技术领域
[0001] 本发明属于抑菌剂技术领域，具体涉及一种三元协同强化碳量子点及其制备方法与应用。
相关背景技术
[0002] 细菌、病毒等的致病性微生物对人类健康造成了巨大的影响。如何快速有效的消灭致病性微生物，关乎着人类社会的健康与发展。抗生素作为20世纪人类最伟大的发明之一，拯救了无数由细菌、病毒感染而岌岌可危的生命。然而由于病毒的快速进化以及抗生素的滥用，越来越多的细菌产生耐药性。抗生素的短板也逐渐显现出来，比如其本身的生物毒性，加速病原体产生耐药性等等。因此新型抗菌剂的开发迫在眉睫。
[0003] 碳量子点不仅具有碳材料毒性小、生物相容性好等优点，而且还拥有激发依赖的荧光发射、荧光可调的表面基团、发光范围可调、双光子吸收截面大、光稳定性好、无光闪烁、易于功能化、价廉、易大规模合成、环境友好等无可比拟的优势，在生物领域展现出巨大的优势和广阔的应用前景。因此，探究碳量子点的抑菌性及抑菌机制是一项十分有意义的研究，碳量子点有望代替传统抑菌材料用于细菌感染的治疗。
具体实施方式
[0035] 鉴于现有技术的缺陷，本案发明人经长期研究和大量实践，得以提出本发明的技术方案，下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0036] 具体的，作为本发明技术方案的一个方面，其所涉及的一种三元协同强化碳量子点的制备方法包括：使至少包含柠檬酸和/或柠檬酸衍生物、甲硫氨酸和/或甲硫氨酸衍生物、铜源的混合反应体系于180～300℃进行水热反应，制得三元协同强化碳量子点。
[0037] 本发明中三元协同强化碳量子点的制备流程示意图如图1所示。
[0038] 在一些优选实施方案中，所述制备方法具体包括：将柠檬酸和/或柠檬酸衍生物、甲硫氨酸和/或甲硫氨酸衍生物、铜源与溶剂混合并进行水热反应，之后采用乙酸和氨水调节所获溶液的pH值为2.5～6.5，再经搅拌、超声、离心、过滤、透析、干燥处理，制得三元协同强化碳量子点。
[0039] 进一步地，所述柠檬酸衍生物包括柠檬酸铵和/或柠檬酸钠，且不限于此。
[0040] 进一步地，所述甲硫氨酸衍生物包括N‑甲基‑D‑甲硫氨酸和/或N‑甲基‑L‑甲硫氨酸，且不限于此。
[0041] 进一步地，所述铜源包括葡萄糖酸铜、柠檬酸铜、乙酸铜中的任意一种或多种的组合，且不限于此。
[0042] 进一步地，所述溶剂包括水、乙酸、氨水中的任意一种或多种的组合，且不限于此。
[0043] 进一步地，所述铜源与柠檬酸和/或柠檬酸衍生物的质量比为1：100～20：100。
[0044] 进一步地，所述甲硫氨酸和/或甲硫氨酸衍生物与柠檬酸和/或柠檬酸衍生物的质量比为1：100～20：100。
[0045] 进一步地，所述水热反应的时间为2～10h。
[0046] 进一步地，所述搅拌处理的时间为10～30min。
[0047] 进一步地，所述超声处理的时间为10～30min。
[0048] 进一步地，所述离心处理的转速为8000～16000r/min，时间为10‑30min。
[0049] 进一步地，所述过滤处理为真空抽滤，所述真空抽滤的次数为2～4次。
[0050] 进一步地，所述透析处理采用的透析袋的分子量为1～5KD。
[0051] 进一步地，所述干燥处理的温度为65～85℃，时间为20～60h。
[0052] 本发明实施例的另一个方面还提供了前述的制备方法制得的三元协同强化碳量子点，所述三元协同强化碳量子点中的氮原子、硫原子在碳量子点表面形成活性位点，并与铜离子形成配位。
[0053] 进一步地，所述三元协同强化碳量子点的组成元素包括Cu、S、N、C、H及O。
[0054] 进一步地，所述三元协同强化碳量子点的粒径大小为2～20nm。
[0055] 进一步地，所述三元协同强化碳量子点在水中的溶解度为10～100mg/mL。
[0056] 进一步地，所述三元协同强化碳量子点中氮原子的含量为0.5～10wt％，硫原子的含量为0.5～10wt％，铜离子的含量为1.0～10wt％。
[0057] 本发明实施例的另一个方面还提供了前述的三元协同强化碳量子点在制备生物抗菌制剂中的用途。
[0058] 进一步地，所述生物抗菌制剂抑制和/或灭杀的细菌包括链球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌中的任意一种或多种的组合，且不限于此。
[0059] 本发明中实验结果显示，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在三元协同强化碳量子点中生长24h后，与置于未添加三元协同强化碳量子点的溶液中相比，抑制率仍能达到92％以上，从而表现出优异的抑菌性。与置于未掺杂碳量子点的溶液中相比，抑菌率提高了1～3倍。
[0060] 链球菌和肺炎球菌在三元协同强化碳量子点中生长24h后，与置于未添加三元协同强化碳量子点的溶液中相比，抑制率仍能达到92％以上。与置于未掺杂碳量子点的溶液中相比，抑菌率提高了1～4倍。
[0061] 厌氧菌和铜绿假单胞菌在三元协同强化碳量子点中生长24h后，与置于未添加三元协同强化碳量子点的溶液中相比，抑制率仍能达到92％以上。与置于未掺杂碳量子点的溶液中相比，抑菌率提高了2～6倍。
[0062] 本发明实施例的另一个方面还提供了一种生物抗菌制剂，其至少包括前述的三元协同强化碳量子点。
[0063] 本发明实施例的另一个方面还提供了一种抗菌剂的使用方法，其包括：将作为抗菌剂的前述的三元协同强化碳量子点溶于水，之后喷洒或涂布于细菌周围。
[0064] 下面结合若干优选实施例及附图对本发明的技术方案做进一步详细说明，本实施例在以发明技术方案为前提下实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
[0065] 下面所用的实施例中所采用的实验材料，如无特殊说明，均可由常规的生化试剂公司购买得到。
[0066] 对比例1
[0067] 制备过程为：
[0068] (1)取柠檬酸2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min，之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到柠檬酸碳量子点。
[0069] (2)随后将一定量的柠檬酸碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的柠檬酸碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图4所示。
[0070] 对比例2
[0071] 制备过程为：
[0072] (1)取柠檬酸2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min，之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到柠檬酸碳量子点。
[0073] (2)随后将一定量的柠檬酸碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将链球菌和肺炎球菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的柠檬酸碳量子点下链球菌和肺炎球菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图5所示。
