[0001] 本发明涉及黄化茶叶繁育领域，尤其涉及一种黄化茶树品种的茶苗扦插繁育方法。

[0002] 在‘中黄1号’的繁育推广过程中，人们发现用种子播种的‘中黄1号’有90％～95％的茶苗不会出现黄芽黄叶特征，但采用短穗扦插方法育成的后代可长期保持母树优良种性，具有较大的繁殖系数，然而在扦插繁育过程中人们也发现‘中黄1号’茶苗的出圃率与苗木质量较一般绿叶品种低，急需对茶苗的无性繁育技术进行进一步研究以提高苗木的繁育质量及繁育效益。一般情况下，常规的育苗技术其中小叶种扦插密度为20～25万株/亩，而目前川西茶区研发和推广的高密高效繁育技术(一般用于绿叶品种)，短穗的扦插密度可达2
40多万株/667m，茶苗的出圃率及育苗效益可提高1倍以上。由此可见，扦插密度对扦插效益具有较大影响。

[0003] 而“中黄1号”是嫩梢呈黄色的光敏感性茶树品种，其品种和短穗生育特性与叶色为绿色的茶树品种有一定差异，因此研究与品种配套的茶苗繁育技术对该品种的推广具有重要意义。

[0004] 发明CN104472136A中公开了一种西南地区茶树的种植栽培方法，该发明工序包括：茶树种植地的选择；种植地的整理；种苗的选择；栽培时间：9月底10月中旬；合理密度；茶树的管理等。但该发明中的种植栽培方法仅针对西南地区茶树，且各个品种茶树种植条件也存在差异，无法采用统一栽培方法进行，其栽培条件不适用于‘中黄1号’等黄化茶叶。

[0005] 发明CN109328839B中公开了一种黄化茶扦插繁殖方法。该方法包括以下步骤：(1)苗床建设；(2)苗床消毒和遮阴；(3)插枝采集：插枝选自青壮年黄化茶树上年深修剪或台刈更新培育的一年生粗壮枝条；(4)插枝处理：选取步骤(3)所得插枝的中下部近木质化或木质化部分，对插枝进行削剪，削剪后的插穗上具有一片饱满腋芽和一片健壮叶片；(5)扦插；(6)水分管理。但该扦插方法仅对扦插具体方法做一定要求，而黄化茶扦插需根据其特性对气候、温度、具体扦插密度等条件均作出一定要求。

[0006] 因此，如何对黄化茶叶扦插条件及方法进行合理规划和要求，以实现黄化茶叶扦插高成活率、高合格率和高出圃率是本领域技术人员亟待解决的问题。

[0070] 为了更好的理解上述技术方案，下面将结合说明书以及具体的实施方式对上述技术方案做详细的说明。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

[0071] 在本发明实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本发明。在本发明实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义，“多种”一般包含至少两种。

[0072] 还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的商品或者装置不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种商品或者装置所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的商品或者装置中还存在另外的相同要素。

[0073] 参考附图1～3，本发明提供一种黄化茶树品种的茶苗扦插繁育方法，扦插繁育条件包括：

[0074] (1)扦插地点选择：选择亚热带湿润季风气候地区，年均降雨量为1000～1500mm，年均日照数为1200～1400h，年均气温15～18℃，全年无霜期不低于250天；

[0075] 此外，若年均日照数若在1200～1300h，则在种苗栽培过程中对其进行补光；种苗的补光可在白天和/或夜间进行、通过搭建温室提供人工光源或使用LED生长灯、和/或增加在苗圃周围适当平铺银白色反光板进行补光等方式。

[0076] (2)种苗选择：光照敏感型黄化品种，例如中黄1号、中黄2号，插穗长度为3～5cm，粗度在2mm以上，粗度优选为3～5mm，每穗至少有1个饱满的腋芽；优选经过插穗预处理。

