技术领域
[0001] 本发明涉及一种作物转化辅助器,具体地是一种农杆菌介导的浸花转化法的抽真空辅助器。
相关背景技术
[0002] 粮食生产主要可分为两种,一种是提供食用的粮食,一种是为生物能源提供原料的粮食。甜高粱是一种重要的能源植物。上世纪70年代的石油危机引发了人类对生物燃料代
[0003] 替石油的研究,美国和巴西用玉米和甘蔗生产燃料乙醇获得成功。现在,由于化石能源的
[0004] 渐趋枯竭和环保的需要,发展生物质产业成为许多国家的重要发展战略。我国的粮食还不
[0005] 那么富裕。生产液体生物燃料还得找其他途径。甜高粱有很高的光合效率,有“高能作物”
[0006] 之称,是目前世界上生物学产量最高的作物。甜高粱茎秆中含糖丰富,是粮食生产酒精最
[0007] 好的替代物。每亩甜高粱的酒精产量约为玉米、甜菜和小麦的2倍;比甘蔗还高1/4;籽粒既可食用,又可作饲料和工业原料。我国有1亿多公顷贫膺的边际性土地,如果种上能源植物,产出的燃油会相当可观。我国的汽车保有量2020年将达到2.2亿辆,每年汽车就将消耗汽油2.2亿吨,国内目前的石油产量远远不够用。种植利用甜高粱可以极大地缓解我国能源危机。
[0008] 谷子起源于我国,我国的种植面积占世界的80%。谷子是粮草兼用型作物,它具有耐旱、耐痔薄、抗逆性强、产量平稳、营养价值高等特征。玉米原产于南美洲,适合旱地种植。玉米是三大粮食品种之一,为解决人类的温饱问题起到很大作用。此外饲料消费也是玉米最重要的消费渠道,约占消费总量的70%左右。作为工业原料使用也是玉米消费的主要渠道。玉米可开发产品众多,是粮食作物中用量最大的工业原料。玉米广泛用于生产淀粉、造纸、食品、纺织、医药等行业。以玉米淀粉为原料生产的酒精是一种清洁的“绿色”燃料,有可能在21世纪取代传统燃料而被广泛使用。以上三种作物在我国的粮食生产中占重要地位,但目前对其研究还停留在常规育种上。因其难于进行组织培养及转化再生能力差等问题,要应用基因技术改良胜状,还比较困难。
[0009] 目前的转基因技术可分为物理法、化学法及生物学法。无论那一种方法,都要依靠转化细胞的脱分化和再分化这一组织培养植株再生过程,实现外源基因的转移,获得转基[0010] 因植株。但是该途径有其局限性,如组织培养及转化再生能力的基因型依赖性比较强,而且有些物种难于进行组织培养,以及逃逸体、嵌合体、转化率低下、过敏反应导致感染部
[0011] 位的褐化坏死、细胞脱分化和再分化中产生的体细胞变异以及转基因株的育性降低或丧失
[0012] 都有可能干扰转基因植株的分析及应用。植物原位转基因方法是一种不需要组织或细胞培
[0013] 养手段而达到植物在活体而非离体手段状态下的转化。浸花法转化是植物原位转基因方法
[0014] 中的一种,是利用材料花序与农杆菌接触,在活体条件下,完成可遗传细胞的转化,并通
[0015] 过对后代的筛选,获得转化株。目前浸花法转化已应用于双子叶植物十字花科的芸蔓属作
[0016] 物中并获得成功,利用浸化花法转化禾本科作物未见报道。
[0017] 我们通过长期的研究和探索发明了浸花法转化禾本科作物(ZL 200710178499.5),这种方法大大简化了作物转基因的方法,推进了分子育种的发展,具有重要的意义。一般来说,抽真空能够增加浸花法转化的效率,但是禾本科作物一般植株比较高,普通的真空抽气泵不能实现禾本科作物的抽真空,我们经过反复的研究发明了一种禾本科作物转化辅助器,利用该转化辅助器,能够实验禾本科作物转化抽真空,增加其转化效率。
具体实施方式
[0022] 如图1所示,发明所述的禾本科浸花法转化辅助器包括抽真空容器和圆柱软橡胶塞,所述的抽真空容器包含容器、放气阀1、抽真空口2和菌液吸入口3。所述的圆柱柱软橡胶塞的纵切面是梯形。在作物浸花法转化的时候,将目标作物的花序或穗子自圆柱软橡胶塞中套入抽真空容器,关闭放气阀,转化菌液自菌液吸入口进入抽容器,开始抽真空;停止抽真空时,打开放气阀,转化菌液自吸入口返回,取出目标作物的花序或穗子,转化完成。该转化辅助器可以使转化菌液重复利用,避免了转化菌液的浪费。