[0001] 本发明属于生物活性制品制备技术领域，具体涉及一种从北极甜虾加工副产物中制备的北极甜虾油。

[0002] 北极甜虾主要产于北冰洋和北大西洋海域，极地独特的低温海洋环境造就了虾资源特殊的营养素轮廓，其中富含的多种重要功效因子被食品、生物和医药等行业领域广泛关注。目前，北极甜虾年捕获量约30万吨，目前我国北极甜虾年加工量逾2万吨，其加工过程约产生60％的副产资源(如虾头、壳等)。如何对上述北极甜虾加工副产资源实施有效的定向化和高值化开发利用，是摆在北极甜虾资源化利用面前的重大难题，特别是在重视环保和可持续发展的今天，显得更为重要。然而目前我国对北极甜虾油的研究与生产还处在起步阶段，鲜见有关利用北极甜虾加工副产物制备北极甜虾油的报道。

[0003] 中国发明专利(ZL202210497226.1)公开了一种利用北极甜虾虾壳制备多肽钼螯合物的方法，该发明通过采用三种不同酶的复配配合酶激活剂的添加，从而提高了虾壳中多肽的提取率和螯合率，实现了对北极甜虾虾壳中蛋白资源的利用，但该发明并未报道对脂质的利用。中国发明专利(ZL201810966551.1)公开了一种利用中性蛋白酶提取纯化虾壳和蟹壳中虾青素的方法，其中包含了利用北极甜虾虾壳制备虾青素的方法，报道的虾青素得率为145μg/g，虾青素粗提物纯度为1.12mg/g，纯化后虾青素含量为92％，但该发明也没有对北极甜虾副产中的复合脂质进行综合化利用。在发明人前期实验过程中，通过对北极甜虾副产资源的营养素轮廓进行分析发现，其中富含约1％(湿重)的脂质，具备深度开发和利用的潜力。

[0004] 申请号为201410547705.5的中国发明专利(专利名称：一种北极甜虾虾油快速提取方法)公开了一种北极甜虾中虾油的快速提取方法。该方法将新鲜捕捞后的北极甜虾加热灭菌，沥干水分后匀浆，加入一定体积的正己烷萃取一定时间，对萃取液进行旋转蒸发后获得北极甜虾虾油。该方法以北极甜虾整虾虾糜为原料，通过正己烷进行提取，一方面造成北极甜虾可食部分资源的浪费，另一方面北极甜虾整虾虾糜中含有大量的蛋白等成分，未经过分离精制，虾油产品组成较为粗放。

[0005] 因此，鉴于北极甜虾副产物种丰富的脂类资源，本发明利用建立一种利用北极甜虾加工副产资源制备北极甜虾油的方法，综合开发北极甜虾副产资源中丰富的脂肪酸，以及虾青素等重要功能伴随物，为北极甜虾副产资源的高值化开发与利用提供一种新途径。

[0026] 本发明制备得到的北极甜虾油中磷脂含量超过30％，虾青素含量达250mg/kg。从制备流程参数可以看出，采用本发明方法制备得到的北极甜虾油产品在色泽、透明度、流动性和腥味方面，较粗北极甜虾油均有非常大程度的改善，可较好的满足产品的应用需求。

[0027] 为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。

[0028] 实施例1

[0029] 一种利用加工副产物制备北极甜虾油的方法，包括如下步骤：

[0030] (1)原料预处理：将北极甜虾加工副产物在8％的柠檬酸溶液中进行浸泡解冻，然后进行冷冻干燥，后经粉碎处理，得到粒径为10～80目的虾粉；

[0031] (2)粗提取：向步骤(1)得到的北极甜虾粉中加入体积比为1:8的无水乙醇溶液，提取次数为3次，提取时间为0.5h，提取结束后经离心的方式收集提取液和残渣，提取液经减压浓缩得到粗北极甜虾油；

[0032] (3)一次精制：向步骤(2)得到的粗北极甜虾油中加入体积比为1：5的精制溶剂，在40℃条件下充分搅拌溶解；然后冷却到20℃，静置0.5h，经离心，得到的清液；然后将清液经减压浓缩得到一次精制北极甜虾油；其中所述的精制溶剂为含有体积分数为40％的乙酸乙酯‑乙醇溶液。

[0033] (4)二次精制：向步骤(3)得到的一次精制北极甜虾油中加入质量分数为10％的去离子水，然后在真空度‑0.06～0.09MPa、80℃条件下充分浓缩，得到浓缩液，浓缩液再经离心处理，得到澄清油相即为北极甜虾油产品。

[0034] 本发明实施例1制备的北极甜虾油的技术指标如下表1。

[0035] 表1：北极甜虾油的技术指标表

[0036]

[0037] 表1数据显示，本发明制备得到的北极甜虾虾油最终产品的得率为9.1％，产业化可行性高。

[0038] 为了进一步评价本发明制备的北极甜虾油的应用开发价值，分别对实施例1制备的最终北极甜虾油中的脂肪酸组成和虾青素组成进行了定性定量表征。

[0039] (1)脂肪酸组成分析：采用气相色谱法对实施例1制备的最终北极甜虾油中的脂肪酸进行定性定量表征，经峰面积归一化处理，得到其脂肪酸组成及相对含量。

[0040] 结果表明本发明利用北极甜虾加工副产物制备的北极甜虾油中饱和脂肪酸的相对含量约在28％，其中棕榈酸(C 16:0)含量最高；单不饱和脂肪酸相对含量约为30％，其中油酸(C 18:1)含量最高；多不饱和脂肪酸相对含量约为42％，其中EPA(C20:5)和DHA(C22:6)总量之和约为24％，可作为良好的多不饱和脂肪酸膳食补充源。

