[0001] 本申请涉及生物工程技术领域，特别涉及一种培养乳酸菌感受态细胞的制备装置。

[0002] 在进行基因工程菌构建时，需要准备感受态细胞，相关技术中，为制备感受态细胞，需要对乳酸菌多次转接(一般为3次，以获得大量的菌体用于电转)，菌种的接种量一般
是5％至10％，多次转接需要在无菌室无菌操作，操作繁琐，且多次转接有可能会引起微生
物的污染。另一方面，乳酸菌培养完成后，需要用离心机进行离心洗涤，由于离心的菌液量
大，需要大型的离心机，然而离心会与空气按摩产生热量，但为保证乳酸菌的活力，离心时
需要降低温度，则需要昂贵的冷冻离心机，价格国产一般需要5至10万。而后需要对离心后
的菌体进行洗涤，洗涤的目的是去除培养液等杂质，且使乳酸菌所处的液体环境达到电转
的要求，但是多次洗涤离心也会因操作带来外源的微生物，影响实验的精度。
实用新型内容

[0003] 为解决上述技术问题中的至少之一，本申请提供一种培养乳酸菌感受态细胞的制备装置，所采用的技术方案如下。

[0004] 本申请所提供的培养乳酸菌感受态细胞的制备装置包括泵体、换热器和培养器，所述泵体的入口连接有第一进液管；所述换热器的入口通过管路连接所述泵体的出口；所
述培养器包括第二进液管和N个培养室，N大于或等于2，且N取整数，乳酸菌菌种接入第一个
所述培养室，各所述培养室的出口分别通过具有电磁阀的管路连接所述第一进液管，各所
述培养室的入口分别通过具有电磁阀的管路连接所述第二进液管，所述换热器的出口通过
具有电磁阀的管路连接所述第二进液管；其中，第i个所述培养室小于第i+1个所述培养室
的容积，i大于或等于1且i小于N，i取整数。

[0005] 本申请的某些实施例中，所述制备装置包括第一过滤器和废液腔室，所述第一过滤器的入口通过具有电磁阀的管路连接所述换热器的出口，所述第一过滤器的清液出口通
过具有电磁阀的管路连接所述废液腔室的入口，所述第一过滤器的浓菌体出口通过具有电
磁阀的管路连接所述第二进液管。

[0006] 本申请的某些实施例中，所述制备装置包括第二过滤器和至少一个洗涤液腔室，所述洗涤液腔室的出口通过具有电磁阀的管路连接所述第二过滤器的入口，所述第二过滤
器的出口通过具有电磁阀的管路连接所述第一进液管。

[0007] 本申请的某些实施例中，所述制备装置包括纯水腔室，所述纯水腔室的出口通过具有电磁阀的管路连接所述第二过滤器的入口。

[0008] 本申请的某些实施例中，所述制备装置包括消毒液腔室，所述消毒液腔室通过具有电磁阀的管路连接所述第一进液管。

[0009] 本申请的某些实施例中，所述制备装置包括清洁液腔室，所述清洁液腔室通过具有电磁阀的管路连接所述第一进液管。

[0010] 本申请的某些实施例中，所述制备装置包括第一空气过滤器，所述第一空气过滤器的出口分别通过具有电磁阀的管路连接第j个至第N个所述培养室，j大于1且j小于N，j取
整数。

[0011] 本申请的某些实施例中，所述培养器包括第一出液管和第二出液管，所述第一出液管和所述第二出液管均设置于第N个所述培养室的出口，所述第一出液管和所述第二出
液管均连接所述第一进液管，所述第一出液管和所述第二进液管均设置有电磁阀，所述第
一出液管伸入至第N个所述培养室的底部，所述第二出液管伸入至第N个所述培养室中靠近
顶部的位置。

[0012] 本申请的某些实施例中，所述培养器包括三个所述培养室，三个所述培养室分别为所述一级培养室、所述二级培养室和所述三级培养室，且所述一级培养室、所述二级培养
室和所述三级培养室的容积比为1：10：100或1：20：200。

