[0001] 本发明涉及生物医药领域，特别是一种调节代谢、减肥减脂的胶原蛋白肽组合物及其应用。

[0002] 由于生活质量的提高，高血糖、高血脂、肥胖等逐渐威胁人类健康，并呈现年轻化的趋势，已经严重影响了人们的生活质量。目前对肥胖、高血糖和高血脂的治疗主要以西药为主，不仅疗效有限，且长期服用，副作用比较明显，鉴于这种情况开发安全有效的降脂降糖减肥药物已成为当前医学研究的重点。

[0003] 相对于西药来说，中药具有安全、副作用少、对胃肠道无损伤、对肝肾刺激小的优点，受到人们的关注，但是，中药存在起效慢、用药不方便的问题，本发明以胶原蛋白肽和中药为基础，辅以生物发酵技术，开发出一种胶原蛋白肽组合物，在减肥减脂、降血糖、调节脂质代谢具有显著的作用。

[0031] 以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。需说明的是，在不冲突的情况下，以下实施例及实施例中的特征可以相互组合。

[0032] 实施例1

[0033] 本实施例提供了一种调节代谢、减肥减脂的胶原蛋白肽组合物，包含胶原蛋白肽发酵液和植物酵素，所述胶原蛋白肽发酵液和植物酵素的体积比为10：5；所述胶原蛋白肽发酵液为胶原蛋白肽经鼠李糖乳杆菌发酵而得；所述植物酵素是中药组合物经干酪乳杆菌发酵而得。所述中药组合物按重量份数计包含灵芝3份、泽泻2份和神曲2份。其中，胶原蛋白肽采用鱼胶原蛋白肽。鱼胶原蛋白肽，分子量2000Da，购于河北赛亿生物科技有限公司。

[0034] 本实施例中，所述胶原蛋白肽发酵液的具体发酵方法为：在水中加入胶原蛋白肽5％

[0035] (w/v)，并接种鼠李糖乳杆菌，于30℃发酵24h，即得胶原蛋白肽发酵液。所述鼠李糖乳杆菌为鼠李糖乳杆菌NCU2217，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中6
心，保藏编号为CGMCC NO15573；所述鼠李糖乳杆菌的接种量为1×10cfu/mL。

[0036] 本实施例中，所述植物酵素的具体制备方法为：

[0037] (a)将中药组合物的各中药材按比例混合后加入到10倍量的蒸馏水进行提取，3次提取后将滤液合并，将所得到的提取液进行浓缩至生药浓度1.0g/ml，得到中药浓缩液；

[0038] (b)向中药浓缩液中直接加入干酪乳杆菌进行接种发酵，于37℃发酵4h，得到植物酵素。所述干酪乳杆菌为干酪乳杆菌ATCC 393，货号0176P，购于深圳子科生物科技有限公6
司；所述干酪乳杆菌的接种量为2×10cfu/mL。

[0039] 实施例2

[0040] 本实施例提供了一种调节代谢、减肥减脂的胶原蛋白肽组合物，包含胶原蛋白肽发酵液和植物酵素，所述胶原蛋白肽发酵液和植物酵素的体积比为12：3；所述胶原蛋白肽发酵液为胶原蛋白肽经鼠李糖乳杆菌NCU2217发酵而得；所述植物酵素是多种中药组合物经干酪乳杆菌发酵而得。所述中药组合物按重量份数计包含灵芝3份、泽泻2份和神曲2份。其中，胶原蛋白肽采用鱼胶原蛋白肽。鱼胶原蛋白肽，分子量2000Da，购于河北赛亿生物科技有限公司。

[0041] 本实施例中，所述胶原蛋白肽发酵液的具体发酵方法为：在水中加入胶原蛋白肽4％

[0042] (w/v)，并接种鼠李糖乳杆菌，于37℃发酵20h，即得胶原蛋白肽发酵液。所述鼠李糖乳杆菌为鼠李糖乳杆菌NCU2217，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中6
心，保藏编号为CGMCC NO15573；所述鼠李糖乳杆菌的接种量为3×10cfu/mL。