[0041] (2)虾青素组成分析：

[0042] 采用液质联用色谱对实施例1制备的最终北极甜虾油中的虾青素组成进行定性定量表征，经峰面积归一化处理，得到其中虾青素的组成及相对含量如图2所示。由分析结果可知，本发明制备的北极甜虾油中游离态虾青素约占4％，酯化态虾青素约占总虾青素的96％，其中虾青素单酯约占总虾青素的20％，虾青素双酯约占总虾青素的76％。该以酯化态为主要形态的虾青素结构组成较游离态表现出更好的稳定性和生物学效价。

[0043] 应用例1：

[0044] 称取100份水、5份明胶、7份蛋白胨、10份水解动物蛋白、6份奶粉、4份葡萄糖、7份麦芽糖、6份白砂糖，完全水化后在60℃条件下加热溶解，并搅拌至均匀，制成水系基料。然后向水系基料中添加15份实施例1中制备的粗北极甜虾油，在60℃条件下充分均质至体系混合均匀。然后升温至95±5℃，期间保持搅拌或均质。在95±5℃条件下静置保温20分钟后，降温至室温，即得到富含粗北极甜虾油的宠物营养膏。

[0045] 应用例2：

[0046] 称取100份水、5份明胶、7份蛋白胨、10份水解动物蛋白、6份奶粉、4份葡萄糖、7份麦芽糖、6份白砂糖，完全水化后在60℃条件下加热溶解，并搅拌至均匀，制成水系基料。然后向水系基料中添加15份实施例1中制备的一次精制北极甜虾油，在60℃条件下充分均质至体系混合均匀。然后升温至95±5℃，期间保持搅拌或均质。在95±5℃条件下静置保温20分钟后，降温至室温，即得到富含一次精制北极甜虾油的宠物营养膏。

[0047] 应用例3：

[0048] 称取100份水、5份明胶、7份蛋白胨、10份水解动物蛋白、6份奶粉、4份葡萄糖、7份麦芽糖、6份白砂糖，完全水化后在60℃条件下加热溶解，并搅拌至均匀，制成水系基料。然后向水系基料中添加15份实施例1中制备的二次精制北极甜虾油，在60℃条件下充分均质至体系混合均匀。然后升温至95±5℃，期间保持搅拌或均质。在95±5℃条件下静置保温20分钟后，降温至室温，即得到富含二次精制北极甜虾油的宠物营养膏。

[0049] 应用测试例1：适口性评价

[0050] 分别添加实施例1中制备的粗北极甜虾油、一次精制北极甜虾油和二次精制北极甜虾油产品，并对制备的产品进行适口性测试。采用国际通用的“双盆法”进行适口性比较测定，以评价实施例1中制备的粗北极甜虾油、一次精制北极甜虾油和二次精制北极甜虾油在适口性方面的差异性。选取成年猫18只作为试验动物，平均分成两组，每组体重、雌雄尽量保持平衡，试验期1天，早晚各喂食一餐，每餐喂食持续时间为20分钟，期间保证充足的饮水供应。每组投食50g，试验喂食结束后，通过称重计算摄食量，并按照采食率(％)＝摄食量/投食量×100％计算采食率，结果如下表2所示。

[0051] 表2：应用例1、应用例2、应用例3制备的宠物营养膏适口性评价结果表[0052]

[0053] 从上述数据可以看出，添加了本发明实施例1中制备的二次精制北极甜虾油的营养膏采食率显著高于添加粗北极甜虾油和一次精制北极甜虾油的试验组，说明本发明采用的方法可以显著改善制备的北极甜虾油的风味和适口性。综上，本测试例试验结果表明：经过两次精制后制备的北极甜虾油产品的适口性得到了显著改善。说明本发明采用二次精制的方法制备北极甜虾油，可以有效脱除不良的风味物质，显著提升制备的营养膏的适口性，推广应用价值大。

[0054] 应用测试例2：改善毛发效果

[0055] 测试方法：选取12只试验小鼠(雄性ICR小鼠，体重22g±2g)，随机分成两组，饲料和水自由摄取，适应喂养一周，实验前，禁食不禁水10h。试验组小鼠每天分别灌胃实施例1制备的二次精制北极甜虾油，灌胃剂量均为10mL/kg·体重。对照组灌胃相同剂量的玉米油，灌胃结束后正常进食进水。灌胃两周后对比观察两组试验小鼠的毛发情况，结果如图3所示。结果显示，灌胃二次精制北极甜虾油试验组的小鼠毛发顺滑光亮，而对照组小鼠的毛发稀疏有脱落现象，毛色发黄暗沉。说明本发明制备的北极甜虾油具有良好的改善毛发的功效。

[0056] 尽管通过参考附图并结合优选实施例的方式对本发明进行了详细描述，但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换，而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应所述以权利要求的保护范围为准。