[0013] 本申请的某些实施例中，所述制备装置包括设置于第N个所述培养室侧壁的温度计和/或设置于第N个所述培养室侧壁的pH计。

[0014] 本申请的实施例至少具有以下有益效果：培养器在培养乳酸菌过程中，通过控制各培养室入口处和出口处电磁阀的开闭，实现乳酸菌在培养室与换热器之间的循环培养以
及乳酸菌从其中一个培养室转移至另一个培养室，在扩培过程中通过电磁阀的开闭实现转
接，全程自动化、无菌操作，避免造成污染。本申请可广泛应用于生物工程技术领域。

[0024] 下面结合图1至图2详细描述本申请的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下
面通过参考附图描述的实施例是示例性的，仅用于解释本申请，而不能理解为对本申请的
限制。

[0025] 在本申请的描述中，需要理解的是，若出现术语“中心”、“中部”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“轴向”、“径向”、“周向”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本申请和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本申请的限制。限定有“第
一”、“第二”的特征是用于区分特征名称，而非具有特殊含义，此外，限定有“第一”、“第二”
的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本申请的描述中，除非另有说
明，“多个”的含义是两个或两个以上。

[0026] 在本申请的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可
以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是
两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本
申请中的具体含义。

[0027] 本申请涉及一种培养乳酸菌感受态细胞的制备装置，制备装置包括泵体110、换热器120和培养器，泵体110的入口连接有第一进液管211,换热器120的入口通过管路连接泵
体110的出口。可以理解的是，在泵体110的作用下，培养器中的培养液输送至换热器120，换
热器120与培养液进行热交换，换热器120能够实现微生物的特定温度培养，且能够在制备
感受态细胞时对培养液及时降温，以使细胞处于停止增长的状态，从而更有利与保持细胞
处于该阶段时的状态和活力。

[0028] 具体地，培养器包括N个培养室，N大于或等于2，且N取整数。N个培养室中均加入有培养乳酸菌所需的培养基，且乳酸菌菌种接入第一个培养室。进一步地，第i个培养室小于
第i+1个培养室的容积，i大于或等于1且i小于N，i取整数，从而实现乳酸菌逐级扩培。

[0029] 进一步地，培养器还包括第二进液管212，各培养室的入口分别通过具有电磁阀的管路连接第二进液管212，各培养室的出口分别通过具有电磁阀的管路连接第一进液管
211。换热器120的出口通过具有电磁阀的管路连接第二进液管212，结合附图，换热器120的
出口通过第三出液管223连接第二进液管212，第三出液管223设置有电磁阀。

[0030] 乳酸菌在培养过程中，在泵体110的作用下，培养液在第i个培养室和换热器120之间循环流动，以进行循环培养；当培养液达到扩培要求后，则将培养液转移至第i+1个培养
室，进一步地进行循环培养。逐级扩培，直到在第N个培养室中培养至可以进行感受态细胞
制作。

[0031] 可以理解的是，通过分别控制各培养室的入口处及出口处管路上电磁阀的开闭，则可实现培养液的循环培养以及从第i个培养室转移至第i+1个培养室。具体地，第i个培养
室入口处和出口处的电磁阀均开启，其余培养室入口处和出口处的电磁阀均关闭，在泵体
110的作用下，培养液在第i个培养室和换热器120之间的循环流动。关闭第i个培养室入口
处的电磁阀，开启第i个培养室出口处的电磁阀以及第i+1个培养室入口处和出口处的电磁
阀，其余培养室入口处和出口处的电磁阀均关闭，在泵体110的作用下，第i个培养室中的培
养液逐渐转移至第i+1个培养室，之后关闭第i个培养室出口处的电磁阀。