[0074] 对比例3
[0075] 制备过程为：
[0076] (1)取柠檬酸2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min，之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到柠檬酸碳量子点。
[0077] (2)随后将一定量的柠檬酸碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将厌氧菌和铜绿假单胞菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的柠檬酸碳量子点下厌氧菌和铜绿假单胞菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图6所示。
[0078] 对比例4
[0079] 制备过程为：
[0080] (1)取柠檬酸2g和甲硫氨酸0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理
10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min，之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到柠檬酸碳量子点。
[0081] (2)随后将一定量的柠檬酸碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的柠檬酸碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图7所示。
[0082] 对比例5
[0083] 制备过程为：
[0084] (1)取柠檬酸2g和葡萄糖酸铜0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min，之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到柠檬酸碳量子点。
[0085] (2)随后将一定量的柠檬酸碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的柠檬酸碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图8所示。
[0086] 对比例6
[0087] 制备过程为：
[0088] (1)取甲硫氨酸0.2g，葡萄糖酸铜0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min。之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到甲硫氨酸基碳量子点。
[0089] (2)随后将一定量的甲硫氨酸基碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养
24h后利用平板计数法测量不同浓度的甲硫氨酸基碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图9所示。
[0090] 实施例1
[0091] 抗菌剂制备过程为：
[0092] (1)取柠檬酸2g，甲硫氨酸0.2g，葡萄糖酸铜0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min。
[0093] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到三元协同强化碳量子点，溶解度情况如2所示(可以看出本实施例制备的三元协同强化碳量子点具有很好的水溶性)，形貌如图3所示。
[0094] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图10所示。
[0095] 实施例2
[0096] 抗菌剂制备过程为：
[0097] (1)取柠檬酸2g，甲硫氨酸0.2g，葡萄糖酸铜0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌1vmin后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min。
[0098] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到三元协同强化碳量子点，溶解度情况如2所示，形貌如图3所示。
[0099] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将链球菌和肺炎球菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下链球菌和肺炎球菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图11所示。
[0100] 实施例3
[0101] 抗菌剂制备过程为：
[0102] (1)取柠檬酸2g，甲硫氨酸0.2g，葡萄糖酸铜0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min。
[0103] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到三元协同强化碳量子点，溶解度情况如2所示，形貌如图3所示。
[0104] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将厌氧菌和铜绿假单胞菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下厌氧菌和铜绿假单胞菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图12所示。
[0105] 实施例4
[0106] 抗菌剂制备过程为：
[0107] (1)取柠檬酸2g，甲硫氨酸0.2g，葡萄糖酸铜0.1g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min。
[0108] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到三元协同强化碳量子点。
[0109] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图13所示。
[0110] 实施例5
[0111] 抗菌剂制备过程为：
[0112] (1)取柠檬酸2g，甲硫氨酸0.1g，葡萄糖酸铜0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min。
[0113] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到三元协同强化碳量子点。