[0077] (3)扦插时间为8月至10月之间，优选为9月上旬。

[0078] (4)扦插密度：200000～500000株/亩，优选为300000～400000株/亩。

[0079] 扦插繁育方法具体包括：

[0080] S1、苗床预处理：

[0081] (1)使用前5～10天进行苗床基质预处理，在苗床上搭建荫蔽度在55～65％的荫棚；

[0082] 优选将苗床基质分层铺设，从下到上依次包括底土层、芯土层和表土层，并对各层基质预处理，包括：

[0083] 1.1底土层，厚度为10～20cm，包括以下重量份的原料组分：酸性红壤土30～50份、河砂30～50份、草木灰10～20份、珍珠岩粉5～15份、泥炭土5～10份；将底土层原料混匀铺设后，用0.1～0.5wt％的高锰酸钾溶液浇透，薄膜覆盖闷床2～4天，揭膜晾干放置2～5天；

[0084] 1.2芯土层，厚度为3～5cm，包括黄壤心土、河砂和促进剂，黄壤心土和河砂质量比1：(0.5～0.8)，促进剂用量为5～10kg/亩，在芯土层的黄壤心土和河砂经辐照灭菌(辐照剂量≥10kGy)后加入促进剂混合；

[0085] 促进剂包括以下重量份的组分：水溶性壳聚糖10～20份、菌类发酵液10～20份、糖蜜发酵液5～10份、赤霉素1～5份、泥炭3～8份、磷酸氢二钾1～3份，菌类发酵液中活菌数≥9
10个/克。

[0086] 所述菌类发酵液包括枯草芽孢杆菌发酵液、假单胞杆菌发酵液、费氏中华根瘤菌发酵液、木霉发酵液、曲霉菌发酵液、青霉菌发酵液、念珠菌发酵液、地衣芽孢杆菌发酵液、纤维放线菌发酵液、链霉菌发酵液、诺卡氏菌发酵液中的至少一种；优选费氏中华根瘤菌发酵液、黄绿木霉发酵液、地衣芽孢杆菌发酵液以质量比(3～5)：(2～5)：(2～5)复配混合，更优选质量比为4:3:3。

[0087] 1.3表土层，厚度为5～8cm，包括红壤心土，所述红壤心土经辐照灭菌(辐照剂量≥10kGy)后铺设。

[0088] S2、扦插前对苗床浇水，使土壤含水量为60％～70％；待水分下渗后，土壤呈“湿而不黏”的松软状态时开始扦插，既可防止土壤过干造成扦插过程中损伤插穗，又解决了壤过潮湿、扦插时容易黏手、影响扦插的质量和工效低等问题。采用短穗扦插，以插穗与土壤紧贴的方式，将插穗直插或稍斜插入土中，露出叶柄，边插边将插穗附近的土稍压实使插穗与土壤密接，以利于发根。优选的，种苗短穗扦插粗度为3～5mm，每个插穗至少有1个饱满的腋芽；更优选，扦插前对插穗进行预处理，包括以下步骤：

[0089] (1)插穗采用3～5g/L的多菌灵溶液浸泡1～3分钟；

[0090] (2)插穗在促生根混合物中浸泡30～60分钟后进行扦插；

[0091] 促生根混合物包括以下重量份的组分：萘乙酸0.1～0.2份、吲哚丁酸0.03～0.1份、二乙氨基乙基己酸酯0.1～0.2份、苯丙氨酸0.01～0.1份、蔗糖1～3份、水50～150份。优选的，促生根混合物还包括缓释剂，选自环糊精、钠基膨润土、滑石粉中的至少一种，缓释剂与水的重量比1：(3～8)。促生根混合物混合均匀后，缓释剂将各组份物质吸附固定形成糊状胶体，插穗放入浸泡时，在插穗表面形成药剂层，将各促生根组份锁定在插穗表面，长期持续发挥作用，基本不受浇水等因素的影响，延长各组份持效期，提高实际利用率。

[0092] S3、扦插之后浇透水，优选浇水同时喷施一次500～800倍多菌灵溶液，使用量为2
0.8～1.5L/m。

[0093] 扦插之后的苗期管理和田间管理也非常重要。优选的，扦插后还包括以下步骤：

[0094] (1)每隔15～20天根施一次质量分数为0.5～0.8wt％的硫酸亚铁营养液，每次根施量为55～65mL/株，共3～4次；每隔7天喷施500～800倍百菌清或500～800倍多菌灵，使用2
量为0.8～1.2L/m；其中，在第一次和第二次施加营养液之间对苗床喷施0.2～0.5g/L磷酸二氢钾；

