[0001] 本发明涉及可使各种各样的病毒灭活的抗病毒剂。

[0002] 近年来，已报道越来越多的病毒感染引起的死亡病例，如SARS(严重急性呼吸系统综合症)、诺如病毒(norovirus)和禽流感。由于日益发达的交通网络和不断变异的病毒，大范围流行的前景现在造成全球性威胁。新流感病毒的出现也是需要立即行动的紧迫问题。虽然开发抗病毒疫苗是这些问题的一个解决方案并且目前正在紧急地进行，但是由于疫苗的专一性，它们仅在抑制特定病毒的感染方面有效果。因为疫苗生产是需要相当多时间的过程，所以通常很难储备需求量的特定疫苗。因而，这种对于对各种各样的病毒均表现出抗病毒活性的抗病毒剂的需求很旺盛。

[0003] 病毒分为包裹在称作包膜的含脂质膜中的那些病毒和未包裹在该膜中的那些病毒。因为包膜主要由脂类构成，所以它可以很容易地通过用醇、有机溶剂、肥皂和其它消毒剂处理而得以破坏。因此，带有包膜的病毒可以很容易地被这些消毒剂灭活(即，降低或消除感染能力)。相反地，不带包膜的病毒则被认为对这些消毒剂有高度的抗性。本文使用的术语“病毒灭活活性”和“抗病毒活性”都是指相同的活性。

[0004] 为了解决上述问题，已开发出比有机病毒药剂具有更广谱的活性的无机抗病毒剂。例如，已报道用抗微生物染料剂和二价铜离子浸渍的织物具有使流感病毒灭活的能力(专利文献1)。而且，报道了由用铜化合物浸渍的含羧基纤维组成的抗病毒纤维(专利文献2)。此外，报道了在使禽流感病毒灭活方面有效的冷加工的超细铜纤维(专利文献3)。另外还报道称利用其它元素使病毒灭活，例如利用二氧化钛光催化剂(专利文献4和5)。

[0005] 现有技术文献

[0006] 专利文献

[0007] 专利文献1 日本专利申请特许公开第2006-188499号

[0008] 专利文献2 国际专利公开第WO05/083171号小册子

[0009] 专利文献3 日本专利申请特许公开第2008-138323号

[0010] 专利文献4 日本专利申请特许公开第2005-160494号

[0011] 专利文献5 日本专利申请特许公开第2009-072430号

[0027] 本实施方式的抗病毒剂含有至少一种由碘与周期表的第4周期至第6周期和第8族至第15族中列出的元素组成的碘化物的颗粒，或至少一种一价铜化合物的颗粒，作为活性成分。

[0028] 虽然本发明的抗病毒剂使病毒灭活的机理目前还不清楚，但是据信当本实施方式的碘化物或一价铜化合物与病毒接触时，它作用于病毒DNA或RNA，从而使DNA或RNA灭活或者破坏细胞质。另外，据信一价铜化合物通过如下方式使病毒灭活：当一价铜化合物暴露于空气湿气后产生的一价铜离子转变成更稳定的二价铜离子时，释放出电子，这种电子转移影响了病毒表面的电荷，使它们灭活。

[0029] 充当本实施方式抗病毒剂的活性成分的碘化物或一价铜化合物，在没有与诸如稳定剂混合的情况下便展现出抗病毒活性。换言之，就其组分而言，本实施方式的抗病毒剂相比传统的抗病毒剂可以更自由地设计。

[0030] 另外，因为本实施方式的抗病毒剂不需要与其混合的任何稳定剂或类似物，所以可以简单的方式生产，而不需要任何抗病毒组分预处理。此外，当分散在分散介质如空气和水中时，本实施方式的抗病毒剂是稳定的，因此不需要特殊的清洗处理。因而，该抗病毒剂很容易展现和维持其抗病毒活性。

[0031] 因为许多本实施方式中使用的碘化物和一价铜化合物中已经广泛市售，所以，如果这些化合物在化学上稳定，则它们可以相对简单的方式，例如通过与树脂捏合或与涂料混合而用于广泛的应用中。

[0032] 本实施方式中使用的具有抗病毒活性的至少一种碘化物由碘与周期表的第4周期至第6周期和第8族至第15族中列出的元素组成。优选地，周期表的第4周期至第6周期和第8族至第15族中的元素是Cu、Ag、Sb、Ir、Ge、Sn、Tl、Pt、Pd、Bi、Au、Fe、Co、Ni、Zn、In或Hg。更优选地，本实施方式的抗病毒剂中含有的碘化物颗粒是选自以下物质中的至少一种：CuI、AgI、SbI3、IrI4、GeI4、GeI2、SnI2、SnI4、TlI、PtI2、PtI4、PdI2、BiI3、AuI、AuI3、FeI2、CoI2、NiI2、ZnI2、HgI和InI3。