[0032] 制备装置包括温度计501，温度计501用于测量培养器中的发酵温度，具体地，温度计501设置于第N个培养室的侧壁。制备装置包括pH计502，pH计502用于测量培养器中培养
液的pH值，具体地，pH计502设置于第N个培养室的侧壁。

[0033] 进一步地，制备装置包括第一空气过滤器331，第一空气过滤器331的出口通过具有电磁阀的管路分别连接第j个培养室至第N个培养室，j大于1且j小于N，j取整数。这种情
况下，当开启泵体110将培养液从第j个培养室转移至第j+1个培养室时，随着第j个培养室
中培养液逐渐抽空，第j个培养室中产生真空及负压，若开启第一空气过滤器331与第j个培
养室之间的电磁阀，外界的气体或来自气源的气体经第一空气过滤器331处理后进入第j个
培养室，从而平衡第j个培养室中的负压，有助于泵体110抽吸第j个培养室中的培养液。

[0034] 结合附图，制备装置包括第一过滤器310和废液腔室130，第一过滤器310的入口通过具有电磁阀的管路连接换热器120的出口，第一过滤器310的清液出口311通过具有电磁
阀的管路连接废液腔室130的入口，第一过滤器310的浓菌体出口312通过具有电磁阀的管
路连接第二进液管212，第一过滤器310设置为液体过滤器，用于过滤并浓缩乳酸菌，且能够
协助洗涤和除杂。可以理解的是，乳酸菌完成培养后集中在第N个培养室中，之后进行浓缩
处理，第一过滤器310能够替代相关技术中的离心机，实现菌体与培养液的分离。

[0035] 具体地，关闭换热器120的出口与第二进液管212之间的电磁阀，即关闭第三出液管223上的电磁阀，开启换热器120出口与第一过滤器310入口之间管路上的电磁阀以及第
一过滤器310出口与第二进液管212之间的电磁阀，开启第N个培养室入口处和出口处的电
磁阀，其余培养室入口处和出口处的电磁阀均关闭，在泵体110的作用下，第N个培养室中培
养液经换热器120后进入第一过滤器310，第一过滤器310用于过滤培养液，过滤所获得的清
液排放至废液腔室130，浓菌体回流至第N个培养室，以实现乳酸菌的浓缩。

[0036] 可以理解的是，第一过滤器310每次浓缩处理培养液所获得的清液均排放至废液腔室130。一些示例中，废液腔室130设置为废液瓶。

[0037] 一些实施例中，培养器包括第一出液管221和第二出液管222，第一出液管221和第二出液管222均设置于第N个培养室的出口。结合附图，第一出液管221和第二出液管222均
连接第一进液管211，第一出液管221和第二进液管212均设置有电磁阀，第一出液管221伸
入至第N个培养室的底部，第二出液管222伸入至第N个培养室中靠近顶部的位置。这种情况
下，在浓缩处理乳酸菌时，在浓菌体回流至第N个培养室的初期，开启第一出液管221的电磁
阀并关闭第二出液管222的电磁阀，第N个培养室通过第一出液管221连接第一进液管211，
随着浓菌体逐渐回流至第N个培养室，浓菌体的液面逐渐升上，培养液浓缩工艺将要完成
时，关闭第一出液管221的电磁阀并开启第二出液管222的电磁阀，则第N个培养室通过第二
出液管222连接第一进液管211，有助于在泵体110的作用下将各管路中的浓菌体抽吸至第N
个培养室。

[0038] 进一步地，第一空气过滤器331的出口通过具有电磁阀的管路连接第N个培养室。在第N个培养室通过第二出液管222连接第一进液管211时，外界的气体或来气气源的气体
经第一空气过滤器331处理后进入第N个培养室，能够平衡第N个培养室中的负压真空，有助
于泵体110将管路中的浓菌体充分抽吸干净。

