技术领域
[0001] 本申请涉及生物标本展示技术领域，例如涉及一种标本展示方法。
相关背景技术
[0002] 小型动物透明标本是一种对动物体进行处理、并采用化学试剂使小动物肌肉变得透明，从而显现出被染色的动物骨骼的标本。透明标本可直接展示动物体的骨骼形状和位置，具有较高的科研和教学价值。同时，透明标本十分美观，具有一定的市场价值。
[0003] 目前多采用将标本固封于环氧树脂内的方法对标本进行展示。
[0004] 在实现本公开实施例的过程中，发现相关技术中至少存在如下问题：将标本固封于环氧树脂中，影响了标本的透明度。
具体实施方式
[0011] 为了能够更加详尽地了解本公开实施例的特点与技术内容，下面对本公开实施例的实现进行详细阐述。在以下的技术描述中，为方便解释起见，通过多个细节以提供对所披露实施例的充分理解。然而，在没有这些细节的情况下，一个或多个实施例仍然可以实施。
[0012] 在一些可选实施例中，透明标本的制备方法包括依次将待处理样本进行以下处理：将待处理样本置于第一梯度酒精溶液中，进行脱水处理；将经过脱水处理的样本置于第一染色剂中，进行第一次染色处理；将经过第一次染色处理的样本置于第二梯度酒精溶液中，进行复水处理；将经过复水处理的样本置于胰蛋白酶溶液中，其中，胰蛋白酶溶液中的溶质包括胰蛋白酶和硼酸钠。
[0013] 将样本置于胰蛋白酶溶液中，提高了透明标本制作的成功率。例如，当待处理样本的长度大于7cm，将样本置于胰蛋白酶溶液中，可防止样本的肌肉膨胀进而带来的骨骼脱落的问题，提高了透明标本制备的成功率；同时，将样本置于胰蛋白酶溶液中，可解决样本肌肉发黄的问题，提高了透明标本的美观性。可以理解的是，本公开实施例提供的透明标本的制备方法也可以适用于长度小于或等于7cm的待处理样本。可以理解的是，待处理样本的长度可以为待处理样本的体长，类似于人们的身高。
[0014] 可以理解的是，“待处理样本”可以是未经过本公开实施例提供的制备方法处理的样品，“样本”可以是经过本公开实施例提供的制备方法中的部分步骤处理后的、需要进行下一步处理的中间样品。可选地，采用本公开实施例提供的方法进行透明标本的制作，无需对待处理样本进行解剖处理，可直接对新鲜样本进行处理。此处的“新鲜”可以是，死亡的、未经过解剖处理的样本。
[0015] 步骤一、将待处理样本置于第一梯度酒精溶液中，进行脱水处理；
[0016] 本步骤中，将待处理样本置于第一梯度酒精溶液中，可以使待处理样本脱水，并使待处理样本的蛋白质变性。
[0017] 步骤二、将经过脱水处理的样本置于第一染色剂中，进行第一次染色处理；
[0018] 步骤三、将经过第一次染色处理的样本置于第二梯度酒精溶液中，进行复水处理，其中，“复水处理”可以理解为使前述经脱水处理后的水含量较低的样本再次吸收水分；
[0019] 本步骤中，将经过第一次染色处理的样本置于第二梯度酒精溶液中，可以调节样本的渗透压，使样本复水，有利于后续步骤的进行。
[0020] 步骤四、将经过复水处理的样本置于胰蛋白酶溶液中，其中，胰蛋白酶溶液中的溶质包括胰蛋白酶和硼酸钠。
[0021] 本步骤中，将经过复水处理的样本置于胰蛋白酶溶液中，可防止由于样本肌肉膨胀而造成的样本骨骼脱落的问题，提高了制作过程中样本骨骼的完整性，进而提高了透明标本制备的成功率；同时，防止了待处理样本的肌肉组织发黄的问题，提高了制备得到的透明标本的美观性。
[0022] 可选地，以质量份数计，胰蛋白酶溶液中各组分的比例为：胰蛋白酶:硼酸钠:水＝1-3:1.5-3:80-120。
[0023] 硼酸钠还可称为硼砂，分子式为Na2B4O7·10H2O。胰蛋白酶溶液中，胰蛋白酶:硼酸钠:水的质量比可以为1:1.5:80，还可以为1:1:40，还可以为1:2.4:100，降低了处理过程中样本肌肉组织的膨胀，防止了样本骨骼的脱落，提高了制备过程中样本骨骼的完整性，提高了透明标本的成功率。
[0024] 可选地，样本置于胰蛋白酶溶液中的时间为大于或等于8h。
