[0008] 本发明的目的是明确从珠子参中克隆获得的可调控珠子参皂苷生物合成的转录因子基因PjMYB1的用途，即其在提高珠子参皂苷生物合成关键酶基因FPS、DS、AS表达量和增加珠子参愈伤组织中皂苷含量中的应用。

[0009] 本发明基于同源克隆的原理，从珠子参中克隆得到MYB类转录因子基因的cDNA并对其编码蛋白进行功能鉴定。发明人将这个基因命名为PjMYB1，其中所述cDNA如序列表SEQ ID NO:1所示，编码SEQ ID NO:2所示氨基酸序列蛋白；对该基因进行序列分析，表明PjMYB1 cDNA大小为735 bp，正好为开放阅读框(Open reading frame，ORF)，编码含有244个氨基酸的蛋白质。采用农杆菌介导法，通过植物超表达载体将本发明的PjMYB1转录因子基因导入珠子参细胞中，可提高珠子参皂苷合成途径关键酶基因的表达量，增加珠子参皂苷的产量。

[0010] 上述转录因子基因可应用于正调控珠子参皂苷的生物合成，具体操作如下：（1）获得目的基因：提取珠子参总RNA，反转录合成cDNA第一链；通过RT-PCR扩增出PjMYB1的全长编码区，并与pMD18-T easy载体相连，经测序验证获得具有目的基因的克隆；
（2）植物表达载体构建与遗传转化：用限制性内切酶XbaI和SmaI酶切pMD18-T-PjMYB1质粒和植物表达载体pCAMBIA2300S，胶回收目的基因片段与载体大片段。连接目的基因片段与pCAMBIA2300S载体片段，构建植物超表达载体pCAMBIA2300S-PjMYB1；采用液氮冻融法将pCAMBIA2300S-PjMYB1质粒导入农杆菌菌株EHA105中后利用农杆菌介导的遗传转化的方法，将含有目的基因的超表达载体导入珠子参细胞中表达，通过抗生素和qRT-PCR筛选阳性转基因细胞系；
（3）转基因细胞系皂苷含量检测：提取珠子参转基因和非转基因细胞系中的皂苷，分析转基因和非转基因细胞系间皂苷含量的差异。

[0011] 本发明为提高珠子参中皂苷的含量提供了一种新方法，利用生物工程技术和基因调控的方法可更高效率合成珠子参皂苷，克服了人工栽培周期长、化学合成机理和路线不够清晰等缺点；将转录因子PjMYB1基因导入珠子参细胞中表达，使珠子参皂苷生物合成途径相关关键酶基因的表达量提高，进而增加了珠子参皂苷的产量，为大规模产业化生产珠子参皂苷提供了理论参考和科学依据。