[0095] (2)50～60天后拆除荫棚；

[0096] (3)拆除荫棚后，采用1～2v/v％的尿素溶液每20～30天追肥一次，共2～4次。

[0097] 实施例

[0098] 试验在四川省广元市旺苍县木门镇三合村茶苗繁育基地开展，试验地海拔860m，为亚热带湿润季风气候，年均降雨量1200mm，年均日照数为1355.3h，年均气温16.1℃，全年无霜期约260天。

[0099] 分别于2022年8月10日(A1)、9月10日(A2)和10月10日(A3)三个时间段开展扦插实验。扦插密度设置为高密度(B1，45万株/亩)、中密度(B2，35万株/亩)和低密度(B3，25万株/亩)三种方式。采用四种茶苗扦插方法(C1、C2、C3、C4)进行具体实施。共计得到12组样本：A1B1C1、A1B2C1、A1B3C1、A2B1C1、A2B2C1、A2B3C1、A3B1C1、A3B2C1、A3B3C1，A2B2C2，A2B2C3，A2B2C4每组样本包括5000株短穗，重复3次。选取同样健壮的‘中黄1号’短穗进行扦插，后续苗圃管理处理一致。

[0100] 扦插方法C1，包括：

[0101] S1、苗床预处理：

[0102] 将当地底土在阳光下或温室中晒3天，用40目筛过筛、铺设，之后用0.2wt％的高锰酸钾溶液浇透，薄膜覆盖闷床3天，揭膜晾干放置3天；在苗床上搭建荫蔽度在60±3％的荫棚；

[0103] S2、扦插前对苗床浇水，使土壤含水量约为65％；待水分下渗后，土壤呈“湿而不黏”的松软状态时开始扦插，采用短穗扦插，以插穗与土壤紧贴的方式，将插穗稍斜插入土中，露出叶柄，边插边将插穗附近的土稍压实。种苗短穗扦插粗度为3～5mm，每个插穗至少有1个饱满的腋芽，插穗采用4g/L的多菌灵溶液浸泡2分钟；

[0104] S3、扦插之后浇透水，浇水同时喷施一次800mg/L多菌灵溶液，使用量为1.2L/m2。

[0105] S4、扦插后管理：每隔15天根施一次0.6wt％硫酸亚铁营养液，每次根施量为60mL/2
株，共3次；每隔7天喷施600mg/L多菌灵，使用量为1.0L/m；50天后拆除荫棚；拆除荫棚后，采用1.5v/v％的尿素溶液每30天追肥一次，共3次。

[0106] C2：以扦插时间A2，扦插密度B2为基础，参考C1方法，相较于C1还包括：将苗床基质分层铺设并预处理，具体包括：

[0107] 1.1底土层，厚度约15cm，包括以下重量份的原料组分：酸性红壤土40份、河砂30份、草木灰15份、珍珠岩粉10份、泥炭土5份；将酸性红壤土、河砂、珍珠岩粉、泥炭土粉碎过40目筛，之后与草木灰混匀铺设后，用0.2wt％的高锰酸钾溶液浇透，薄膜覆盖闷床3天，揭膜晾干放置3天；在苗床上搭建荫蔽度在60±3％的荫棚；

[0108] 1.2芯土层，厚度为4cm，包括黄壤心土、河砂和促进剂，黄壤心土和河砂质量比1：0.7，促进剂用量为8kg/亩，在芯土层的黄壤心土和河砂粉碎过50目筛，经12kGy辐照灭菌后加入促进剂混合；

[0109] 促进剂包括以下重量份的组分：水溶性壳聚糖15份、菌类发酵液14份、糖蜜发酵液9
6份、赤霉素3份、泥炭5份、磷酸氢二钾2份，菌类发酵液中活菌数≥10个/克。

[0110] 所述菌类发酵液中，费氏中华根瘤菌发酵液、黄绿木霉发酵液、地衣芽孢杆菌发酵液以质量比为4:3:3复配混合。

[0111] 费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)CGMCC No.23670；

[0112] 黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)ACCC No.32248；

[0113] 地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)CGMCC NO.2276。常规方式活化、培养至9
菌类发酵液中活菌数≥10个/克。