[0025] 样本置于胰蛋白酶溶液中的时间可以为8h、10h、12h、15h、20h、24h、26h、30h、32h、37h、40h、42h、46h、48h、50h中的任何一个数值，以及这些数值中任意两数值组成的范围值中的数值。通过调节样本置于胰蛋白酶溶液中的时间，可以防止样本肌肉组织膨胀，提高透明标本制备的成功率，样本置于胰蛋白酶溶液中的时间不宜过长，否则会使样本的肌肉组织散落，导致透明标本的制备失败。
[0026] 可选地，当待处理样本的长度小于10cm时，置于胰蛋白酶溶液中的时间小于或等于10h；当待处理样本的长度为大于或等于10cm且小于或等于20cm时，置于胰蛋白酶溶液中的时间为24-48h；当待处理样本的长度大于20cm时，置于胰蛋白酶溶液中的时间大于48h。
[0027] 可根据待处理样本的长度确定样本置于胰蛋白酶溶液中的时间。例如，当待处理样本的长度为7cm时，其置于胰蛋白酶溶液中的时间为7h，当待处理样本的长度为8cm时，其置于胰蛋白酶溶液中的时间为8h，当待处理样本的长度为9cm时，其置于胰蛋白酶溶液中的时间为9h；当待处理样本的长度为10-20cm时，置于胰蛋白酶溶液中的时间为24-48h，例如，当待处理样本的长度为10cm时，其置于胰蛋白酶溶液中的时间为24h，当待处理样本的长度为15cm时，其置于胰蛋白酶溶液中的时间为40h，当待处理样本的长度为20cm时，其置于胰蛋白酶溶液中的时间为48h；当待处理样本的长度大于20cm时，置于胰蛋白酶溶液中的时间大于48h。既可以防止样本的肌肉组织膨胀导致的骨骼脱落问题，又不至于使肌肉组织散落，提高了透明标本制备的成功率。
[0028] 可选地，以质量浓度计，第一梯度酒精溶液依次包括：70-80％酒精溶液、90-98％酒精溶液；或者，第二梯度酒精溶液依次包括：90-98％酒精溶液、45-55％酒精溶液。
[0029] 第一梯度酒精溶液中70-80％酒精溶液的质量浓度可以为70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％中的任一数值，以及任意两数值组成的范围值，第一梯度酒精溶液中90-98％酒精溶液的质量浓度可以为90％、91％、92％、93％、94％、95％、
96％、97％、98％中的任一数值，以及任意两数值组成的范围值；第二梯度酒精溶液中90-
98％酒精溶液的质量浓度可以为90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％中的任一数值，以及任意两数值组成的范围值，第二梯度酒精溶液中45-55％酒精溶液的质量浓度可以为45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％中的任一数值，以及任意两数值组成的范围值。
[0030] 可选地，采用第一梯度酒精溶液对待处理样本进行脱水处理的方法可以为：将待处理样本置于依次置于70-80％酒精溶液和90-98％酒精溶液中，可减小脱水处理的时间。目前，采用将待处理样本置于95％酒精溶液中进行脱水处理，此种脱水处理的时间较长，约需要168h，本公开实施例提供的脱水处理方法，脱水处理的时间可以为70-74h，当脱水处理过程中酒精溶液的温度为35℃时，脱水处理的时间可以为50h。例如，脱水处理可以为：依次将待处理样本置于75％酒精溶液24h、95％酒精溶液24h、更换新的95％酒精溶液且样本置于新的酒精溶液中24h。
[0031] 可选地，采用第二梯度酒精溶液对样本进行复水处理的方法可以为：将样本依次置于90-98％酒精溶液、45-55％酒精溶液和水中，调节样本的渗透压，使样本复水，更利于后续步骤的进行。例如，复水处理可以为：依次将样本置于95％酒精溶液2h、50％酒精溶液2h和水2h。可选地，复水处理可在持续震荡、温度为35℃的条件下进行，以减少复水处理的时间。
[0032] 可选地，第一染色剂为阿利新蓝。
[0033] 采用阿利新蓝对样本进行第一次染色处理。可选地，第一染色剂可以包括阿利新蓝1mg：乙酸50ml：水450g，即，第一染色剂由阿利新蓝1mg：乙酸50ml：水450g配置而成，采用此比例的第一染色剂，降低了第一染色剂中乙酸的浓度，防止样本在染色过程中肌肉组织脱落，提高了透明标本制备的成功率，同时，不至于使样本的肌肉组织落入第一染色剂中，对第一染色剂造成污染，提高了第一染色剂的使用次数。