[0043] 本实施例中，所述植物酵素的具体制备方法为：

[0044] (a)将中药组合物的各中药材按比例混合后加入到10倍量的蒸馏水进行提取，3次提取后将滤液合并，将所得到的提取液进行浓缩至生药浓度1.0g/ml，得到中药浓缩液；

[0045] (b)向中药浓缩液中直接加入干酪乳杆菌进行接种发酵，于37℃发酵4h，得到植物酵素。所述干酪乳杆菌为干酪乳杆菌ATCC 393，货号0176P，购于深圳子科生物科技有限公6
司；所述干酪乳杆菌的接种量为1×10cfu/mL。

[0046] 实施例3

[0047] 本实施例提供了一种调节代谢、减肥减脂的胶原蛋白肽组合物，包含胶原蛋白肽发酵液和植物酵素，所述胶原蛋白肽发酵液和植物酵素的体积比为15：2；所述胶原蛋白肽发酵液为胶原蛋白肽经鼠李糖乳杆菌发酵而得；所述植物酵素是多种中药组合物经干酪乳杆菌发酵而得。所述中药组合物按重量份数计包含灵芝3份、泽泻2份和神曲2份。其中，胶原蛋白肽采用鱼胶原蛋白肽。鱼胶原蛋白肽，分子量2000Da，购于河北赛亿生物科技有限公司。

[0048] 本实施例中，所述胶原蛋白肽发酵液的具体发酵方法为：在水中加入胶原蛋白肽3％

[0049] (w/v)，并接种鼠李糖乳杆菌，于42℃发酵16h，即得胶原蛋白肽发酵液。所述鼠李糖乳杆菌为鼠李糖乳杆菌NCU2217，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中7
心，保藏编号为CGMCC NO15573；所述鼠李糖乳杆菌的接种量为1×10cfu/mL。

[0050] 本实施例中，所述植物酵素的具体制备方法为：

[0051] (a)将中药组合物的各中药材按比例混合后加入到10倍量的蒸馏水进行提取，3次提取后将滤液合并，将所得到的提取液进行浓缩至生药浓度1.0g/ml，得到中药浓缩液；

[0052] (b)向中药浓缩液中直接加入干酪乳杆菌进行接种发酵，于37℃发酵4h，得到植物酵素。所述干酪乳杆菌为干酪乳杆菌ATCC 393，货号0176P，购于深圳子科生物科技有限公7
司；所述干酪乳杆菌的接种量为1×10cfu/mL。

[0053] 实施例4

[0054] 本实施例与实施例2相似，区别在于，胶原蛋白肽采用牛皮胶原蛋白肽。牛皮胶原蛋白肽，2000‑4000Da，购于陕西晨明生物科技有限公司；

[0055] 实施例5

[0056] 本实施例与实施例2相似，区别在于，胶原蛋白肽采用猪皮胶原蛋白肽。猪皮胶原蛋白肽，分子量基本在3000Da左右，购于上海曙灿实业有限公司。

[0057] 对比例1

[0058] 本实施例与实施例2相似，区别在于，胶原蛋白肽发酵液替换成鼠李糖乳杆菌7
NCU2217菌液，鼠李糖乳杆菌NCU2217菌液中鼠李糖乳杆菌NCU2217浓度为1×10cfu/mL。

[0059] 对比例2

[0060] 本实施例与实施例2相似，区别在于，胶原蛋白肽发酵液替换成4％(w/v)的胶原蛋白肽水溶液。

[0061] 对比例3

[0062] 本实施例与实施例2相似，区别在于，胶原蛋白肽发酵液所用发酵菌剂不同，将鼠李糖乳杆菌NCU2217替换成普通鼠李糖乳杆菌，普通鼠李糖乳杆菌为鼠李糖乳杆菌ATCC 53103，购于深圳子科生物科技有限公司。