[0039] 制备装置包括第二过滤器320和至少一个洗涤液腔室141，洗涤液腔室141的出口通过具有电磁阀的管路连接第二过滤器320的入口，第二过滤器320的出口通过具有电磁阀
的管路连接第一进液管211，第二过滤器320设置为液体过滤器，用于除杂和除菌。可以理解
的是，在泵体110的作用下，洗涤液经过第二过滤器320处理后进入换热器120，经过换热后
洗涤液进入第N个培养室，洗涤液与培养液混合并对菌体进行洗涤。在洗涤液与浓菌体混合
均匀后，通过第一过滤器310处理获得菌体，并将菌体回流至第N个培养室。

[0040] 一些实施例中，在洗涤液腔室141设置为至少两个的情况下，各洗涤液腔室141分别储放不同的洗涤液，并通过开闭相应管路的电磁阀，以按照顺序先后洗涤第N个培养室中
的菌体。

[0041] 最后洗涤和浓缩所获得的浓菌体从第N个培养室转移至第一个培养室，便完成了乳酸菌感受态细胞的制备。具体地，关闭第N个培养室入口处的电磁阀，开启第一个培养室
入口和出口处的电磁阀，启动泵体110，浓菌体从第N个培养室转移至第一个培养室。此时可
以从第一个培养室中取出制备好的乳酸菌感受态细胞。

[0042] 一些示例中，第一个培养室连接有具有电磁阀的第一管路231，乳酸菌菌种能够从第一管路231接入第一个培养室，制备好的乳酸菌感受态细胞能够从第一管路231取出。一
些示例中，第一管路231的端口设置橡皮膜，以注射器扎入橡皮膜，则可实现乳酸菌菌种的
接入或乳酸菌感受态细胞的提取。

[0043] 结合附图，制备装置包括纯水腔室142，纯水腔室142的出口通过具有电磁阀的管路连接第二过滤器320的入口，纯水用于冲洗制备装置的内部。进一步地，制备装置包括消
毒液腔室143，消毒液腔室143通过具有电磁阀的管路连接第一进液管211，消毒液用于为制
备装置的内部杀菌消毒。进一步地，制备装置包括清洁液腔室144，清洁液腔室144通过具有
电磁阀的管路连接第一进液管211，清洁液用于冲洗制备装置中的残液。

[0044] 可以理解的是，乳酸菌感受态细胞培养并提取完成后，需要对制备装置进行清洗和消毒。具体地，在泵体110作用下，并通过控制相应管路上电磁阀的开闭，先用纯水初步清
洗泵体110、换热器120、第一过滤器310和各培养室以及各管路，并将废液收集至废液腔室
130。之后，再用清洁液深度清洗泵体110、换热器120、第一过滤器310和各培养室以及各管
路，并将废液收集至废液腔室130。最后用消毒液对泵体110、换热器120、第一过滤器310和
各培养室以及各管路进行消毒。

[0045] 一些示例中，清洗液采用强碱性或强酸性溶液。

[0046] 下面以结合具体的实施例详细描述本申请的内容，应注意的是，下述描述仅是示例性说明，而不是对本申请的具体限制。

[0047] 本申请涉及一种培养乳酸菌感受态细胞的制备装置，制备装置包括泵体110、换热器120和培养器，泵体110设置为蠕动泵，培养器包括三个培养室，三个培养室分别为一级培
养室401、二级培养室402和三级培养室403，一级培养室401、二级培养室402和三级培养室
403分别加入有培养乳酸菌所需的培养基，乳酸菌菌种接入一级培养室401。

[0048] 进一步地，培养器还包括第二进液管212，一级培养室401、二级培养室402和三级培养室403的入口分别通过具有电磁阀的管路连接第二进液管212，一级培养室401、二级培
养室402和三级培养室403的出口分别通过具有电磁阀的管路连接泵体110入口处的第一进
液管211。结合附图，换热器120的出口通过具有电磁阀的管路连接第二进液管212，具体地，
换热器120通过第三出液管223连接第二进液管212，第三出液管223设置有电磁阀。