[0034] 可选地，在脱水处理与第一次染色处理之间，还包括：将经过脱水处理的样本置于乙酸溶液中，进行脱皮处理。
[0035] 采用乙酸溶液对脱水处理后的样本进行处理，可对样本的表皮进行腐蚀，可使样本的表皮在较短的时间内脱落，代替了对样本人工剥皮的步骤，相对于人工剥皮步骤，本公开实施例提供的脱皮处理，时间短，且，不易对样本的肌肉等组织造成伤害，提高了透明标本制备的成功率。
[0036] 可选地，在脱水处理与脱皮处理之间，还包括：将经过脱水处理的样本置于烯醇溶液中，进行脱脂处理。其中，烯醇溶液还可用汽油、二甲苯、丙酮、醋酸异戊酯等代替。
[0037] 当待处理样本的脂肪含量较高，需要进行脱脂处理时，可在脱水处理与脱皮处理之间加入脱脂处理，此处的“脱脂处理”可以理解为去除样本的脂肪的处理。可选地，当烯醇溶液的温度为30-35℃时，样本置于烯醇溶液中的时间可以为24h。
[0038] 可选地，还包括脱烯醇处理。将经过脱脂处理的样本置于酒精溶液中，进行脱烯醇处理，去除样本的烯醇。可选地，酒精溶液的温度为30-35℃时，脱烯醇处理的时间可以为30min。
[0039] 可选地，将样本置于胰蛋白酶溶液处理后，还包括：
[0040] 将经过胰蛋白酶溶液处理后的样本置于质量浓度为2％的KOH溶液中，进行样本的肌肉组织的透明处理，时间可以为4h；
[0041] 将经过透明处理的样本置于第二染色剂中，对样本的骨骼进行染色，可选地，第二染色剂可以包括0.5％KOH和饱和茜素红酒精溶液，可选地，当第二染色剂的温度为25℃时，染色时间可以为48h；
[0042] 将经过第二次染色处理的样本置于双氧水溶液中，进行脱色处理，经第二次染色处理后的样本，颜色较深，为深黑紫色，可采用双氧水溶液进行脱色处理，可选的，双氧水溶液的质量浓度可以为1％，可选地，若脱色处理时间较长，可以得到粉红色的骨骼标本，若脱色处理的时间较短，可以得到深紫色的骨骼标本；
[0043] 将经过脱色处理的样本置于梯度甘油溶液中，记得到透明标本，可选地，梯度甘油溶液包括质量浓度为20％、50％、100％的甘油溶液，将脱色后的样本依次置于20％甘油溶液、50％甘油溶液、100％甘油溶液中，得到透明样本。
[0044] 本公开实施例提供的透明标本的制备方法，提高了透明标本制备的成功率，且，制备得到的透明标本的肌肉组织不会产生发黄的现象，提高了透明标本的美观性。同时，本公开实施例提供的透明标本不易变形，提高了透明标本的保存时间。
[0045] 可选地，待处理样本包括：硬骨鱼类、贝类、虾、螃蟹或昆虫。例如，待处理样本可以为鲨鱼等软骨鱼类，鲟鱼等硬鳞软骨鱼类，银鱼，龙鱼等硬骨鱼类，贝类可以为乌贼等头足类的软体动物、菲律宾蛤蜊等双壳类贝类，昆虫可以为蜻蜓幼虫等。虾可以为糠虾，鼓虾，对虾，米虾等。蟹可以为绒螯近方蟹，平背蜞等。此外，本公开实施例提供的透明标本的制备方法还可运用于哺乳类动物和爬行类动物，其中，哺乳可以为美洲水貂，小鼠，大鼠，仓鼠等，爬行类可以为龟，蜥蜴，蛇等。
[0046] 本公开同时提供了一种透明标本。
[0047] 在一些可选实施例中，透明标本由前述的制备方法得到。
[0048] 本公开实施例提供的透明标本十分美观，可用于解刨教学、科学普及等。
[0049] 本公开实施例同时提供了一种标本展示方法，包括：
[0050] S101：将待展示的标本进行脱甘油处理；
[0051] 制备完成且未进行展示的标本，多置于甘油中进行保存。因此，在将标本进行展示之前，需进行脱甘油处理。可选地，可将保存于甘油中的标本依次置于质量浓度为50％甘油2h、20％甘油2h，再将标本置于水中2h，得到脱甘油处理后的标本。
[0052] S102：将经过脱甘油处理后的标本置于丙酮溶液中，或者，将经过脱甘油处理后的标本置于无水乙醇中，进行预处理；
[0053] 将经过脱甘油处理后的标本置于丙酮溶液或无水乙醇溶液中，进行预处理。可选地，预处理包括快速化预处理，快速化预处理可以为：仅将标本置于质量浓度大于或等于99％的丙酮溶液中24h，或者，仅将标本置于无水乙醇中12-20h。
[0054] S103：将经过预处理后的标本置于固化剂中，进行固封。
[0055] 经固封后的标本即为可用于展示的展示标本。