[0063] 对比例4

[0064] 本实施例与实施例2相似，区别在于，植物酵素中所用中药组合物直接发酵，不加干酪乳杆菌。具体为：所述植物酵素的具体制备方法为：

[0065] (a)将中药组合物的各中药材按比例混合后加入到10倍量的蒸馏水进行提取，3次提取后将滤液合并，将所得到的提取液进行浓缩至生药浓度1.0g/ml，得到中药浓缩液；

[0066] (b)中药浓缩液于37℃发酵4h，得到植物酵素。

[0067] 对比例5

[0068] 本实施例与实施例2相似，区别在于，植物酵素中所用中药组合物去除灵芝。

[0069] 对比例6

[0070] 本实施例与实施例2相似，区别在于，植物酵素中所用中药组合物去除泽泻。

[0071] 对比例7

[0072] 本实施例与实施例2相似，区别在于，植物酵素中所用中药组合物去除神曲。

[0073] 一、胶原蛋白肽组合物减肥、调节脂代谢的功能研究

[0074] 1.1肥胖小鼠模型构建

[0075] 小鼠：昆明种小鼠，雄性，体重20±2g，购于江苏艾菱菲生物科技有限公司；

[0076] 构建方法：所有实验小鼠饲喂基础饲料，适应性喂养1周后，按体重随机分为基础饲料组(6只)和高脂饲料组(150只)。基础饲料，又叫SPF级大小鼠维持饲料，购于辽宁长生生物技术股份有限公司；高脂饲料配方：基础饲料79.5％，猪油10％，蛋黄粉10％，胆固醇0.5％。基础饲料组作为正常组继续饲喂基础饲料，高脂饲料组作为模型组饲喂高脂饲料。
在小鼠建模期间每周称重1次，在每周喂养期间观察小鼠体重的变化，当肥胖度在20％以上时，肥胖小鼠模型建立成功。

[0077]

[0078] 1.2试验分组及给药

[0079] 从建模成功的肥胖小鼠中选取96只按体重随机分为16组，分别为1个模型组、1个阳性对照组、14个处理组(分别为实施例1‑5、对比例1‑7组、胶原蛋白肽发酵液及植物酵素)，保证各组之间体重无显著性差异，基础饲料组为正常组。分组结束后进入实验周期，实验周期为6周，模型组、阳性对照组和处理组继续饲喂高脂饲料，空白组继续饲喂基础饲料，自由饮食，每天记录摄食量，对实验小鼠每天上午8:30灌胃不同剂量的受试样品。正常组和‑1模型组灌胃剂量为：生理盐水10mL·Kg (bw/d)；阳性对照组灌胃剂量为：奥利司他‑1
54.6mg·Kg (bw/d)；处理组灌胃剂量为：实施例1‑5及对比例1‑7组所得组合物分别采用蒸‑1
馏水10倍稀释后，分别按10mL·Kg (bw/d)剂量灌胃。胶原蛋白肽发酵液及植物酵素为实施例2中所得，其根据实施例2的用量按比例稀释后(胶原蛋白肽发酵液10*12/15倍稀释，植物‑1
酵素按10*3/15倍稀释)，分别按10mL·Kg (bw/d)剂量灌胃。

[0080] 1.3检测指标

[0081] 实验周期结束后，在杀鼠前一天对小鼠禁食12h以上，禁食期间不控制饮水，杀鼠前称量小鼠体重及测量体长并记录，将小鼠麻醉后摘眼球采血，再脱颈处死；小鼠剖腹取得睾丸、双肾周围脂肪。

[0082] 1.31体重量：每组小鼠自由采食和饮水，灌胃期每周称量体重，连续6周，统计结果见表1和图1所示。

[0083] 1.32Lee’s指数：实验结束时，记录小鼠处死前的体质量(g)，测定体长(cm)，体长即小鼠解剖前鼻尖到肛口的距离，按照下式计算Lee’s指数，计算结果见表2所示；

[0084]