[0049] 乳酸菌在培养过程中，为实现培养液的逐级扩培，培养器中设计一级培养室401小于二级培养室402的容积，二级培养室402小于三级培养室403的容积。进一步地，培养器中
设计一级培养室401、二级培养室402和三级培养室403的容积比为1：10：100或1：20：200。

[0050] 在泵体110的作用下，培养液在一级培养室401和换热器120之间循环流动，实现循环培养；当一级培养室401中的培养液达到扩培要求后，将培养液从一级培养室401转移至
二级培养室402，并通过泵体110使培养液在二级培养室402和换热器120之间循环流动，实
现进一步地循环培养；当二级培养室402中的培养液达到扩培要求后，将培养液从二级培养
室402转移至三级培养室403，并通过泵体110使培养液在三级培养室403和换热器120之间
循环流动，实现进一步地循环培养直到可以进行感受态细胞制作的时间。

[0051] 通过分别控制各培养室的入口处及出口处管路上电磁阀的开闭，则可实现培养液从一级培养室401转移至二级培养室402或者从二级培养室402转移至三级培养室403。具体
地，关闭一级培养室401入口处的电磁阀，开启一级培养室401出口处的电磁阀以及二级培
养室402入口和出口处的电磁阀，在泵体110的作用下，则可将培养液从一级培养室401转移
至二级培养室402，之后关闭一级培养室401出口处的电磁阀。关闭二级培养室402入口处的
电磁阀，开启二级培养室402出口处的电磁阀以及三级培养室403入口和出口处的电磁阀，
在泵体110的作用下，则可将培养液从二级培养室402转移至三级培养室403。

[0052] 可以理解的是，温度计501和pH计502设置于三级培养室403的侧壁，通过读取培养液的温度和pH值监控感受态细胞的培养过程。

[0053] 进一步地，制备装置包括第一空气过滤器331，结合附图，第一空气过滤器331的出口通过具有电磁阀的管路连接二级培养室402。这种情况下，当开启泵体110将培养液从二
级培养室402转移至三级培养室403时，由于二级培养室402的容积大，抽空培养液后会产生
真空及负压，因此开启第一空气过滤器331与二级培养室402之间的电磁阀，外界的气体或
来自气源的气体经第一空气过滤器331处理后进入二级培养室402，从而平衡二级培养室
402中的负压，有助于泵体110抽吸二级培养室402中的培养液。

[0054] 结合附图，制备装置包括第一过滤器310和废液腔室130，第一过滤器310的入口通过具有电磁阀的管路连接换热器120的出口，第一过滤器310的清液出口311通过具有电磁
阀的管路连接废液腔室130的入口，第一过滤器310的浓菌体出口312通过具有电磁阀的管
路连接第二进液管212。可以理解的是，在泵体110的作用下，三级培养室403中培养液经换
热器120后进入第一过滤器310，第一过滤器310用于过滤培养液，过滤所获得的清液排放至
废液腔室130，浓菌体回流至三级培养室403，以实现乳酸菌的浓缩。

[0055] 培养器包括第一出液管221和第二出液管222，第一出液管221和第二出液管222均设置于三级培养室403的出口。结合附图，第一出液管221和第二出液管222均连接第一进液
管211，第一出液管221和第二进液管212均设置有电磁阀，第一出液管221伸入至三级培养
室403的底部，第二出液管222伸入至三级培养室403中靠近顶部的位置。

[0056] 具体地，在浓缩处理乳酸菌时，在浓菌体回流至三级培养室403的初期，开启第一出液管221的电磁阀并关闭第二出液管222的电磁阀，三级培养室403通过第一出液管221连
接第一进液管211，随着浓菌体逐渐回流至三级培养室403，浓菌体的液面逐渐升上，培养液
浓缩工艺将要完成时，关闭第一出液管221的电磁阀并开启第二出液管222的电磁阀，则三
级培养室403通过第二出液管222连接第一进液管211，有助于在泵体110的作用下将各管路
中的浓菌体抽吸至三级培养室403。