[0114] 1.3表土层，厚度为6cm，包括红壤心土，粉碎过40目筛，经12kGy辐照灭菌后铺设。

[0115] C3：以C2为基础，相较于C2还包括：插穗经过多菌灵溶液浸泡后，还用促生根混合物浸泡后扦插。

[0116] 其中，促生根混合物包括以下重量份的组分：萘乙酸0.12份、吲哚丁酸0.05份、二乙氨基乙基己酸酯0.15份、苯丙氨酸0.03份、蔗糖2份、水120份。促生根混合物混合均匀后，将插穗放入浸泡45分钟。

[0117] C4：以C3为基础，相较于C3还包括：促生根混合物还包含缓释剂。其中，促生根混合物包括以下重量份的组分：萘乙酸0.12份、吲哚丁酸0.05份、二乙氨基乙基己酸酯0.15份、苯丙氨酸0.03份、蔗糖2份、环糊精25份、水120份。促生根混合物混合均匀形成糊状胶体，插穗放入浸泡45分钟，在插穗表面形成药剂层，将各促生根组份锁定在插穗表面，之后进行扦插。

[0118] 实验结果

[0119] 按照各组种植时间，于次年同一时间分别出圃，组样品随机取50株茶苗，观测其地上部形态指标(苗高、茶苗直径、着叶数)和生根数(直径≥1mm的根)，并称量茶苗全株鲜重及根干质量；与此同时于各组样品中随机选取3个点，放置1m×1m方框，计算其中的茶苗成活率、合格率、出圃率和出圃数；此外，采集各处理茶苗根系，液氮保存带回实验室，测试根系活力及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)酶活性。根系活力采用TTC法测定，SOD、POD、CAT酶活性采用南京建成试剂盒测定。试验重复3次。采用Excel 2010、SPSS26.0进行数据处理与分析。

[0120] (1)根系是茶苗的重要器官，直接影响茶苗的生长发育和苗木质量。茶苗的生根数、根干质量及根系活力是衡量茶苗质量的重要指标。各组样品的茶苗生根数、根干质量及根系活力结果见表1：

[0121] 表1不同扦插时间、不同扦插密度对茶苗根系主要指标的影响

[0122]

[0123]

[0124] 注：同列不同小写字母表示在0.05水平差异显著，下同

[0125] 从表1中可以得出，从生根数来看，扦插时间对生根数的影响较大，且扦插时间越早生根数越多；从根干质量上看，扦插密度与根干质量有较强的相关度，在中密度条件(B2)下扦插，得到的植株根干质量较其他条件扦插密度下为优选，特别是A2B2C1、A2B2C2、A2B2C3、A2B2C4的根干相对更为健壮，扦插时间在10月(A3)的植株则显著低于其余扦插时间植株的根干质量；从根系活力来看，扦插密度与根系活力有较强的相关度，在中密度条件(B2)下扦插，得到的植株根系活力较其他条件扦插密度下为优选，扦插时间在10月(A3)的植株的根系活力则显著低于其余扦插时间植株。

[0126] (2)CAT、POD、SOD构成的抗氧化体系是植物代谢自由基的重要途径，其活性高低可在一定程度上反映植物生长发育时抗逆境能力的强弱。各组样品的茶苗抗氧化酶活性结果见表2：

[0127] 表2不同扦插时间、不同扦插密度及不同预处理方式对根系酶活性的影响[0128]

[0129]

[0130] 从表2中可以得出，从CAT水平来看，扦插密度对CAT水平的影响较大，在中密度条件(B2)下扦插，得到的植株CAT水平较其他条件扦插密度下有显著提升，而扦插时间在8月(A1)的植株的CAT水平则略低于其余扦插时间植株的CAT水平；从POD水平来看，扦插时间和扦插密度对CAT水平均有较强的相关度，扦插时间在8月(A1)的植株的POD水平最优，9月(A2)次之，而10月(A3)最低，在中密度条件(B2)下扦插，得到的植株POD水平较其他条件扦插密度下有显著提升，低密度(B3)次之，高密度(B1)最低；从SOD水平来看，扦插密度对SOD水平的影响较大，扦插密度与SOD水平有较强的相关度，在中密度条件(B2)下扦插，得到的植株SOD水平较其他条件扦插密度下有显著提升，而扦插时间在10月(A3)的植株SOD水平则显著低于其余扦插时间植株的SOD水平。