[0085] 1.33脂肪系数：小鼠处死后，打开小鼠腹腔取出睾丸、双肾周围的脂肪，置于预冷的生理盐水中，将血水和杂质除去并用滤纸吸干后称取重量，测小鼠脂肪系数，即睾脂、肾脂总脂肪质量(g)与体重(g)比。按下式计算脂肪系数，计算结果见表2所示。

[0086]

[0087] 1.34末次给药后禁食12h，将小鼠麻醉后摘眼球采血，将装有小鼠血液的离心管放入离心机，设置3500r/min转速，4℃条件下离心15min，吸取上清液进行测试小鼠血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL‑C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL‑C)、瘦素(LEP)的含量，结果见表3和图2所示。TG、TC、LDL‑C、HDL‑C、LEP试剂盒均购自南京建成生物工程研究所有限公司。

[0088] 表1

[0089]

[0090] 由表1和图1可知，灌胃前，模型组小鼠肥胖度大于20％，表明肥胖小鼠模型构建成功；正常组小鼠体重一直呈现增长趋势，第4、6周，与模型组相比，实施例1‑3、阳性对照组体质量分别显著性降低。与胶原蛋白肽发酵液、植物酵素组相比，实施例2体质量显著性降低，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用对小鼠体质量起到减肥作用，对体质量的减肥效果比单独使用时效果要好；与对比例1‑7相比，实施例2体质量显著性降低，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素一起对小鼠体质量起到减肥作用，并且只有采用鼠李糖乳杆菌NCU2217发酵得到的胶原蛋白肽发酵液，以及采用灵芝、泽泻和神曲协同发酵得到植物酵素，胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用效果更显著。

[0091] 表2

[0092]

[0093]

[0094] 由表2可知，与模型组相比，实施例1‑3、阳性对照组的Lee’s指数和脂肪系数均显著性降低。与胶原蛋白肽发酵液、植物酵素组相比，实施例2的Lee’s指数和脂肪系数均显著性降低，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用能显著减低内脏脂肪性肥胖，联合使用时降低效果比单独使用时效果更加明显；与对比例1‑7相比，实施例2的Lee’s指数和脂肪系数均显著性降低，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素一起能减低内脏脂肪性肥胖，并且只有采用鼠李糖乳杆菌NCU2217发酵得到的胶原蛋白肽发酵液，以及采用灵芝、泽泻和神曲协同发酵得到植物酵素，胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用降低效果更显著。

[0095] 由上可知，本发明所得胶原蛋白肽组合物采用胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用具有显著的减肥减脂作用。

[0096] 表3

[0097]

[0098]

[0099] 由表3和图2可知，与正常组相比，模型组TG、TC、LDL‑C、LEP显著升高，HLDL‑C显著降低；与模型组相比，实施例1‑3、阳性对照组TG、TC、LDL‑C、LEP显著升高，HLDL‑C显著降低。与胶原蛋白肽发酵液、植物酵素组相比，实施例2的TG、TC、LDL‑C、LEP显著升高，HLDL‑C显著降低，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用具有调节脂质代谢的作用，改善机体脂质代谢紊乱状况的作用，联合使用时效果比单独使用时更加明显；与对比例1‑7相比，实施例2的TG、TC、LDL‑C、LEP显著升高，HLDL‑C显著降低，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素一起能调节脂质代谢，并且只有采用鼠李糖乳杆菌NCU2217发酵得到的胶原蛋白肽发酵液，以及采用灵芝、泽泻和神曲协同发酵得到植物酵素，胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用调节脂质代谢效果更显著。因此，本发明所得胶原蛋白肽组合物采用胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用具有调节脂质代谢，改善机体脂质代谢紊乱状况的作用。