[0114] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图14所示。
[0115] 实施例6
[0116] 抗菌剂制备过程为：
[0117] (1)取柠檬酸2g，甲硫氨酸0.2g，葡萄糖酸铜0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于240℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min。
[0118] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到三元协同强化碳量子点。
[0119] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图15所示。
[0120] 实施例7
[0121] 抗菌剂制备过程为：
[0122] (1)取柠檬酸2g，甲硫氨酸0.2g，葡萄糖酸铜0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应2h。待反应结束后，调整溶液pH值为4后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为10000r/min。
[0123] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为2KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为80℃，得到三元协同强化碳量子点。
[0124] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图16所示。
[0125] 实施例8
[0126] 抗菌剂制备过程为：
[0127] (1)取柠檬酸2g，甲硫氨酸0.2g，葡萄糖酸铜0.2g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于200℃温度下反应6h。待反应结束后，调整溶液pH值为6后将溶液搅拌15min后再超声处理15min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为12000r/min。
[0128] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为3KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为75℃，得到三元协同强化碳量子点。
[0129] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图17所示。
[0130] 实施例9
[0131] (1)取柠檬酸铵2g，N‑甲基‑D‑甲硫氨酸0.02g，葡萄糖酸铜0.02g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于180℃温度下反应10h。待反应结束后，调整溶液pH值为6.5后将溶液搅拌30min后再超声处理30min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为16000r/min。
[0132] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为1KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为85℃，得到三元协同强化碳量子点。
[0133] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图18所示。
[0134] 实施例10
[0135] (1)取柠檬酸钠2g，N‑甲基‑L‑甲硫氨酸0.4g，葡萄糖酸铜0.4g溶解于60mL去离子水中，再转移至单口烧瓶内，于300℃温度下反应2h。待反应结束后，调整溶液pH值为2.5后将溶液搅拌10min后再超声处理10min，后进行过滤和离心处理，离心过程中转速为8000r/min。
[0136] (2)之后进行透析处理，透析袋分子量为5KD。最后将透析液放入真空干燥箱中干燥处理，温度为85℃，得到三元协同强化碳量子点。
[0137] (3)随后将一定量的三元协同强化碳量子点加入至去离子水中，配置浓度为10，20，30，40mg/L的溶液。将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌溶液与上述碳量子点溶液混合，在培养24h后利用平板计数法测量不同浓度的三元协同强化碳量子点下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的数量变化，对比细菌自由生长后得到细菌的抑制率，如图19所示。
[0138] 结果显示：
[0139] (1)对比对比例1、对比例4、对比例5、对比例6和实施例1中所制备的碳量子点对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率进行统计发现，如图4所示，在浓度为10，20，30，40mg/L的浓度下，空白碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为21％，26％，29％和32％，对大肠杆菌的抑制率分别为24％，29％，33％和35％。
[0140] 经过氮和硫掺杂后，如图7所示，氮硫掺杂碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为51％，58％，64％和72％，分别提高了1.4，1.23，1.21和1.25倍；对大肠杆菌的抑制率分别为48％，57％，62％和69％，分别提高了1.0，0.96，0.88和0.97倍。
[0141] 经过铜掺杂后，如图8所示，铜掺杂碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为58％，66％，72％和79％，分别提高了1.76，1.54，1.48和1.47倍；对大肠杆菌的抑制率分别为52％，63％，69％和75％，分别提高了1.17，1.17，1.09和1.14倍。
[0142] 在缺少柠檬酸碳源的基础上掺杂氮硫铜后，如图9所示，氮硫铜协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为62％，69％，77％和82％，分别提高了1.95，1.65，1.66和1.56倍；对大肠杆菌的抑制率分别为57％，68％，72％和79％，分别提高了1.38，1.34，1.18和1.25倍。
[0143] 以柠檬酸为碳源，经过铜氮硫协同强化后，如图10所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为81％，88％，93％和98％，分别提高了2.86，2.38，2.21和2.06倍；对大肠杆菌的抑制率分别为84％，91％，96％和99％，分别提高了2.5，2.14，1.91和
1.83倍。