[0033] 另外优选地，本实施方式中使用的具有抗病毒活性的一价铜化合物是氯化物、醋酸盐、硫化物、碘化物、溴化物、过氧化物、氧化物或硫氰化物。更优选地，本实施方式的抗病毒剂中含有的一价铜化合物颗粒是选自以下物质中的至少一种：CuCl、CuOOCCH3、CuBr、CuI、CuSCN、Cu2S和Cu2O。

[0034] 在本实施方式抗病毒剂中使用的上述碘化物或一价铜化合物的颗粒当中，选自CuI、AgI、SnI4、CuCl、CuBr和CuSCN中的至少一种的颗粒是特别优选的，因为它们在空气中具有高度的储存稳定性。

[0035] 虽然在本实施方式中使用的碘化物或一价铜化合物可具有由本领域技术人员适当确定的任意粒径，但优选以平均粒径为500μm或更小的细颗粒形式提供。当将该颗粒与树脂捏合以纺丝制成纤维时，它们的平均粒径优选为1μm或更小，从而避免纤维强度的降低。在本实施方式中，考虑到颗粒生产、处理和化学稳定性，粒径优选为1nm或更大，然而该颗粒可具有由本领域技术人员适当确定的任何粒径。本文使用的术语“平均粒径”是指体积平均粒径。

[0036] 本实施方式的抗病毒剂可用来使无限范围的病毒灭活，不论它们的基因组类型如何以及它们是否具有包膜。这些病毒的实例包括鼻病毒、脊髓灰质炎病毒、轮状病毒、诺如病毒、肠道病毒、肝病毒、星状病毒、沙波病毒(sapovirus)、E型肝炎病毒、A/B/C型流感病毒、副流感病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、人偏肺病毒(human metapneumovirus)、RS病毒、尼帕病毒(nipah virus)、亨德拉病毒(hendra virus)、黄热病病毒、登革热病毒、日本脑炎病毒、西尼罗病毒、乙型/丙型肝炎病毒、东方型和西方型马脑炎病毒、阿尼昂-尼昂病毒(O′nyong-nyong virus)、风疹病毒、拉沙病毒、鸠宁病毒(Junin virus)、马秋博病毒(Machupo virus)、瓜纳瑞托病毒(Guanarito virus)、沙粒病毒(Sabia virus)、克里米亚刚果出血热病毒、白蛉热病毒(sandfly fever)、汉坦病毒(hantavirus)、辛诺柏病毒(Sin Nombre virus)、狂犬病病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒(Marburgvirus)、蝙蝠狂犬病病毒(bat lyssavirus)、人T细胞白血病病毒、人免疫缺陷病毒、人冠状病毒、SARS冠状病毒、人微小病毒(human parvovirus)、人多瘤病毒(human polyomavirus)、人乳头瘤病毒(human papilloma virus)、腺病毒、疱疹病毒、水痘病毒、带状疱疹病毒、EB病毒、细胞巨化病毒(cytomegalovirus)、天花病毒(smallpox virus)、猴痘病毒(monkeypox virus)、牛痘病毒、软疣痘病毒(Molluscipoxvirus)和副痘病毒(parapoxvirus)。

[0037] 本实施方式的抗病毒剂可以各种形式使用。虽然从处理的角度出发，本实施方式的抗病毒剂最优选以诸如粉末的形式使用，但它也可以任何其它合适的形式使用。例如，该抗病毒剂可以分散在分散介质如水中。当本实施方式的抗病毒剂分散在分散介质中时，优选地，分散液含有0.2质量％或更多的碘化物或一价铜化合物活性成分，从而确保足够的抗病毒活性。在本实施方式中，例如，抗病毒剂在分散液中的量优选为30质量％或更少，从而确保分散液的稳定性和可操作性，然而该分散液可以含有由本领域技术人员确定的任何合适的量的抗病毒剂。本实施方式的抗病毒剂可以与已知的抗病毒剂如乙醇和次氯酸结合使用，从而增强期望的效果。而且，可使该抗病毒剂在欲使其含有抗病毒剂或在其上固定有抗病毒剂的纤维或其它基底(substrate)内或表面上结晶。此外，可将该抗病毒剂与其它的抗病毒剂、抗微生物剂、防霉剂、抗过敏剂、催化剂、抗反射材料或绝热材料混合。

