[0001] 本发明涉及植物栽培与育种技术领域，具体为一种茄子砧木耐寒性评价方法。

[0002] 茄子是喜温作物，低温是影响植株生长、物候期和产量的主要限制因子。生产中，嫁接是茄子栽培的主要方式。利用砧木的抗病抗逆特性，可以有效提升茄子抗病、抗逆性能，保障茄子可持续安全生产。

[0003] 现有作物耐寒性鉴定方法有两类：直接鉴定法主要通过调查种子低温萌发能力、幼苗生长速率和叶片形态等进行评价；间接鉴定法主要通过检测光合作用参数、抗氧化系统、同工酶谱、渗透调节物质、根系活力等指标进行评价。其中，直接鉴定法需要对多个形态指标进行调查，工作量大，且寒害对各形态指标的影响不一致，人为判定误差较大，不能做到精准、高效；间接鉴定法需要专业设施设备，投资大、技术要求高，且检测结果易受取样时间、取样部位的影响，具有门槛高、重复性差的缺点。而且，现有耐寒性鉴定方法没有专门针对茄果类蔬菜砧木，没有对砧木根系寒害再生能力进行鉴定，因此，生产中没有强耐寒的砧木品种应用。

[0031] 下面通过具体实施方式进一步详细说明：

[0032] 实施例一

[0033] 一种茄子砧木耐寒性评价方法，包括如下步骤：

[0034] 1)播种育苗：选择籽粒饱满的茄子种子进行育苗，将幼苗培育至4‑5叶期。将幼苗主茎从子叶上方剪断，去掉根部；去除主茎下部2‑3片真叶，保留主茎及顶部2叶1心，将主茎扦插入填充有蔬菜育苗基质的穴盘中，浇灌至少一次水溶肥，盖膜，保持空气相对湿度100％，培育5‑7天；去除盖膜，将幼苗置于自然环境中(即不使用专业设备控制温度、湿度等)培育7‑10天，期间进行正常生长管理，如及时补充水分等。

[0035] 通常选择在秋季进行育苗，西南地区秋季(即9月下旬‑10月上中旬)平均气温在15℃‑25℃之间，平均湿度在70％以上。蔬菜育苗基质采用益臻育苗基质(总有机质+总腐植酸≥55％)，水溶肥采用光绿达含腐植酸水溶肥料(腐植酸≥40g/L，N+P2O5+K2O≥200g/L)。盖膜采用透明塑料薄膜拱棚形式覆盖幼苗及穴盘，透明塑料薄膜的厚度为0.8丝，使盖膜内的幼苗处于自然光照，但避免阳光直射，减少幼苗蒸腾作用，保证幼苗正常生长；并通过盖膜保持幼苗周围的温度相对稳定，防止温度波动过大对幼苗的影响，进而保证幼苗正常生长。

[0036] 2)筛选幼苗：将幼苗置于自然环境中培育时，对幼苗进行筛选，筛选去掉枯死、叶片脱落、叶片黄化萎蔫等表征的幼苗，保留正常健康、生长状态一致的幼苗。保证进行耐寒性评价的幼苗的生长健康状态基本一致，保证耐寒性评价的准确性。

[0037] 3)低温培育：将筛选出的幼苗，置于自然低温条件培育45‑60天。自然低温条件的温度为5℃‑12℃。

[0038] 通常西南地区冬季(即12月中下旬‑次年2月上中旬)平均气温在5℃‑12℃之间，平均湿度在70％以上，达到自然低温环境条件。

[0039] 4)耐寒性评价：将扦插的幼苗茎段拔出，测定幼苗的生根情况，根据新生根系数量进行寒害分级：

[0040] 0级：新生根系数量为10条及以上；

[0041] 1级：新生根系数量为6‑9条；

[0042] 2级：新生根系数量为3‑5条；

[0043] 3级：新生根系数量为1‑2条；

[0044] 4级：无新生根系。

[0045] 根据寒害分级的级别计算寒害指数：寒害指数CI＝∑(各级寒害株数×寒害级数)/调查总株数。

[0046] 根据寒害指数评价茄子耐寒性：强：CI≤1.0；中：1.0﹤CI≤3.0；弱：CI﹥3.0。

[0047] 例如，调查总株数为10株，其中1株的新生根系数量为1条，寒害等级为3级；其余9株均无新生根系，寒害等级均为4级。寒害指数CI＝[(1×3)+(9×4)]/10＝3.9。耐寒性评价为“弱”。