[0100] 二、胶原蛋白肽组合物调节糖代谢的功能研究

[0101] 2.1分组及给药：将购买的SD大鼠(购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司)在无菌实验室普通饲料喂养6天后，对所有大鼠进行称重，禁食4h，在其尾静脉取血，测空腹血糖，然后按大鼠体重灌胃250mg/kg的葡萄糖，分别测定0.5h和2h后的血糖值。参考血糖值将血糖正常的90只大鼠随机分为15组，分别是分别为1个空白组、1个模型组、1个阳性对照组、12个处理组(分别为实施例2、实施例4‑5、对比例1‑7组、胶原蛋白肽发酵液及植物酵素)。空‑1
白组不处理，模型组灌胃剂量为：生理盐水10mL·kg (bw/d)；阳性对照组灌胃剂量为：二甲‑1 ‑1
双脈107mg·kg (bw/d)，按10mL·kg (bw/d)剂量灌胃；处理组灌胃剂量为：实施例2、实施‑1
例4‑5及对比例1‑7组所得组合物分别采用蒸馏水10倍稀释后，分别按10mL·kg (bw/d)剂量灌胃。胶原蛋白肽发酵液及植物酵素为实施例2中所得，其根据实施例2的用量按比例稀‑1
释后(胶原蛋白肽发酵液10*12/15倍稀释，植物酵素按10*3/15倍稀释)，分别按10mL·kg(bw/d)剂量灌胃。

[0102] 连续灌胃33天。灌胃开始第1天到第7天SD大鼠普通饲料饲养，第8天开始除空白组外其他大鼠以高能饲料饲养，连续饲养26天。普通饲料，又叫SPF级大小鼠维持饲料，购于辽宁长生生物技术股份有限公司；高能饲料配方：普通饲料52.6％，猪油10％，白砂糖15％，蛋白粉15％，酪蛋白5％，胆固醇1.2％，胆酸钠0.2％，碳酸氢钙0.6，石粉0.4％。

[0103] 2.2Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立：灌胃给药的第29天，除空白组外，其余各组大鼠‑1禁食但不禁水24小时，待禁食完毕后，腹腔注射四氧嘧啶，剂量为107mg·kg ，随后高能饲料继续饲养5天。

[0104] 2.3检测指标

[0105] 2.3.1实验大鼠空腹血糖的测定：在灌胃给药的第28(造模前)、32(造模后)天，所有实验大鼠禁食4小时，尾部静脉取血测空腹血糖值，结果见表4。

[0106] 2.3.2肝糖元测定大鼠麻醉后处死，打开腹腔分离肝脏，取小块肝脏组织按肝糖原测定试剂盒检测说明书(产品A043‑1‑1，南京建成生物工程研究所有限公司)进行处理并测量肝糖元含量，结果见表5和图3。

[0107] 表4

[0108]

[0109] 由表4可知，造模前(28天)，空白组、模型组、阳性对照组和各处理组的空腹血糖均在正常范围内波动，各组间无显著性差异；造模后(32天)，模型组、阳性对照组及各处理组糖尿病大鼠空腹血糖值呈现出上升趋势，与造模前(28天)相比，模型组大鼠血糖值上升幅度最大，空腹血糖均值高达16.76mmol/L，且模型组的血糖值与空白组相比显著性上升，说明糖尿病大鼠造模成功。造模后，各处理组糖尿病大鼠空腹血糖值均低于模型组；与胶原蛋白肽发酵液、植物酵素组相比，实施例2的空腹血糖值显著性降低，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用能显著降血糖，联合使用时降低效果比单独使用时效果更加明显；与对比例1‑7相比，实施例2的空腹血糖值显著性降低，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素一起能降血糖，并且只有采用鼠李糖乳杆菌NCU2217发酵得到的胶原蛋白肽发酵液，以及采用灵芝、泽泻和神曲协同发酵得到植物酵素，胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用降血糖更显著。因此，本发明所得胶原蛋白肽组合物采用胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用具有降血糖的作用。

[0110] 表5

[0111]组别 肝糖元(mg/g)
空白组 16.26±0.10
a
模型组 9.41±0.07
b
阳性对照组 15.16±0.09
bcd
实施例2 15.83±0.08
bcd
实施例4 15.76±0.07
bcd
实施例5 15.87±0.10
对比例1 11.53±0.04
对比例2 12.22±0.09
对比例3 12.38±0.08
对比例4 11.94±0.06
对比例5 12.76±0.07
对比例6 12.31±0.10
对比例7 12.47±0.09
胶原蛋白肽发酵液 11.28±0.06
植物酵素 11.15±0.05

