯环的连接方式不同,它们主要可分为两大类。一类是非稠环型,其中包括联苯及联多苯和多苯代脂肪烃。苯环间以σ键连接成的化合物称为联苯。联苯类衍生物及联多苯类化合物都是以联苯为母体命名。多苯代脂肪烃类是由若干个苯环取代脂肪烃中的氢原子而形成的化合物。此类化合物以苯基作为取代基、脂肪烃为母体来命名。联苯及联多苯和多苯代脂肪烃这几种非稠环型多环芳烃的结构和性质与单环芳烃相似。另一类是稠环型,即两个碳原子为两个苯环所共有。例如萘,萘的分子式是C10H8,它是两个苯环共用相邻两个碳原子稠合而成。萘是白色片状晶体,熔点80℃,沸点218℃,不溶于水,易溶于热的酒精、乙醚等有机溶剂。易挥发、易升华、有特殊气味。萘是煤焦油中含量最多的化合物,在高温煤焦油中约含10%。蒽的分子式为C14H10,由三个苯环稠合而成。蒽存在于煤焦油中,含量约为0.25%。菲也存在于煤焦油中,与蒽互为同分异构体。
[0005] 多环芳烃的来源分为自然源和人为源。自然源主要来自陆地、水生植物和微生物的生物合成过程,另外,森林、草原的天然火灾及火山的喷发物和化石燃料、木质素和底泥中也存在多环芳烃;人为源主要是由各种矿物燃料(如煤、石油和天然气等)、木材、纸以及其他含碳氢化合物的不完全燃烧或在还原条件下热解形成的。
[0006] 与其他全球禁止生产和使用的持久性有机污染物不同,大多数PAHs的主要释放源通常与人类活动息息相关。因此,目前多环芳烃在环境中的存在广为大家所关注。多环芳烃普遍存在于各种环境中,它们主要通过大气沉积、河流径流、城市和工业废水以及运输过程泄漏直接进入地表水。水是多环芳烃在环境中迁移的重要介质,地表径流、大气沉降、土壤‑泥沙和气‑水界面输入交换都是其扩散的有效方式。这种污染物在水中溶解度极低并且具有很强的亲和力与生化持久性,对海洋沉积物的吸附作用强,往往能在自然界的不同介质中稳定存在。然而,当沉积物经由外力作用,如波浪,潮汐和洋流,拖网捕鱼,船舶交通与水利工程运营等时,沉积物中的污染物质被释放,使污染加剧。
[0007] 绝大部分的多环芳烃对生物体都存在强烈的毒副作用包括免疫毒性以及致癌性。其中,苯并[a]芘已被国际原子能机构分类为第1组,对人类有致癌作用。其他的多环芳烃被分为2A组和2B组。同时,多环芳烃有很高的生物积累性,这使不良影响更为严重。即使微量也会导致各种疾病对人体造成严重危害。越来越多的证据表明,长期暴露于多环芳烃环境中不仅会导致某些特定的癌症,同时也会导致某些其他疾病,如肥胖和2型糖尿病(T2D)等。
[0008] PAHs污染的治理传统上采用物理法及化学法。常规利用温度、电动力及氧化还原的方法,具有周期短见效快的优点,但是其耗能高且对原场地破坏明显的缺点不容忽视。微生物降解法因具有较其他降解方法成本更低、操作更方便等优点,逐渐成为PAHs降解的主要研究方向。
[0009] 在研究难降解PAHs的微生物降解法的过程中,菌体的生理代谢途径成为人们关注的重点。据文献报道,细菌可以将PAHs作为唯一碳源逐步氧化为二氧化碳及水,而这一过程的速度通常与PAHs的环数成反比。细菌对四环以下的多环芳烃类物质降解效果明显,对四环及四环以上的多环芳烃降解较困难。因此,需要开发一种可降解环数较高的多环芳烃微生物菌剂。
具体实施方式
[0018] 以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明,并不用于限制本发明。
[0019] 本发明提供一种生物修复材料,包括菌剂、小分子脂肪酸(本文亦称小分子酸)和共代谢底物,所述菌剂包含副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),所述副干酪乳杆菌的保藏编号为CGMCC No.24463。
[0020] 本发明所用的副干酪乳杆菌(保藏编号CGMCC No.24463)为兼性厌氧菌,革兰氏阳性,是从天津某多环芳烃污染土壤中筛选分离获得。
[0021] 具体筛选分离步骤为:
[0022] (1)驯化
[0023] 取3~5g土壤加入已灭菌的无机盐培养基中,培养基的装液量为150mL/250mL三角瓶,再加入菲作为唯一碳源,振荡摇匀,置于30℃,150r/min摇瓶柜内培养。5d后取培养瓶中菌液1mL进行转接,至少重复3次。
[0024] (2)分离
[0025] 将驯化后的菌液稀释至适宜稀释度后采用平板划线法对菌液划线分离。每个浓度梯度作3个平行样。划线后将培养皿置于培养箱中30℃下培养3d。
[0026] (3)纯化
[0027] 观察琼脂平板表面生长的各种菌落,注意大小、形状、边缘、表面结构、透明度、颜色、性状等的不同,拍照片保存。对未形成单菌的菌落进行反复纯化,直至在同一平板中的菌落大小形态均一。
[0028] 将纯化得到的副干酪乳杆菌(命名为F1)送至北京美吉桑格生物医药科技有限公司进行16S rDNA菌株鉴定,菌种的基因拼接后的序列与NCBI比对结果显示该菌株与副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei strain)的基因序列的同源性为100%,分离菌株F1被鉴定为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。