[0057] 进一步地，第一空气过滤器331的出口通过具有电磁阀的管路连接三级培养室403。在三级培养室403通过第二出液管222连接第一进液管211时，外界的气体或来气气源
的气体经第一空气过滤器331处理后进入三级培养室403，能够平衡三级培养室403中的负
压真空，有助于泵体110将管路中的浓菌体充分抽吸干净。

[0058] 制备装置包括第二过滤器320和洗涤液腔室141，洗涤液腔室141的出口通过具有电磁阀的管路连接第二过滤器320的入口，第二过滤器320的出口通过具有电磁阀的管路连
接第一进液管211。可以理解的是，在泵体110的作用下，洗涤液经过第二过滤器320处理后
进入换热器120，经过换热后洗涤液进入三级培养室403，洗涤液与培养液混合并对菌体进
行洗涤。之后将通过第一过滤器310处理获得菌体，并将菌体回流至三级培养室403。

[0059] 进一步地，洗涤液腔室141设置为两个，两个洗涤液腔室141分别储放洗涤液一和洗涤液二。先用洗涤液一冲洗菌体，再用洗涤液二冲洗菌体。其中，洗涤液一包含：甘油、蔗
糖以及超纯水；洗涤液二包含：甘油、蔗糖、0.5M EDTA母液以及超纯水。

[0060] 最后洗涤和浓缩所获得的浓菌体从三级培养室403转移至一级培养室401，便完成了乳酸菌感受态细胞的制备。具体地，关闭三级培养室403入口处的电磁阀，开启一级培养
室401入口和出口处的电磁阀，启动泵体110，浓菌体从三级培养室403转移至一级培养室
401。此时可以从一级培养室401中取出制备好的乳酸菌感受态细胞。

[0061] 一级培养室401连接有具有电磁阀的第一管路231，乳酸菌菌种能够从第一管路231接入一级培养室401，制备好的乳酸菌感受态细胞能够从第一管路231取出。一些示例
中，第一管路231的端口设置橡皮膜，以注射器扎入橡皮膜，则可实现乳酸菌菌种的接入或
乳酸菌感受态细胞的提取。

[0062] 结合附图，制备装置包括纯水腔室142、消毒液腔室143和清洁液腔室144，纯水腔室142的出口通过具有电磁阀的管路连接第二过滤器320的入口，消毒液腔室143和清洁液
腔室144分别通过具有电磁阀的管路连接第一进液管211。可以理解的是，乳酸菌感受态细
胞培养并提取完成后，需要对制备装置的各个部件和管路进行清洗和消毒。

[0063] 具体地，在泵体110作用下，并通过控制相应管路上电磁阀的开闭，先用纯水初步清洗泵体110、第一进液管211、换热器120、第一过滤器310、第二进液管212、一级培养室
401、二级培养室402和三级培养室403，并将废液收集至废液腔室130。之后，再用清洁液深
度清洗泵体110、第一进液管211、换热器120、第一过滤器310、第二进液管212、一级培养室
401、二级培养室402和三级培养室403，并将废液收集至废液腔室130。最后用消毒液对泵体
110、第一进液管211、换热器120、第一过滤器310、第二进液管212、一级培养室401、二级培
养室402和三级培养室403进行消毒。

[0064] 本申请涉及一种培养乳酸菌感受态细胞的制备工艺，制备工艺采用制备装置实施，以自动制备乳酸菌感受态细胞，制备装置的结构如前所述，具体地，制备装置包括泵体
110、换热器120和培养器，培养器包括一级培养室401、二级培养室402和三级培养室403。

[0065] 制备工艺的前处理工艺中，向各培养室加入培养液，并高温灭菌，培养液包含：M17肉汤、0.5％葡萄糖、2.5％甘氨酸、17.1％蔗糖。

[0066] 制备工艺包括乳酸菌的培养工艺，培养工艺包括如下流程。

[0067] P1，关闭二级培养室402和三级培养室403的入口及出口，一级培养室401的入口和出口分别连通换热器120和泵体110，将乳酸菌菌种接入一级培养室401，启动泵体110，一级
培养室401中的培养液经管路流至换热器120并回流至一级培养室401。