[0144] (2)对比对比例2和实施例2中所制备的碳量子点对链球菌和肺炎球菌的抑菌率进行统计发现，如图5所示，在浓度为10，20，30，40mg/L的浓度下，空白碳量子点对链球菌的抑制率分别为18％，21％，26％和28％，对肺炎球菌的抑制率分别为22％，27％，32％和36％。
[0145] 经过铜氮硫协同强化后，如图11所示，三元协同强化碳量子点对链球菌的抑制率分别为76％，85％，90％和96％，分别提高了3.22，3.05，2.43和2.43倍；对肺炎球菌的抑制率分别为72％，83％，89％和95％，分别提高了2.27，2.07，1.78和1.64倍。
[0146] (3)对比对比例3和实施例3中所制备的碳量子点对厌氧菌和铜绿假单胞菌的抑菌率进行统计发现，如图6所示，在浓度为10，20，30，40mg/L的浓度下，空白碳量子点对厌氧菌的抑制率分别为15％，19％，26％和29％，对铜绿假单胞菌的抑制率分别为12％，18％，24％和31％。
[0147] 经过铜氮硫协同强化后，如图12所示，三元协同强化碳量子点对厌氧菌的抑制率分别为75％，86％，92％和97％，分别提高了4.0，3.52，2.54和2.34倍；对铜绿假单胞菌的抑制率分别为78％，88％，93％和98％，分别提高了5.5，3.89，2.88和2.16倍。
[0148] (4)对比实施例1和4中所制备的三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率进行统计发现，如图10所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为81％，88％，93％和98％，对大肠杆菌的抑制率分别为84％，91％，96％和99％。
[0149] 随着葡萄糖酸铜的含量下降，如图13所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为72％，81％，88％和93％，分别降低了9％，7％，5％和5％；对大肠杆菌的抑制率分别为74％，83％，89％和94％，分别降低了10％，8％，10％和5％。
[0150] (5)对比实施例1和5中所制备的三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率进行统计发现，如图10所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为81％，88％，93％和98％，对大肠杆菌的抑制率分别为84％，91％，96％和99％。
[0151] 随着甲硫氨酸的含量下降，如图14所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为68％，77％，83％和92％，分别降低了13％，11％，10％和6％；对大肠杆菌的抑制率分别为76％，81％，86％和93％，分别降低了8％，10％，10％和6％。
[0152] (6)对比实施例1和6中所制备的三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率进行统计发现，如图10所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为81％，88％，93％和98％，对大肠杆菌的抑制率分别为84％，91％，96％和99％。
[0153] 随着反应温度的升高，如图15所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为78％，85％，89％和94％，分别降低了3％，3％，4％和5％；对大肠杆菌的抑制率分别为74％，81％，85％和95％，分别降低了10％，10％，11％和4％。
[0154] (7)对比实施例1和7中所制备的三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率进行统计发现，如图10所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为81％，88％，93％和98％，对大肠杆菌的抑制率分别为84％，91％，96％和99％。
[0155] 随着反应时间的下降，如图16所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为75％，83％，88％和93％，分别降低了6％，5％，5％和5％；对大肠杆菌的抑制率分别为72％，79％，84％和92％，分别降低了12％，12％，12％和7％。
[0156] (8)对比实施例1和8中所制备的三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率进行统计发现，如图10所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为81％，88％，93％和98％，对大肠杆菌的抑制率分别为84％，91％，96％和99％。
[0157] 随着反应后提取参数的变化，如图17所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为72％，79％，85％和96％，分别降低了9％，9％，8％和2％；对大肠杆菌的抑制率分别为75％，83％，91％和97％，分别降低了9％，8％，5％和2％。
[0158] (9)对比实施例1和9中所制备的三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率进行统计发现，如图10所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为81％，88％，93％和98％，对大肠杆菌的抑制率分别为84％，91％，96％和99％。
[0159] 随着反应参数的变化，如图18所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为69％，75％，81％和89％，分别降低了12％，13％，12％和10％；对大肠杆菌的抑制率分别为65％，74％，83％和87％，分别降低了19％，17％，13％和12％。
[0160] (10)对比实施例1和10中所制备的三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率进行统计发现，如图10所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为81％，88％，93％和98％，对大肠杆菌的抑制率分别为84％，91％，96％和99％。
[0161] 随着反应参数的变化，如图19所示，三元协同强化碳量子点对金黄色葡萄球菌的抑制率分别为66％，74％，82％和87％，分别降低了15％，14％，11％和11％；对大肠杆菌的抑制率分别为67％，76％，81％和85％，分别降低了17％，15％，15％和14％。
[0162] 此外，本案发明人还参照前述实施例，以本说明书述及的其它原料、工艺操作、工艺条件进行了试验，并均获得了较为理想的结果。
[0163] 应当理解，本发明的技术方案不限于上述具体实施案例的限制，凡是在不脱离本发明宗旨和权利要求所保护的范围情况下，根据本发明的技术方案做出的技术变形，均落于本发明的保护范围之内。