[0029] 本发明提供的副干酪乳杆菌F1菌落呈乳白色,为圆形,直径大多1.0mm以上,表面光滑、隆起,边缘整齐。
[0030] 发明人研究发现,在多环芳烃降解的过程中,共代谢底物的存在提高了微生物的量,进而提高了PAHs降解过程中必要的酶的生成量,这些酶可以提高PAHs的降解效率和降解效果。所述共代谢底物优选为焦性没食子酸、邻苯二甲酸、邻苯二酚中的至少一种。
[0031] 小分子酸通常是指碳原子数不超过8的脂肪酸,优选为碳原子数不超过6的脂肪3+ 3+
酸,其拥有较强的螯合多价阳离子(如Fe 、Al )的能力,从而显著地影响了污染物在自然界中的流动性、溶解度。多环芳烃在陆地上的存在方式主要是依附在土壤之中。多环芳烃在土壤中会进行一系列诸如吸附、“老化”等物理化学变化,这些变化跟土壤本身的特性有关。
发明人研究发现,小分子酸通过改变土壤有机质(SOM)的含量和质量、土壤中团聚体结构以及微生物的生物活性从而影响多环芳烃在土壤中的存在,加强了多环芳烃与微生物的接触,提高了多环芳烃的降解效率。本发明修复材料中所用的小分子酸优选选自柠檬酸、酒石酸、L‑苹果酸、琥珀酸中的至少一种。
[0032] 本发明生物修复材料中的菌剂可采用菌体培养物离心后的固体组分。即将菌体培养后所得的培养物经离心、固液分离、弃去上清后所剩的部分,其含有少量的水分,是一种湿菌剂。
[0033] 本发明所述生物修复材料中,控制小分子酸和共代谢底物的加入量,可以实现更7 9
好的复配作用,优选地,相对于微生物总数为10~10个菌落,所述小分子酸的含量为0.5‑
3mg,所述共代谢底物的含量为0.1‑1.5mg。
[0034] 本发明的生物修复材料可用于降解多环芳烃,特别是用于含多环芳烃的土壤或含多环芳烃的地下水中多环芳烃的降解。
[0035] 实验证明,本发明的副干酪乳杆菌对各种类型的多环芳烃均具有较好的降解活性。
[0036] 所述多环芳烃是指含有2个或2个以上苯环的芳烃,既包括稠环型多环芳烃,也包括非稠环型多环芳烃。
[0037] 所述稠环型多环芳烃包括但不限于萘、蒽、菲、芘、 苯并芘、苯并蒽、苯并荧蒽、茚并芘中的至少一种。所述苯并芘包括如苯并[a]芘、苯并[e]芘。所述苯并蒽包括如苯并[a]蒽、二苯并[a,h]蒽。所述茚并芘包括如茚并[1,2,3‑cd]芘。
[0038] 所述非稠环型多环芳烃包括但不限于联苯(即联二苯)、联多苯和多苯代脂肪烃的至少一种。所述联多苯可以为联三苯等,所述多苯代脂肪烃可以为二苯甲烷、二苯乙烷等。
[0039] 本发明还提供一种多环芳烃污染土壤的生物修复方法,包括以下步骤:将多环芳烃污染土壤与所述的生物修复材料接触。
[0040] 根据本发明一种优选实施方式,所述菌剂按照微生物总数107~109个菌落/克土壤的量加入;所述小分子酸按照0.5‑3mg/g土壤的量加入;所述共代谢底物按照0.1‑1.5mg/g土壤的量加入。
[0041] 所述接触的条件通常为自然环境条件。本发明的菌剂可以在自然环境温度下,在较宽pH值(5‑10)范围内发挥良好的降解多环芳烃效果。
[0042] 下面结合实施例对本发明作进一步说明,但本发明的范围并不局限于这些实施例。
[0043] 土壤石油烃污染生物修复方法的好坏,最终要通过石油烃在土壤中的降解效果来评价,因此建立了石油烃污染土壤生物修复方法的土壤模式评价方法。模式评价方法为:①将菌剂在目标污染物作为唯一碳源的无机盐培养基中富集;②离心分离,得到富集菌剂;③将菌剂、小分子酸、共代谢底物与保水剂、土壤调节剂、营养物质一起投入到土壤中;④在土壤中加入目标污染物;⑤定期检测土壤石油烃含量及土壤细菌总数,计算石油烃的降解效果。
[0044] 具体操作步骤为:
[0045] 1.取1.5mL菌液于装有150mL无机盐培养基的三角瓶中,再加入目标污染物,150r/min振荡5‑10天(视菌量决定),得到富集菌液。
[0046] 2.将得到的富集菌液8000r/min离心固液分离,弃去上层培养基溶液,加入无机盐培养基100mL充分振荡后再次8000r/min离心固液分离,弃去上层溶液,留底层固体备用。
[0047] 3.将保水剂、土壤调节剂、营养物质和底层固体加入到土壤中,加入小分子酸和共代谢底物,充分搅拌,同时加入去离子水,使土壤含水量维持在某一范围。
[0048] 4.向土壤中加入目标污染物,搅拌均匀。
[0049] 5.每周检测土壤目标污染物含量以及土壤细菌总数。
[0050] 6.每两天补一次水,保持土壤含水量在某一范围,每周翻土1‑3次。
[0051] 无机盐培养基:NH4Cl 0.67g、NaNO3 1.06g、MgSO4·7H2O 0.1g、CaCl2 0.1g、K2HPO4·3H2O 1.5g、KH2PO4 0.5g、FeCl3·6H2O 0.1g、去离子水1L,pH值7.0~7.5。