[0038] 另外，本实施方式的抗病毒剂可以含有该抗病毒剂或在其外表面上固定有该抗病毒剂的纤维结构的形式提供。

[0039] 可以对本实施方式的抗病毒药剂进行由本领域技术人员适当选择的任何处理，以便将抗病毒剂包含在或固定到纤维结构中。例如，可将本实施方式的抗病毒剂添加到聚合物材料中，并将其捏合和纺丝制成纤维，以便将该抗病毒剂包含在纤维结构中。另外可选地，可以利用例如粘合剂，将抗病毒剂固定到纤维结构如机织织物或无纺织物上。而且，可将该抗病毒剂固定到无机材料如沸石上，又将沸石固定到纤维结构上，从而形成抗病毒纤维结构。本文使用的短语“包含抗病毒剂”意在包括抗病毒剂暴露在外面的情况。

[0040] 纤维结构的具体实例包括遮蔽物(mask)、空调过滤器、空气净化器过滤器、衣物(clothes)、防虫滤网(insect screen)和禽舍网(poultry house net)。用于形成纤维结构的聚合物材料的实例包括聚酯、聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚对苯二甲酸丁二醇酯、聚四亚甲基对苯二酸酯(polytetramethylene terephthalate)、尼龙、丙烯腈材料(acryl)、聚四氟乙烯、聚乙烯醇、Kevlar、聚丙烯酸、聚(甲基丙烯酸甲酯)、人造丝(rayon)、铜氨(cupra)、金属丝(tinsel)、波里诺西克纤维(polynosic)、醋酸酯(acetate)、三醋酸酯(triacetate)、棉(cotton)、大麻纤维(hemp)、羊毛、丝绸(silk)和竹纤维(bamboo)。

[0041] 而且，本实施方式的抗病毒剂可以含有抗病毒剂或在其外表面上固定有抗病毒剂的成型制品的形式提供。与纤维结构的情况一样，可以对本实施方式的抗病毒药剂进行由本领域技术人员适当选择的任何处理，以便将抗病毒剂包含或固定到成型制品的外表面上。例如，当成型制品由有机材料如树脂形成时，可在将树脂成型为成型制品前，将抗病毒剂与树脂捏合。当成型制品由无机材料如金属形成时，可利用粘合剂将抗病毒剂固定到成型制品的外表面上。具有本实施方式的抗病毒剂的成型制品可以使与该成型制品接触的任何病毒灭活。例如，含有本实施方式的抗病毒剂或在其外表面上固定有该抗病毒剂的电话接收器可以防止在受感染者之后使用该接收器的未受感染者被病毒感染。

[0042] 与上述纤维结构和成型制品一样，本发明的抗病毒剂可以膜或片材的形式提供，上述的膜或片材含有抗病毒剂，或通过利用类似的固定技术通过捏合或利用粘合剂在其外表面上固定有抗病毒剂。膜或片材的具体实例包括墙纸、包装袋和包装膜。抗病毒剂的抗病毒活性可以使附着于这些膜或片材表面上的病毒灭活。因而，通过将上述墙纸施用在病房墙壁上，或通过用上述包装袋或包装膜包裹医疗器械，可防止医院获得性感染或医疗器械受病毒污染。

[0043] 含有碘化亚铜(I)——用于提供本实施方式的抗病毒剂的碘化物或一价铜化合物颗粒的实例，或在其外表面上固定有碘化亚铜(I)的抗病毒纤维可通过各种技术制造，例如如下技术：包括使碘吸附到纤维上，并用亚铜化合物的水溶液处理吸附碘的纤维使得所得制品含有碘化亚铜(I)的技术；包括将碘化亚铜(I)粉末分散在熔融树脂中，并对该树脂进行纺丝的技术；包括将碘化亚铜(I)粉末分散在聚合物溶液中，并对该聚合物溶液进行纺丝的技术；利用机械碾磨使碘化亚铜(I)粉末固定到纤维表面上的技术；以及利用涂覆剂使碘化亚铜(I)固定到纤维表面上的技术。这些技术可以与各种聚合物材料一起使用，从而形成从低到高浓度的各种各样浓度的含有碘化亚铜(I)或在其外表面上固定有碘化亚铜(I)的聚合物材料。