[0068] 具体地，关闭二级培养室402和三级培养室403的入口处及出口处的电磁阀，打开一级培养室401的入口处和出口处的电磁阀，打开换热器120的出口连接至第二进液管212
的管路上的电磁阀，一级培养室401的出口、第一进液管211、换热器120、第二进液管212、一
级培养室401的入口形成循环流路，以便循环培养。

[0069] P2，培养液循环流动，直到培养时间或菌体密度达到设定值，关闭一级培养室401的入口，二级培养室402的入口和出口分别连通换热器120和泵体110，启动泵体110，一级培
养室401中的培养液转移至二级培养室402，关闭一级培养室401的出口。

[0070] 具体地，关闭一级培养室401入口处的电磁阀，开启二级培养室402的入口处及出口处的电磁阀，一级培养室401的出口、第一进液管211、换热器120、第二进液管212、二级培
养室402的入口形成流路，以便完成培养液从一级培养室401转移至二级培养室402。之后，
关闭一级培养室401出口处的电磁阀，二级培养室402的出口、第一进液管211、换热器120、
第二进液管212、二级培养室402的入口形成循环流路，以便循环培养。

[0071] P3，培养液循环流动，直到培养时间或菌体密度达到设定值，关闭二级培养室402的入口，三级培养室403的入口和出口分别连通换热器120和泵体110，启动泵体110，二级培
养室402的培养液转移至三级培养室403，关闭二级培养室402的出口。

[0072] 具体地，关闭二级培养室402入口处的电磁阀，开启三级培养室403的入口处及出口处的电磁阀，二级培养室402的出口、第一进液管211、换热器120、第二进液管212、三级培
养室403的入口形成流路，以便完成培养液从二级培养室402转移至三级培养室403。之后，
关闭二级培养室402出口处的电磁阀，三级培养室403的出口、第一进液管211、换热器120、
第二进液管212、三级培养室403的入口形成循环流路，以便循环培养。

[0073] P4，培养液循环流动，直到可以进行感受态细胞制作。

[0074] 进一步地，制备工艺包括乳酸菌的浓缩工艺，乳酸菌完成培养工艺后，进行浓缩工艺，以获得浓菌体。具体地，浓缩工艺包括如下流程。

[0075] N1，关闭换热器120的出口与第二进液管212之间的连通，换热器120的出口连通第一过滤器310，第一过滤器310分别连通废液腔室130和第二进液管212。

[0076] N2，启动泵体110，三级培养室403中的培养液通过管路流过换热器120和第一过滤器310，第一过滤器310过滤分离菌体和清液，清液从第一过滤器310的清液出口311排至废
液腔室130，菌体从第一过滤器310的菌体出口经第二进液管212回流至三级培养室403。

[0077] 具体地，关闭换热器120的出口连接至第二进液管212的管路上的电磁阀，打开换热器120的出口连接至第一过滤器310入口的管路上的电磁阀，打开第一过滤器310的浓菌
体出口312连接至第二进液管212的管路上的电磁阀以及第一过滤器310的清液出口311连
接至废液腔室130的管路上的电磁阀，三级培养室403的出口、第一进液管211、换热器120、
第一过滤器310、第二进液管212、三级培养室403的入口形成培养液的循环流路，实现培养
液的循环和浓缩，从而获得浓菌体。

[0078] 进一步地，制备工艺包括乳酸菌的洗涤工艺，乳酸菌完成浓缩工艺后，进行洗涤工艺，以获得菌体。具体地，洗涤工艺包括如下流程。

[0079] X1，将洗涤液腔室141的出口连通第二过滤器320，第二过滤器320连通第一进液管211。

[0080] X2，关闭第一过滤器310与换热器120和第二进液管212的连通，换热器120的出口连通第二进液管212，启动泵体110，洗涤液经换热器120处理后进入三级培养室403。