[0052] 分析方法
[0053] 异养菌测定方法参照《工业循环冷却水水质分析方法》GB/T14643.1‑1993标准平皿计数法。
[0054] 土壤多环芳烃含量测定方法参照《土壤和沉积物半挥发性有机物的测定气相色谱‑质谱法》HJ 834‑2017。其中,使用二氯甲烷‑丙酮混合溶液对多环芳烃进行加压流体萃取。当定容体积为1.0mL,进样体积为1.0μL时,测定多环芳烃的方法检出限为0.06‑0.3mg/kg,测定下限为0.24‑1.20mg/kg。
[0055] 土壤细菌总数测定方法
[0056] 土壤中细菌总数的测定采用平板培养菌落计数法,土壤细菌的培养基选择肉膏蛋白胨培养基。
[0057] 具体测定步骤为:
[0058] 称取10g土壤样品,放入盛有90mL无菌去离子水的三角瓶中,置于摇床上以160次/min的速度室温振荡4h,使土样与水充分混合,将土壤中的微生物细胞充分分散,从土壤中‑1分离出来。此为10 土壤悬液,吸取1mL此土壤悬液于9mL含8.5g/L NaCl的无菌水中,用无菌‑2 ‑3 ‑4 ‑5 ‑6 ‑7 ‑8
吸管吹吸3次混匀,制成10 土壤悬液。以此类推依次制成10 、10 、10 、10 、10 、10 不同稀释度的土壤悬液。选择适当的稀释度后通过混合平板计数法测定土壤悬液的细菌总数。
[0059] 土壤中细菌总数x(个/g),按照以下公式进行计算。
[0060]
[0061] 式中:
[0062] x——土壤细菌总数,个/g;
[0063] e——土壤悬液的细菌总数,个/mL;
[0064] V——土壤悬液的体积,mL;
[0065] m——取样量,g;
[0066] w——土壤含水率,%。
[0067] 肉膏蛋白胨培养基:NaCl 10g、蛋白胨10g、牛肉膏5g、琼脂18g,去离子水1L,pH值7.2~7.4。
[0068] 以下实施例和对比例均采用如下试验方法:
[0069] 所用土壤为250℃灭菌24h的干燥土壤。加入锯末,改良土壤透气性;加入聚丙烯酸,提高土壤保水性;加入尿素,补充土壤N源。混合均匀。将菌液固体部分、小分子酸、共代谢底物分别与去离子水充分混合,加入到土壤中,最后将目标污染物多环芳烃溶于3mL丙酮,加入到土壤中。土壤环境温度范围为18‑23℃。
[0070] 每周翻土一次,并补去离子水至土壤含水量为初始值,除此之外不采取其他干预措施。
[0071] 所述菌液固体部分的获取方法包括:(1)取1.5mL菌液于装有150mL无机盐培养基的三角瓶中,再加入目标污染物,150r/min振荡5‑10天,得到OD600为1.0的富集菌液。(2)将得到的富集菌液8000r/min离心固液分离,弃去上层培养基溶液,加入无机盐培养基100mL,充分振荡后再次8000r/min离心固液分离,弃去上层溶液,得到所述菌液固体部分。无机盐培养基组成:NH4Cl 0.67g、NaNO3 1.06g、MgSO4·7H2O 0.1g、CaCl2 0.1g、K2HPO4·3H2O 1.5g、KH2PO4 0.5g、FeCl3·6H2O 0.1g、去离子水1L,pH值7.0~7.5。
[0072] 以下实施例和对比例中:
[0073] 联二苯购自北京伊诺凯科技有限公司。
[0074] 菲购自北京伊诺凯科技有限公司。
[0075] 苯并[a]芘购自北京伊诺凯科技有限公司。
[0076] 迪茨氏菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号CGMCC1.6332T。
[0077] 实施例1
[0078] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于100g去离子水中,形成水溶液3,取6g柠檬酸溶于100g去离子水中,形成水溶液4,取3g焦性没食子酸溶于100g去离子水中,形成水溶液5,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3、4、5,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg菲。
[0079] 实施例2
[0080] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于100g去离子水中,形成水溶液3,取1.8g酒石酸溶于100g去离子水中,形成水溶液4,取0.6g邻苯二甲酸溶于100g去离子水中,形成水溶液5,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3、4、5,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg菲。
[0081] 实施例3