[0048] 实验例一

[0049] 按照实施例一，在重庆地区，对20份茄子砧木种质进行耐寒性评价。具体地，在冷棚对20份茄子砧木种质进行播种育苗，在10月10日播种，11月29日扦插，11月29日至12月5日盖膜保湿处理，12月6日至12月14日揭膜后在自然环境中进行培育、筛选，期间进行正常生长管理，将筛选出的幼苗，在12月15日至次年2月5日置于自然低温(5‑12℃)条件培育，2月5日拔出幼苗调查生根情况，记录寒害等级，计算寒害指数，结果如下表1。

[0050] 表1

[0051]

[0052]

[0053] 如图1所示，根据寒害指数评价种质耐寒性结果，与聚类分析结果一致(聚类分析在欧式距离2.0处将参试种质分为3类：Ⅰ类为耐寒性强；Ⅱ类为耐寒性中；Ⅲ类为耐寒性弱)。

[0054] 实验例二

[0055] 以不同耐寒性的12份茄子砧木种质资源作为砧木，以“渝茄五号”为接穗，进行嫁接育苗，培育健壮嫁接茄子幼苗。以未嫁接的“渝茄五号”为对照，利用冬季自然低温开展嫁接苗耐寒试验。同时，筛选健壮的嫁接苗于次年2月26日露地定植，4月20日田间调查株高和嫁接苗开花情况。不同砧木嫁接苗冷害死亡率、露地早期生长情况见表2。

[0056] 表2

[0057]

[0058] 由表2可知，耐寒性评价为“强”的茄子砧木种质“蒜芥茄”嫁接后冷害死亡率最低，达到4.08％；早春低温植株同期株高最高，达到78.25cm；同期开花率最高，达到94.74％。耐寒性评价为“中”的茄子砧木种质“水茄”、“Ng1‑006”、“Ng1‑012”嫁接后冷害死亡率较低(7.32％‑11.36％)，早春低温植株同期株高较高(69.38‑73.68cm)、同期开花率较高(55％‑80％)。相比于耐寒性评价为“弱”的茄子砧木，耐寒性评价为“中”的茄子砧木嫁接苗在低温下生长更有利，耐寒性评价为“强”的茄子砧木嫁接苗在低温下生长最好。由此可知，通过本技术方案对茄子砧木进行的耐寒性评价与茄子砧木实际的耐寒性相符，本技术方案能够对茄子砧木的耐寒性进行准确评价。

[0059] 实验例三

[0060] 采用人工模拟气候鉴定法(参考李锡香等《茄子种质资源描述规范和数据标准》)对20份不同茄子砧木种质(与实施例一的20份茄子砧木种质相同)进行耐寒性鉴定。将4‑5叶期不同砧木种质植株置于1℃黑暗条件处理24h后，观察植株的寒害症状，结果发现植株均生长正常，无寒害症状，均被评价为具有强耐寒性。由此可见，用现有技术方案不能区分茄子砧木种质的耐寒性、不能对茄子砧木种质进行耐寒性评价。

[0061] 经过试验摸索，对人工模拟气候鉴定法进行改进。如图2，将苗龄20天的5份不同砧木种质植株(约2‑3叶期)置于1℃、植物生长灯(100w、安装高度1.5m、波长450‑660nm)照明条件处理，通过改变处理时间，鉴定种质的耐寒性。将不同砧木种质植株置于1℃、植物生长灯照明条件处理5天后恢复正常生长管理5天，所有种质均正常生长，耐寒性鉴定无效(如图3)。将不同砧木种质植株置于1℃、植物生长灯照明条件处理10天后恢复正常生长管理2天，耐寒性中的种质部分恢复生长，耐寒性弱的种质全部枯死(如图4)。将不同砧木种质植株置于1℃、植物生长灯照明条件处理15天后恢复正常生长管理1天，仅耐寒性强的“蒜芥茄”正常生长，其余种质严重枯死(如图5)，具体结果如下表3。

[0062] 表3

[0063]

[0064] 由表3可知，通过控温设备实现低温条件下的耐寒性鉴定结果与采用本技术方案评价耐寒性的结果相符，进一步证实了本技术方案对茄子砧木种质耐寒性评价的准确性。但是人工模拟气候鉴定法需要使用控温设备等专业性设备，成本高，而且不同砧木种质处理时期和低温持续时间需要试验摸索，重复性差。

[0065] 以上的仅是本发明的实施例，该发明不限于此实施案例涉及的领域，方案中公知的具体结构及特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。