[0112] 由表5和图3可知，相较于空白组，模型组肝糖元含量显著降低，表明模型组大鼠糖代谢紊乱。与模型组相比，阳性对照组、各处理组的肝糖元含量显著升高，而阳性对照组、各处理组能够调节糖代谢的平衡，与胶原蛋白肽发酵液、植物酵素组相比，实施例2的肝糖元含量显著升高，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用能显著调节糖代谢平衡，联合使用时降低效果比单独使用时效果更加明显；与对比例1‑7相比，实施例2的肝糖元含量显著升高，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素一起能显著调节糖代谢平衡，并且只有采用鼠李糖乳杆菌NCU2217发酵得到的胶原蛋白肽发酵液，以及采用灵芝、泽泻和神曲协同发酵得到植物酵素，胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用降低效果更显著。因此，连续灌胃本发明所得胶原蛋白肽组合物提高了大鼠肝脏处理高血糖的能力，有助于调节糖代谢。

[0113] 三、胶原蛋白肽组合物对小鼠急性肝损伤的保护作用

[0114] 3.1实验分组及给药：八周龄雄性小鼠C57BL/6，购于常州卡文斯实验动物有限公司；将78只小鼠随机分为13组，分别为1个空白组、1个模型组、1个阳性对照组(联苯双酯)、10个处理组(分别为实施例2、对比例1‑7组、胶原蛋白肽发酵液及植物酵素)。空白组和模型‑1
组灌胃生理盐水，灌胃剂量为：生理盐水10mL·kg (bw/d)；阳性对照组灌胃剂量为：联苯双‑1 ‑1
酯滴丸，200mg·kg (bw/d)，按10mL·kg (bw/d)剂量灌胃；处理组灌胃剂量为：实施例2、‑1
及对比例1‑7组所得组合物分别采用蒸馏水10倍稀释后，分别按10mL·kg (bw/d)剂量灌胃。胶原蛋白肽发酵液及植物酵素为实施例2中所得，其根据实施例2的用量按比例稀释后‑1
(胶原蛋白肽发酵液10*12/15倍稀释，植物酵素按10*3/15倍稀释)，分别按10mL·kg (bw/d)剂量灌胃。联苯双酯滴丸，由北京协和药厂提供。

[0115] 除正常组和模型组灌胃生理盐水外，其余各组均灌胃给药10天，末次给药1小时后，正常组腹腔注射橄榄油，其他各组小鼠腹腔注射0.3％的CCl4橄榄油溶液10ml/kg，禁食不禁水，24小时后称重，麻醉后眼眶采血，处死小鼠后解剖取肝脏。

[0116] 3.2检测指标

[0117] 3.2.1小鼠处死前，称量各模型各组所有小鼠的重量，麻醉取血后处死所有小鼠并取出肝脏，用4℃生理盐水冲洗，滤纸吸干，称肝脏质量。收集数据后计算各组小鼠肝脏系数，结果如表6所示。

[0118] 肝脏系数＝肝脏质量(g)/体重(g)×100％

[0119] 3.2.2生化指标

[0120] 将眼眶取血法获得的小鼠血液置于4mL促凝血管中25℃、3500rpm离心15min后取上清液得血清，使用相对应试剂盒按照说明书方法测定小鼠血清中ALT和AST，结果如表6和图4所示。取相同部位的一小块肝组织，按1:9加入预冷的生理盐水，匀浆后4℃、9500rpm离心20min取上清即为10％肝组织均浆液，并按相对应试剂盒使用说明操作，测定肝组织中的SOD和MDA含量，结果如表7和图5所示。其中，丙氨酸氨基转移酶(ALT)试验盒、天冬氨酸氨基转移酶(AST)试验盒、丙二醛(MDA)试剂盒、超氧化物岐化酶(SOD)试剂盒，均购于上海碧云天生物有限公司。