[0082] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于100g去离子水中,形成水溶液3,取8.5g L‑苹果酸溶于100g去离子水中,形成水溶液4,取4.2g邻苯二酚溶于100g去离子水中,形成水溶液5,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3、4、5,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg菲。
[0083] 实施例4
[0084] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于100g去离子水中,形成水溶液3,取6g柠檬酸溶于100g去离子水中,形成水溶液4,取3g焦性没食子酸溶于100g去离子水中,形成水溶液5,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3、4、5,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg苯并[a]芘。
[0085] 实施例5
[0086] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于100g去离子水中,形成水溶液3,取1.8g酒石酸溶于100g去离子水中,形成水溶液4,取0.6g邻苯二甲酸溶于100g去离子水中,形成水溶液5,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3、4、5,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg苯并[a]芘。
[0087] 实施例6
[0088] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于100g去离子水中,形成水溶液3,取8.5g L‑苹果酸溶于100g去离子水中,形成水溶液4,取4.2g邻苯二酚溶于100g去离子水中,形成水溶液5,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3、4、5,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg苯并[a]芘。
[0089] 实施例7
[0090] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于100g去离子水中,形成水溶液3,取6g柠檬酸溶于100g去离子水中,形成水溶液4,取3g焦性没食子酸溶于100g去离子水中,形成水溶液5,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3、4、5,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg联二苯。
[0091] 对比例1
[0092] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取迪茨氏菌混于300g去离子水中,形成水溶液3,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg菲。
[0093] 对比例2
[0094] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取迪茨氏菌混于300g去离子水中,形成水溶液3,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg苯并[a]芘。
[0095] 对比例3
[0096] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于300g去离子水中,形成水溶液3,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg菲。
[0097] 对比例4
[0098] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于300g去离子水中,形成水溶液3,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg苯并[a]芘。
[0099] 对比例5
[0100] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于100g去离子水中,形成水溶液3,取9g柠檬酸溶于200g去离子水中,形成水溶液4,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3、4,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg菲。
[0101] 对比例6