[0056] 目前，多采用将标本直接固封于环氧树脂内的方法对标本进行展示，该方法影响了标本的透明度，且，环氧树脂易出现“雾化”的现象。本公开实施例提供的标本展示方法，在将标本置于环氧树脂内固封之前，将经过脱甘油处理后的标本置于丙酮或无水乙醇中进行预处理，再将经过预处理后的标本置于固化剂中进行固封，固封得到的展示标本透明度高，利于对标本的展示。且，当固化剂为环氧树脂时，避免了环氧树脂出现雾化的问题。
[0057] 可选地，本公开实施例提供的标本展示方法适用于前述的透明标本。前述制备得到的透明标本的骨骼清晰度高，采用本公开实施例提供的标本展示方法对前述的透明标本进行展示，提高了对透明标本展示的透明度。
[0058] 可选地，S102中，将经过脱甘油处理后的标本置于丙酮溶液中，包括：将经过脱甘油处理后的标本依次置于质量浓度从低到高的梯度丙酮溶液中，进行预处理。
[0059] 与前述的快速化预处理不同，丙酮溶液还可以为质量浓度从低到高的梯度丙酮溶液，提高了后续固封后得到的展示标本的透明度。
[0060] 可选地，梯度丙酮溶液包括：15％-25％丙酮溶液、45％-55％丙酮溶液、65％-75％丙酮溶液、和大于或等于99％丙酮溶液。
[0061] 15％-25％丙酮溶液可以为质量浓度为15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％的丙酮溶液；45％-55％丙酮溶液可以为质量浓度为45％、46％、
47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％的丙酮溶液；65％-75％丙酮溶液可以为质量浓度为65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％的丙酮溶液；
大于或等于99％丙酮溶液可以为分析纯丙酮。
[0062] 可选地，标本置于梯度丙酮溶液的每个丙酮溶液中的时间为1-24h。
[0063] 例如，标本置于15％-25％丙酮溶液中的时间为1-10h，标本置于45％-55％丙酮溶液中的时间为2-15h，标本置于65％-75％丙酮溶液中的时间为5-20h，标本置于大于或等于99％丙酮溶液中的时间为20-24h，提高了后续固封后得到的展示标本的透明度。
[0064] 可选地，S102中，将经过脱甘油处理后的标本置于无水乙醇中，包括：将经过脱甘油处理后的标本置于酒精溶液中；将经过酒精溶液处理后的标本置于无水乙醇中。
[0065] 与前述的快速化预处理不同，可以先将脱甘油处理后的标本置于酒精溶液中，再将经酒精溶液处理后的标本置于无水乙醇中，提高了后续固封后得到的展示标本的透明度。
[0066] 可选地，酒精溶液的质量浓度为90-98％。
[0067] 90-98％的酒精溶液可以为质量浓度为90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％的酒精溶液。
[0068] 可选地，标本置于酒精溶液中的时间为18-24h。
[0069] 酒精溶液的质量浓度越高，标本置于酒精溶液中的时间越短。例如，当酒精溶液的质量浓度为90％时，标本置于90％酒精溶液中的时间为22-24h，当酒精溶液的质量浓度为95％时，标本置于95％酒精溶液中的时间为18-22h。
[0070] 可选地，标本置于无水乙醇溶液中的时间为10-13h。
[0071] 标本置于无水乙醇溶液中的时间为10h、12h、13h。
[0072] 可选地，固化剂包括：环氧树脂或紫外光固化胶。
[0073] 将经过前述的预处理后的标本置于固化剂中进行固化处理，固化后，得到固封的、可进行展示的展示标本。可选地，若采用前述的丙酮溶液进行预处理，固化剂可以为紫外光固化胶；若采用前述的无水乙醇溶液进行预处理，固化剂可以为环氧树脂。
[0074] 本申请中记载的各组分的质量份数范围，不仅包括各个范围的两个端点值，还包括两个端点值之间的所有数值，以及两端点值之间的任意两数值组成的范围值。例如，15％-25％丙酮溶液，此处的15％-25％不仅包括两个端点值15％、25％，还包括15％-25％之间的所有数值，以及15％-25％之间的任何两数值(如18％、22％)组成的范围值(如18％-
22％)。