[0081] 具体地，打开洗涤液腔室141出口处的电磁阀以及第二过滤器320连通至第一进液管211的管路上的电磁阀，关闭换热器120的出口连接至第一过滤器310的入口的管路上的
电磁阀，关闭第一过滤器310的出口连接至第二进液管212的管路上的电磁阀，打开换热器
120的出口连接至第二进液管212的管路上的电磁阀，洗涤液腔室141的出口、第二过滤器
320、第一进液管211、换热器120、第二进液管212、三级培养室403的入口形成流路，以便洗
涤液从洗涤液腔室141流入三级培养室403，洗涤液与菌体混合并对菌体进行洗涤。

[0082] X3，进行步骤N1和步骤N2，对洗涤液和菌体的混合液进行过滤和浓缩。

[0083] 需要说明的是，在洗涤液腔室141设置为至少两个的情况下，按照洗涤液的洗涤顺序分别开闭相应洗涤液腔室141出口的电磁阀，进行步骤X1至步骤X3，以使各洗涤液腔室
141的洗涤液分别对菌体进行洗涤。

[0084] X4，关闭换热器120的出口与第二进液管212之间的连通，换热器120的出口连通第一过滤器310，第一过滤器310分别连通废液腔室130和第二进液管212，关闭三级培养室403
的入口，一级培养室401的入口连通第二进液管212，一级培养室401的出口连通第一进液管
211。

[0085] 具体地，洗涤完毕后，关闭换热器120的出口连接至第二进液管212的管路上的电磁阀，打开换热器120出口连接至第一过滤器310入口的管路上的电磁阀，打开第一过滤器
310清液出口311连接至废液腔室130的管路上的电磁阀以及浓菌体出口312连接至第二进
液管212的管路上的电磁阀，关闭三级培养室403入口处的电磁阀，打开一级培养室401入口
处和出口处的电磁阀，三级培养室403的出口、第一进液管211、换热器120、第一过滤器310、
第二进液管212、一级培养室401的入口形成流路，以便培养液能够经第一过滤器310处理浓
缩后回流至一级培养室401。

[0086] X5，启动泵体110，三级培养室403中的菌体经第一过滤器310浓缩后进入一级培养室401，乳酸菌感受态细胞制作完成，此时可以从一级培养室401取出乳酸菌感受态细胞。

[0087] 进一步地，制备工艺包括制备装置的清洗工艺，在洗涤工艺完成后，进行清洗工艺，从而清洗制备装置的内腔，以便进行下一次感受态细胞的制备。具体地，清洗工艺包括
如下流程：先向制备装置中通入纯水清洗泵体110、第一进液管211、换热器120、第一过滤器
310、第二进液管212和各级培养室，并将废液收集至废液腔室130。再向制备装置中通入清
洁液，对各部件和管路进行深度清洗。最后用消毒液对制备装置中的各部件和管路进行消
毒。

[0088] 可以理解的是，制备工艺的实施，由制备装置的程序自动各部件的运行和各电磁阀的开闭，减少人为操作干预，实验可重复度高，且制备过程无暴露，能够自动清洗、消毒，
不易污染微生物，实验更加安全。

[0089] 在本说明书的描述中，若出现参考术语“一个实施例”、“一些实例”、“一些实施例”、“示意性实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本申请的至少一个实施例或示例中。在本说
明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特
征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

[0090] 以上结合附图对本申请的实施方式作了详细说明，但是本申请不限于上述实施方式，在所述技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本申请宗旨的前
提下作出各种变化。

[0091] 本申请的描述中，专利名称若出现“、”，表示“和”的关系，而不是“或”的关系。例如专利名称为“一种A、B”，说明本申请所要求保护的内容为：主题名称为A的技术方案和主题
名称为B的技术方案。