[0044] 含有本实施方式的抗病毒剂的抗病毒纤维优选地含有相对于抗病毒纤维为0.2质量％或更多量的碘化物活性成分，或者固定有上述量的碘化物，从而获得更高的抗病毒活性。虽然包含在(或固定到)抗病毒纤维中的碘化物的最大量没有特别限制，并可以由本领域技术人员适当地确定，但是优选抗病毒纤维含有80质量％或更少量的碘化物，以便确保抗病毒纤维的纤维强度和其它物理性能。抗病毒纤维中含有的碘化物的比例可以通过热重分析、滴定、原子吸收光谱或ICP分析测量。

[0045] 含有氯化亚铜(I)——一价铜化合物的实例，或者在其外表面上固定有氯化亚铜(I)的抗病毒纤维可以通过各种技术生产，例如如下技术：包括加入氯化亚铜(I)并使其与熔融聚合物捏合从而将氯化亚铜(I)分散到聚合物中，随后使该聚合物形成纤维的技术；利用机械碾磨使氯化亚铜(I)粉末固定到纤维表面上的技术；利用涂覆剂使氯化亚铜(I)固定到纤维表面上的技术；包括将氯化亚铜(I)分散到溶解在溶剂中的聚合物中，随后将该分散液施用到其它材料上从而固定氯化亚铜(I)的技术；以及包括将氯化亚铜(I)溶解在含水盐酸中，将亲水性聚合物材料如尼龙6或聚丙烯酸浸没在该水溶液中从而使一价铜离子固定到聚合物材料中，并将聚合物材料进一步浸没在含水盐酸中从而使氯化亚铜(I)结晶的技术。另外可选地，氯化亚铜(I)可以用对温度敏感的聚(N-异丙基丙烯酰胺)包裹从而形成包裹体(capsule)，该包裹体又用来形成含有包裹体或在其外表面上固定有包裹体的纤维。

[0046] 虽然上面已提到，抗病毒纤维优选地含有相对于抗病毒纤维为0.2质量％至80质量％的量的碘化亚铜，或者固定有上述量的碘化亚铜，但是出于与上面相同的原因，本实施方式中使用的其它碘化物或一价铜化合物也优选以相对于抗病毒纤维为0.2质量％至80质量％的量包含在或固定到抗病毒纤维中。应当理解到，纤维结构也优选含有相对于纤维结构为0.2质量％至80质量％的量的本实施方式的抗病毒剂，或者固定有上述量的抗病毒剂。

[0047] 实施例

[0048] 虽然本发明现将参考实施例进行描述，但本发明不仅仅局限于这些实施例。

[0049] (通过抗-HA活性进行的抗病毒活性评价)

[0050] (实施例1-27)

[0051] 将表1所示的市售的碘化合物和一价铜化合物粉末悬浮在100μL MEM(伊格尔极限必需培养基(Minimum Essential Medium Eagle)，MP Biomedical)中，使得悬浮液浓度为5质量％和0.5质量％，用于评价抗病毒活性。本文使用的术语“悬浮液浓度”是指悬浮液的特定组分(如碘化物或一价铜化合物)相对于形成悬浮液的所有组分的总质量(＝
100％)的质量比例，上述的所有组分包括该碘化物或一价铜化合物和溶剂。

[0052] (评价方法)

[0053] 在标准的血细胞凝集(HA)测定法中，对于实施例1-27，通过视觉观察完全(complete)凝集来确定滴度(HA滴度)。所使用的病毒是在MDCK细胞中培养的流感病毒
(A型流感/kitakyusyu/159/93(H3N2))。

[0054] 具体地，配制用磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)稀释的病毒溶液的两倍连续稀释液，并将50μL的每种稀释液加入到塑料96孔板的孔中。然后向每孔中加入50μL 0.5％的鸡RBC悬浮液。将该板置于4℃下60分钟并测定HA滴度。对于该病毒溶液，所测得的HA滴度为256。

[0055] 接下来，用PBS稀释表1所示的实施例的各种物质，使悬浮液浓度为10质量％和1质量％。将450μL测得HA滴度为256的上述病毒溶液加入到450μL各个浓度的两种样品的每个中，并使所得悬浮液在室温下反应10分钟，同时用微管转子(microtube rotator)搅拌。作为对照，将450μL HA滴度为256的病毒溶液加入到450μL PBS中，像其它样品一样，所得溶液用微管转子搅拌10分钟。

