[0001] 本发明属于野生药材资源收集技术领域，特别涉及一种道地中药材种质资源收集驯化方法。

[0002] 道地药材，又称为地道药材，是优质中药材的代名词，是指药材质优效佳，这一概念源于生产和中医临床实践，数千年来被无数的中医临床实践所证实，是源于古代的一项辨别优质中药材质量的独具特色的综合标准，中药材的道地性是指经过中医临床长期应用优选出来的，产在特定地域，与其他地区所产同种中药材相比，品质和疗效更好且质量稳定，具有较高知名度的中药材。仅以遵义市为例，所包含的道地药材就有绥阳山银花（金银花），赤水金钗石斛，正安白芨，道真洛党参，道真玄参，播州杜仲等。

[0003] 种质资源是在长期自然选择和人工选择过程中形成的，它们携带着各种各样的基因，是育种不可缺少的基本材料来源。随着人类对道地药材的需求量不断增加，仅靠野生道地中药材难以满足人类需求，故使得道地药材的人工栽培数量不断递增，栽培数量的递增带来了新的问题，由于栽植代数的增加，加之育种单位和育种家在进行道地药材育种中选用遗传基础相同的一些基因资源，从而导致栽培品种的遗传基础同一化，造成目前人工栽培的道地药材抗逆性脆弱，有利基因重组机会减少，育种工作停滞不前。因此，需要不断的加强对野外道地药材种质资源的收集，为道地药材人工栽培提供优质的种质资源。

[0004] 对于收集的野外道地药材种质资源，因后续的栽植地与野外道地药材原生地在自然条件下存在差异，故需要对其进行驯化，以提高其人工栽培的存活率，目前常规的驯化方式是，利用收集的野外道地药材种子为基础进行驯化，通过多代选择,逐渐筛选出适应人类需要的栽培植株，该种驯化方式，种子萌发率以及植株存活率低下，造成野外道地药材种质资源的浪费。

[0018] 下面由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例1

[0019] 如图1所示本实施例提供一种道地中药材种质资源收集驯化方法,包括以下步骤：S1.采集野生道地中药材的种子在人工栽培地进行育苗，之后在存活的幼苗中选取壮苗移栽到人工栽培地培育2‑5个月后，选取其中的长势好且枝干粗壮的植株继续培育得到植株A。

[0020] S2.采集野生道地中药材的枝条作为接穗（剪下接穗的到在每次剪切枝条前都需消毒），以植株A作为砧木(砧木四周保留侧枝全部去除，同样去除侧枝的刀在剪切侧枝前需要消毒处理），将接穗嫁接在砧木上得到嫁接株，嫁接时候砧木长度在30cm以上，直径在2cm以上，然后分别在距离地表5cm、10cm、15cm、20cm以及25cm位置切出嫁接口，相邻嫁接口位置错开，之后在嫁接口插入接穗进行嫁接，完成嫁接后，继续培育嫁接株，去除病株死株后得到植株B。所述嫁接株上的插穗至少为一个且都来源于同一植株。用于提供种子培育植株A的野生道地中药材与用于提供接穗的野生道地中药材为同一株健壮野生道地中药材植株。通过该步骤使野生道地中药材资源初步适应人工栽培地的气候环境，初步驯化出能在人工栽培地存活的野生道地中药材资源。

[0021] S3.在花期，采集野生道地中药材雄蕊上的花粉对植株B接穗上的雌蕊进行人工授粉（在人工授粉前，去除植株B接穗上的雄蕊）。用于提供接穗的野生道地中药材与用于提供雄蕊花粉的野生道地中药材为同种但不同株的健壮野生道地中药材植株。通过该步骤强化在人工栽培地存活的野生道地中药材的道地性。

[0022] S4.利用植株B接穗上所收集的种子在人工栽培地进行育苗，之后在存活的幼苗中选取壮苗移栽到人工栽培地培育，去除病株死株后得到植株C。通过该步骤筛驯化能完全适应人工栽培地土壤与气候环境，并能在人工栽培地有效存活的野生道地中药材资源。

[0023] S5.采集的植株C的枝条在人工栽培地进行扦插育苗，培育1年以上去除病株死株后得到植株D，让植株D在人工栽培地自然生长，待植株D上的种子成熟后，收集种子进行保存，完成道地药材种质资源收集驯化。通过该步骤获取大量的野生道地药材种质资源。实施例2

[0024] 为了提升与强化培育的道地中药材种质资源道地性，在嫁接株成活后(获得植株B后），在砧木上打上3个倾斜向下的进药孔（进药孔分别距离地面4cm、9cm以及14cm），在每个孔中插入一根输液用针头并用塑料薄膜缠紧进药孔与针头，针头另一端接一个直径在0.5cm左右，长度大于50cm的导管，导管盘旋环绕在砧木外并位于针头上方，导管另一端通过塞子封堵，导管内装有药液，该药液制备步骤为：取与接穗同种但不同株的野生道地中药材植株的新鲜叶子打碎，经过离心、过滤，取过滤得到的滤液与水按1:5的比例混合而得，通过导管稳定且持续的向砧木中补充药液，以野外生长的野生道地中药材药液同化砧木，并利用砧木输送给插穗，强化插穗的道地性；同时，利用砧木适应于人工栽培地环境的能力，来培育野生道地中药材种质资源。
实施例3

[0025] 本实施例与实施例1或2的区别在于：在对植株B接穗上的雌蕊进行人工授粉前，还要对植株B进行抗逆性培育，所述抗逆性培育的包括抗旱性培育、抗涝性培育、抗寒性培育以及抗病性培育。

[0026] 所述抗旱性培育是指将植株B在大棚内培育，使大棚内土壤湿度控制在10％以下并维持7‑15天，取其存活株继续正常培育。

[0027] 所述抗涝性培育是指将植株B在大棚内培育，使大棚内土壤湿度控制在90％以上并维持0.5‑1.5天后，恢复湿度到80以下，再将大棚内土壤湿度控制在90％以上并维持1‑3天后，取其存活株继续正常培育。

[0028] 所述抗寒性培育是指将植株B在大棚内培育，使大棚内温度控制在0℃以下并维持7‑15天后，取其存活株继续正常培育。

[0029] 所述抗病性培育是指将植株B在大棚内培育，利用常见植物病菌对嫁接株侵染7‑15天后，再用中药药剂喷淋灭菌，去除并焚毁病死株，取其存活株继续正常培育。

[0030] 本发明其它未详尽之处均为本领域技术人员所公知的常规技术。

[0031] 需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包含一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

[0032] 本发明的保护范围不限于具体实施方式所公开的技术方案，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何修改、等同替换、改进等，均落入本发明的保护范围。