技术领域
[0001] 本实用新型涉及一种实验辅助装置,具体涉及一种用于磷酸钙沉淀的辅助装置。
相关背景技术
[0002] 磷酸钙沉淀法因为试剂易取得、价格便宜而被广泛用于瞬时转染和稳定转染及包装慢病毒的研究中。其原理是核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形成出现时,可使DNA黏附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA仅有1%-5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中进行稳定表达,基因转导的频率大约为10。传统的磷酸钙沉淀法的方法是首先将质粒DNA先与CaCl2溶液混匀后,再缓慢滴加到2×HBS缓冲液中,混匀,室温静置15 -30min,待形成细小颗粒沉淀,然后将沉淀逐滴均匀加入培养的细胞上。 为了得到颗粒度一致的细小颗粒,在溶液混匀过程中体积不能太大,滴加速度要尽可能缓慢匀速,因而此法用于大规模包装慢病毒时用时较长,且花费较大人工。针对这种情况,我们对磷酸钙沉淀法进行了改进,并有效提高了转染和病毒包装的效率。实用新型内容
[0003] 本实用新型为了弥补现有技术的缺陷,提供了一种可以方便人们使用的磷酸钙沉淀法溶液混匀的辅助装置。
[0004] 为解决上述技术问题,本实用新型采用如下技术手段:
[0005] 一种用于磷酸钙沉淀的辅助装置,包括塑料管本体;所述的塑料管本体由塑料管管头和塑料管管身组成,塑料管管身形状为圆锥形,塑料管管身设有滤透装置。
[0006] 作为优选,本实用新型更进一步的技术方案是:
[0007] 所述的滤透装置为设置在塑料管管身上通孔,所述的通孔为多个,均匀分布在塑料管管身上。
[0008] 所述的塑料管本体长度为65mm,塑料管本体的管壁厚度为0.7mm。
[0009] 所述的塑料管本体材质为生物无毒塑料聚丙烯。
[0010] 所述的塑料管管头的内直径为9mm,外直径10.4mm,长度为15mm。
[0011] 所述的塑料管管身上部设有圆形开口,下部为尖底,塑料管管身的长度为50mm、倾斜角度为87度。
[0012] 所述的通孔直径为1um。
[0013] 所述的塑料管本体总体密度为1.074±0.001 Kg/L。
[0014] 所述的塑料管本体可设置在一次性的10 ml移液器上方。
[0015] 本实用新型的有益效果是:在生物学研究,用于细胞转染、病毒包装等需要两种液体均匀混合的实验,可大大缩短操作时间,从而使实验更加方便、快捷、高效;塑料管材质为细胞培养常用塑料PP材质,对细胞无毒害作用,安全可靠。
具体实施方式
[0019] 下面结合实施例,进一步说明本实用新型。
[0020] 具体实施例1:
[0021] 参见图1、图2可知,本实用新型一种用于磷酸钙沉淀的辅助装置,包括塑料管本体1;所述的塑料管本体1由塑料管管头和塑料管管身组成,塑料管管身形状为圆锥形,塑料管管身设有滤透装置,滤透装置为设置在塑料管管身上通孔2,所述的通孔2为多个,均匀分布在塑料管管身上,塑料管本体1长度为65mm,塑料管本体1的管壁厚度为0.7mm,塑料管本体1材质为生物无毒塑料聚丙烯,塑料管管头的内直径为9mm,外直径10.4mm,长度为15mm,塑料管管身上部设有圆形开口,下部为尖底,塑料管管身的长度为50mm、倾斜角度为87度,通孔2直径为1um,塑料管本体1总体密度为1.074±0.001 Kg/L,塑料管本体1可设置在一次性的
10 ml移液器上方。
[0022] 具体实施例2:
[0023] 磷酸钙沉淀法转染293T细胞。
[0024] 首先用无内毒素的质粒大量抽提试剂盒进行目的质粒DNA抽提,将DNA(按实际需要)用无DNA酶和无内毒素的纯水溶解和稀释,并将稀释后的质粒按照一定比例加入到CaCl2溶液中,制成DNA- CaCl2溶液,使用移液器和10 ml的移液管吸取DNA-CaCl2溶液后,插入该塑料加样管头部,使其紧密贴合,将组合后的管子插入2×HBS溶液,注意塑料管身需全部没入液面以下,调整移液器力度至最低刻度,轻轻按压移液器按钮,直至DNA-CaCl2溶液滴完,整个过程需缓慢进行。滴加完成后将混合液体室温静置15-30 min,出现细小颗粒沉淀。使用移液器和10 ml的移液管吸取混合液体,同时轻轻按压移液器按钮,然后将液体慢慢滴加到293FT细胞的培养液中,直到滴加完成,将细胞放回培养箱内,丢弃移液管和塑料管。
[0025] 由于以上所述仅为本实用新型的具体实施方式,但本实用新型的保护不限于此,任何本技术领域的技术人员所能想到本技术方案技术特征的等同的变化或替代,都涵盖在本实用新型的保护范围之内。