[0056] 然后在超微型离心机(ultra-microcentrifuge)中使固体组分沉淀，并收集上清液，将其用作样品溶液。配制各50μL的用PBS稀释的样品溶液的两倍连续稀释液。向每种稀释液中加入50μL 0.5％的鸡RBC悬浮液，将所得悬浮液置于4℃下60分钟，并测定HA滴度。结果在表2中给出。在每种反应混合物中，实施例中的每种物质都具有5质量％和0.5质量％的浓度，因为向每个样品中加入了等量的病毒溶液。

[0057] (表1)

[0058]

[0059]

[0060] (注)Wako＝Wako Pure Chemical Industries

[0061] (表2)

[0062]

[0063]

[0064] (注1)表中的“＜2”表示可测量的最低HA滴度。

[0065] (注2)对照是在0％的浓度下(仅PBS)进行的。

[0066] 表2中的结果表明，实例1-27的物质中每种物质都具有使病毒灭活的能力。如所示，在5％的浓度下每种物质的HA滴度为32或更小，表明75％或更多的病毒已被灭活。具体地，物质GeI4、GeI2、SnI2、SnI4、PtI2、FeI2、CoI2、NiI2、ZnI2、InI3、CuCl、CuBr和CuOOCCH3中的每种物质都产生99％或更多的病毒灭活的高活性，其是本测定法可检测到的最低值。

[0067] (通过使流感病毒和猫杯状病毒灭活进行的抗病毒活性评价)

[0068] 如先前所述，病毒分为包裹在称作包膜的含脂质膜中的那些病毒和未包裹在该膜中的那些病毒。因而，评价了测试物质使包膜病毒和非包膜病毒灭活的能力。所使用的包膜病毒为流感病毒(A型流感/kitakyusyu/159/93(H3N2))，所使用的非包膜病毒为猫杯状病毒(F9病毒株)——非包膜诺如病毒的常用替换物。

[0069] (实施例28-31)

[0070] 将市售的碘化亚铜(I)粉末(Wako一级，Wako Pure Chemical Industries)悬浮在100μL稀释的MEM溶液中，使悬浮液浓度为5质量％、1质量％、0.2质量％和0.1质量％。分别将悬浮液指定为实施例28、29、30和31，并评价每个悬浮液对抗猫杯状病毒和流感病毒的抗病毒活性。

[0071] (实施例32-35)

[0072] 将市售的氯化亚铜(I)粉末(Wako特级，Wako Pure Chemical Industries)悬浮在100μL稀释的MEM溶液中，使悬浮液浓度为2质量％、1质量％、0.5质量％和0.25质量％。分别将悬浮液指定为实例32、33、34和35，并评价每个悬浮液对抗猫杯状病毒和流感病毒的抗病毒活性。(抗病毒活性的评价方法)

[0073] 通过可以高准确度检测病毒的空斑(plaque)测定法，评价实施例28-35的抗病毒活性。具体地，将100μL的每种病毒溶液加入到100μL的每种测试样品溶液中，并加入到100μL稀释的MEM溶液中作为空白。使每种溶液在培养箱中于25℃下反应，同时以200rpm搅拌。在预定的搅拌期之后，加入1800μL 20mg/ml的肉汤蛋白，从而终止各样品中病毒与-2 -5
各种化合物的反应。用稀释的MEM溶液，将每个反应样品连续稀释至10 至10 (10步稀
释)。在反应之后，将100μL的各个猫杯状病毒样品溶液接种到汇合成片的(confluent)CrFK细胞上，并将100μL的各个流感病毒样品溶液接种到MDCK细胞上。在90分钟的吸
附期之后，将0.7％的琼脂培养基覆盖到每个平板上。在5％CO2培养箱中于34℃下，将用猫杯状病毒接种的平板培养48小时，将用流感病毒接种的平板培养64小时。随后，将细胞用福尔马林固定，并用亚甲蓝染色。对空斑进行计数，并计算形成空斑的单元中的病毒滴度(PFU/0.1ml，Log10)，作为抗病毒活性的测量值。结果在表3和4中给出。

[0074] (表3)

[0075]

[0076] 表3中的结果表明，碘化亚铜(I)粉末在短至1分钟的时间内，对包膜的流感病毒和非包膜的强(strong)猫杯状病毒均表现出足够高的病毒灭活活性。

[0077] (表4)

[0078]

[0079] 表4中的结果表明，氯化亚铜(I)粉末在短至1分钟的时间内，对包膜的流感病毒和非包膜的强(strong)猫杯状病毒均表现出足够高的病毒灭活活性。

[0080] 表3和表4中的结果表明，实施例28和29——由周期表中第4周期至第6周期和