[0121] 表6

[0122]组别 ALT(U/L) AST(U/L) 肝脏系数(％)
空白组 28.45±3.48 76.28±6.82 4.10±0.13
a a a
模型组 131.52±10.37 336.47±24.18 5.26±0.17
b b b
阳性对照组 38.46±4.71 95.46±16.74 4.25±0.11
bc bc bc
实施例2 41.14±3.16 115.29±11.35 4.31±0.10
对比例1 87.54±7.65 245.73±21.02 4.97±0.12
对比例2 82.47±7.21 231.32±23.17 4.93±0.09
对比例3 78.35±6.87 217.21±19.54 4.88±0.19
对比例4 85.26±7.18 238.46±22.75 4.96±0.14
对比例5 76.51±7.36 204.69±18.53 4.84±0.18
对比例6 80.16±6.27 224.95±23.14 4.90±0.08
对比例7 77.28±6.79 212.78±21.58 4.87±0.15
胶原蛋白肽发酵液 90.15±8.20 254.15±22.51 5.02±0.14
植物酵素 93.42±7.42 261.57±23.82 5.09±0.13

[0123] 表7

[0124]

[0125]

[0126] 由表6和图4可知，与空白组相比，模型组小鼠的肝脏指数显著上升，模型组小鼠血清ALT和AST含量呈显著性上升，说明模型组小鼠肝脏受到了损伤。与模型组相比，各处理组的肝脏指数、ALT和AST含量均有所下降，且阳性对照组、实施例2组小鼠肝脏指数、血清ALT和AST含量均显著下降。与胶原蛋白肽发酵液、植物酵素组相比，实施例2组小鼠肝脏指数、血清ALT和AST含量显著下降，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用能显著降低小鼠肝脏指数、血清ALT和AST含量，联合使用时降低效果比单独使用时效果更加明显；与对比例1‑7相比，实施例2组小鼠肝脏指数、血清ALT和AST含量显著下降，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素一起能显著降低小鼠肝脏指数、血清ALT和AST含量，并且只有采用鼠李糖乳杆菌NCU2217发酵得到的胶原蛋白肽发酵液，以及采用灵芝、泽泻和神曲协同发酵得到植物酵素，胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用效果更显著。

[0127] 由表7和图5可知，相较于空白组，模型组小鼠肝脏内SOD活性呈显著性降低，说明所有模型组小鼠肝脏都受到氧化损伤；模型组小鼠肝脏内MDA含量呈显著性上升，表明所有模型组小鼠肝脏都有严重的脂质过氧化情况。与模型组相比，各处理组的SOD活性均有所恢复、MDA含量有所下降，且阳性对照组、实施例2组小鼠肝脏的SOD活性显著上升、MDA含量显著下降。与胶原蛋白肽发酵液、植物酵素组相比，实施例2组小鼠肝脏的SOD活性显著上升、MDA含量显著下降，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用能显著升高SOD活性、降低小鼠肝脏的MDA含量，联合使用时降低效果比单独使用时效果更加明显；与对比例1‑7相比，实施例2组小鼠肝脏的SOD活性显著上升、MDA含量显著下降，说明胶原蛋白肽发酵液和植物酵素一起能显著升高SOD活性、降低小鼠肝脏的MDA含量，并且只有采用鼠李糖乳杆菌NCU2217发酵得到的胶原蛋白肽发酵液，以及采用灵芝、泽泻和神曲协同发酵得到植物酵素，胶原蛋白肽发酵液和植物酵素协同作用效果更显著。

[0128] 综上，本发明所得胶原蛋白肽组合物干预显著缓解急性肝损伤模型小鼠肝脏肿大，降低模型小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的含量，使肝损伤程度得到缓解。对抗氧化酶系活性测定发现，本发明所得胶原蛋白肽组合物干预显著提升急性肝损伤模型小鼠肝脏中SOD的水平、降低MDA的含量，从而缓解模型小鼠肝脏氧化应激。

[0129] 以上所述实施例仅表达了本发明的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。