[0131] 综上，由表1和表2中数据可知，在8月、9月采用中密度扦插的‘中黄1号’短穗，其生根能力强、根干质量优，根系活力高，而10月扦插的各处理苗木根系质量和根系活力均低。因此在8月份、9月份进行中密度扦插有利于茶苗生根和根系健壮。此外，在固定扦插时间和扦插密度条件下，经过改进的扦插方法(C2、C3、C4)相比于基础处理C1，能够明显提升苗木综合质量。

[0132] (3)茶苗生长势的强弱、生长量的大小是评价茶苗生长情况和苗木质量的重要指标。各组样品出圃茶苗的苗高、枝条着叶数和全株鲜重结果见表3：

[0133] 表3不同扦插时间、不同扦插密度对生长势、生长量的影响

[0134]

[0135] 由表3的茶苗生长情况和苗木质量数据可知，在8月(A1)、9月(A2)对‘中黄1号’短穗进行中密度扦插处理(B2)，其茶苗生长势旺，茶苗质量高，在10月(A3)进行扦插得到的‘中黄1号’植株的茶苗生长情况和苗木质量要显著低于其他扦插时间。并且在固定扦插时间和扦插密度条件下，经过改进的扦插方法(C2、C3、C4)相比于基础处理C1，在苗高、茶苗直径、枝条着叶数和全株鲜重方面都有显著的优势。

[0136] (4)茶苗出圃时须达到一定的验收标准，参照GB 11767～2003，常规中小叶种茶苗出圃时苗高应达20cm，主干粗度达到2mm。以此为验收标准，各组样品茶苗的合格率见表4：

[0137] 成活率＝成活苗数/取苗数×100％；

[0138] 合格率＝合格苗数/取苗数×100％；

[0139] 出圃数＝扦插总数×成活率×合格率；

[0140] 出圃率＝成活率×合格率×100％。

[0141] 表4不同扦插时间、不同扦插密度对出圃质量的影响

[0142]

[0143]

[0144] 由表4的茶苗出圃质量数据可知，从成活率、合格率、出圃率和出圃数综合来看，扦插时间在9月(A2)的茶苗综合出圃质量最优、8月(A1)次之、10月(A3)最低，扦插密度则以中密度扦插(B2)明显优于低密度(B3)和高密度(B2)扦插。

[0145] 结合表3和表4中茶苗生长情况、苗木质量和出圃茶苗质量的数据可知，在8月、9月(A1、A2)对‘中黄1号’短穗进行中密度扦插处理(B2)，其茶苗生长势旺，茶苗质量高，且茶苗成活率、合格率、出圃率和出圃总数均较高，而高密度扦插处理(B1)茶苗直径低于其它处理，从而影响其茶苗合格率和出圃率；低密度扦插(B3)处理其苗木质量、成活率、合格率和出圃率虽均较高，但茶苗出圃数最低，导致苗圃经济效益不高。在固定扦插时间和扦插密度条件下，经过改进的扦插方法(C2、C3、C4)，例如对苗床基质进行基质分层、预处理，插穗进行预处理及插后处理等均对插穗生长和出圃有一定正向提升，可综合考虑实际生产需要和成本对扦插工艺进行改善以进一步提升茶苗繁育质量和数量。

[0146] 综合考虑茶苗质量、土地利用率、劳动强度等因素，在8月(A1)或9月(A2)进行中密度扦插(B2)，采用改进的扦插方法(C2、C3、C4)，可以提高‘中黄1号’扦插苗根系质量、抗氧化酶活性，从而进一步促进茶苗的生长发育，使其在苗高、直径、着叶数及全株鲜重上较其他处理表现更优，苗木更为健壮，并且在出圃时成活率、合格率及出圃率都更具优势，且茶苗出圃数量＞26万株/亩，优选＞28万株/亩，更优选＞30万株/亩。

[0147] 尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，本发明意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。