技术领域
[0001] 本实用新型涉及生物实验设备技术领域，特别涉及一种细胞培养器。
相关背景技术
[0002] 体外细胞培养有多种方式，从不同角度分类，可以分为贴壁培养和悬浮培养、2D培养和3D培养，静态培养和动态培养等。相应的，各种细胞培养器具也是种类繁多，包括细胞培养皿、培养瓶、培养袋、发酵罐、高通量细胞培养器、微载体、细胞培养支架等等。由于培养条件等诸多因素的改变，同一种细胞在3D与2D细胞培养下，其形状、基因的表达及细胞侵袭等特性都有可能发生改变。除此之外，在两种不同的培养模式下，细胞在形状、培养花费、细胞间相互作用及细胞耐药性方面也都表现出巨大的差异。目前3D培养有细胞悬浮培养和三维支架培养两种常用模式。细胞悬浮培养操作简单，但用途较为单一，不能用于细胞的迁移研究。三维支架培养则是将细胞培养在具有空间结构的支架上。支架材料有天然和人工合成两种，天然材料存在提取困难、整体质量较难控制等缺点，人工合成材料生物相容性稍差，有可能引起细胞的排异反应。此外，目前市面上所能见到的细胞培养器的培养面都是平滑的(图1)，这样的培养面培养的细胞数量有限。如果希望获得更多的细胞就要选择更大或更多的细胞培养器，如此以来，自然增加了操作者的工作量和成本，且更多细胞培养器的使用增加了细胞污染或发生其他风险的几率。再者，很多贴壁培养的细胞培养完毕后要进行收集，但贴壁细胞“粘”在培养面表面。通常做法为去除培养液后加入胰酶消化掉细胞抓住培养面的“触角”，使细胞脱离培养面，但加入胰酶对于细胞具有一定的伤害作用。
具体实施方式
[0026] 下面将结合实施方式和附图对本实用新型的实施方案进行详细描述，但本实用新型的实施方式不限于此。
[0027] 实施例1
[0028] (1)本实用新型的结构
[0029] 一种细胞培养皿，如图5所示，包括皿体和皿盖。皿体的培养面呈多向波浪状曲面，表面具有同材质的细小颗粒物，细小颗粒物直径为60μm±20μm，间距为40μm。培养面表面还设置有温敏特性的水凝胶。波浪状曲面的曲面最高处(凸点)和最低处(凹点)的垂直距离等于2mm，凹点的曲率直径为40～60μm。
[0030] (2)本实用新型的制备
[0031] 1)称取聚N-异丙基丙烯酰胺(NIPAAm)、交联剂亚甲基丙烯酰胺(MBA)和异丙醇，配制含有质量体积比为55％的NIPAAm和含有质量体积比为0.5％的MBA的异丙醇溶液。
[0032] 2)将步骤1)制备的溶液取400uL加入培养皿中，将培养皿置于电子加速器中照射，每次照射剂量为30KGy，循环8次，总照射剂量为240KGy。采用普通培养皿作为对照组。
[0033] 3)用去离子水冲洗培养皿，除去未反应单体和溶剂，浸泡7天，每天换一次水。
[0034] 4)干燥培养皿，消毒灭菌，进行细胞接种实验，在培养皿上接种Vero细胞(丰晖生物)，以含有10％(v/v)新生牛血清的M199培养基培养，观察脱落效果，以验证高能电子接枝的培养皿能否重复使用。
[0035] 结果表明，37℃时Vero细胞在接枝温敏特性水凝胶的培养面上正常培养，低于32℃时Vero细胞从接枝温敏特性水凝胶的培养瓶培养面上脱落。使用本发明的培养皿培养得到比对照组数量更多的Vero细胞。
[0036] 实施例2
[0037] (1)本实用新型的结构
[0038] 一种细胞培养瓶，包括瓶体和瓶盖。瓶体的培养面呈单向波浪状曲面，培养面表面设置有深度为40～60μm的划痕，划痕之间间距不大于20μm。培养面表面还设置有温敏特性的水凝胶。波浪状曲面的曲面最高处(凸点)和最低处(凹点)的垂直距离等于2mm，凹点的曲率直径为40～60μm。
[0039] (2)本实用新型的制备
[0040] 1)称取聚N-异丙基丙烯酰胺(NIPAAm)、交联剂亚甲基丙烯酰胺(MBA)和异丙醇，配制含有质量体积比为55％的NIPAAm和含有质量体积比为0.5％的MBA的异丙醇溶液。
[0041] 2)将步骤1)制备的溶液取400uL加入培养瓶中，将培养瓶置于电子加速器中照射，每次照射剂量为30KGy，循环8次，总照射剂量为240KGy。采用普通培养瓶作为对照组。
[0042] 3)用去离子水冲洗培养瓶，除去未反应单体和溶剂，浸泡7天，每天换一次水。
[0043] 4)干燥培养瓶，消毒灭菌，进行细胞接种实验，在培养瓶中接种Vero细胞，以含有10％(v/v)新生牛血清的M199培养基培养，观察脱落效果。
[0044] 结果表明，37℃时Vero细胞在接枝温敏特性水凝胶的培养面上正常培养(图6)，低于32℃时Vero细胞从接枝温敏特性水凝胶的培养瓶培养面上脱落(图7)。使用本发明的培养瓶培养得到比对照组数量更多的Vero细胞。
[0045] 上述实施例为本实用新型较佳的实施方式，但本实用新型的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本实用新型的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本实用新型的保护范围之内。