[0102] 称取6g聚丙烯酸溶于200g去离子水中,形成水溶液1,称取0.96g尿素溶于100g去离子水中,形成水溶液2,取副干酪乳杆菌混于100g去离子水中,形成水溶液3,取9g焦性没食子酸溶于200g去离子水中,形成水溶液4,称取45g锯末,混于2400g土壤中,然后加入水溶液1、2、3、4,混合均匀。向混合均匀的土壤中加入150mg菲。
[0103] 测试例1
[0104] 定期取以上实施例和对比例土样,测量土样中残留的多环芳烃含量,考察多环芳烃降解情况,结果见表1。
[0105] 表1实施例及对比例土样多环芳烃含量
[0106] 初始 7d 14d 21d 28d 35d 42d 49d
实施例1 50.0 46.1 42.0 28.9 15.7 7.6 3.3 1.7
实施例2 50.0 48.0 45.5 33.6 19.9 10.5 5.6 2.3
实施例3 50.0 44.7 39.9 26.1 13.0 5.2 2.9 1.5
实施例4 50.0 48.2 46.8 42.1 35.0 28.9 23.4 19.7
实施例5 50.0 49.0 48.1 45.7 38.2 31.1 26.6 21.0
实施例6 50.0 48.0 45.0 39.4 33.2 26.7 21.5 17.9
实施例7 50.0 44.1 38.7 21.4 11.0 6.4 2.9 1.1
对比例1 50.0 49.6 48.9 46.7 42.5 41.8 40.7 39.9
对比例2 50.0 50.0 49.8 48.7 47.6 47.1 47.0 47.1
对比例3 50.0 48.4 46.2 35.6 21.5 13.5 9.8 2.6
对比例4 50.0 49.8 49.4 46.2 41.0 33.4 28.4 22.6
对比例5 50.0 48.2 45.9 34.9 20.8 12.4 8.2 2.5
对比例6 50.0 48.3 46.0 34.9 20.9 12.3 8.1 2.5
[0107] 注:多环芳烃含量单位为mg/kg。
[0108] 由表1各实施例的结果可以看出,本发明的生物修复材料对于土壤中的多种多环芳烃均具有明显的降解效果。
[0109] 采用其他菌株、仅采用本发明的副干酪乳杆菌、或择一采用小分子酸或共代谢底物与副干酪乳杆菌相配合,降解效果均差于实施例,说明本发明的副干酪乳杆菌具有较好的多环芳烃降解作用,并且,同时加入共代谢底物和小分子酸,可明显提高微生物对土壤多环芳烃的降解效果。
[0110] 测试例2
[0111] 定期取以上实施例和对比例土样,测量土样细菌总数,考察微生物生长情况,结果见表2。
[0112] 表2实施例及对比例土壤微生物生长情况
[0113] 初始 7d 14d 21d 28d 35d 42d 49d
实施例1 35 213 782 1578 1234 841 569 288
实施例2 34 145 521 1107 722 591 401 213
实施例3 34 339 980 1890 1390 1007 798 452
实施例4 37 123 340 763 512 401 257 142
实施例5 32 82 255 709 433 275 245 101
实施例6 38 161 468 894 604 469 316 165
实施例7 36 234 801 1583 1341 897 604 311
对比例1 38 116 452 1002 458 325 278 117
对比例2 38 74 213 644 398 245 216 69
对比例3 37 192 704 1420 1111 757 512 259
对比例4 38 111 306 687 461 361 231 128
对比例5 38 200 732 1491 1155 795 538 269
对比例6 38 202 739 1477 1167 781 532 272
[0114] 注:细菌总数单位为106个/g。
[0115] 由表2的结果可以看出,随着处理时间增长,土壤中副干酪乳杆菌的生长在21d达到峰值,到49d降至与7d相当的水平,在此期间,土样多环芳烃含量持续降低,说明土壤中多环芳烃含量降低是因副干酪乳杆菌的降解所致。
[0116] 以上已经描述了本发明的各实施例,上述说明是示例性的,并非穷尽性的,并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下,对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。
[0117] 在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值,这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说,各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间,以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围,这些数值范围应被视为在本文中具体公开。