[0001] 本发明属于食品加工技术领域，具体地，涉及一种植物甾醇食用油及其制备方法。

[0002] 植物甾醇是一种主要存在于植物、豆类、坚果和谷物中，经过物理提取而得到的一种固醇类物质，具有降低胆固醇含量，抗菌，保护心血管健康的效果，被誉为“生命的钥匙”。研究表明，植物甾醇在肠道内可以与胆固醇竞争，减少肠道对胆固醇的吸收，对高血脂人群具有很好的降脂效果，并且还可以通过改善癌症的免疫反应识别、影响激素依赖性内分泌肿瘤生长以及通过甾醇生物合成调节来实现抗肿瘤反应。

[0003] 提取出的植物甾醇容易结块，不易储存，并且在食品中分散不均，不能表现出明显的降低胆固醇的作用和抗癌效果。而存在于天然植物油中的植物甾醇又难以维持其稳定性，在高温和氧气的条件下，易被氧化，在传统的制备工艺中，包括植物甾醇在内的营养成分由于加工步骤而造成大量的损失。

[0029] 下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

[0030] 实施例1

[0031] 一种多糖凝胶的制备方法，包括以下步骤：

[0032] 将1.0g羟丙甲基纤维素在70℃下溶解在去50mL离子水中，以30rpm的速率搅拌，制得羟丙甲基纤维素水溶液，备用；

[0033] 再将0.2g亚麻籽胶在70℃下溶解在50mL去离子水中，以30rpm的速率搅拌，制得亚麻籽胶溶液，备用；

[0034] 将亚麻籽胶溶液与羟丙甲基纤维素水溶液在均质器中以12000rpm的速率充气3分钟后，储存于‑20℃下冷冻24小时，再使用冷冻干燥机冷冻干燥24小时，即得多糖凝胶。

[0035] 实施例2

[0036] 一种多糖凝胶的制备方法，包括以下步骤：

[0037] 将2.0g羟丙甲基纤维素在70℃下溶解在去50mL离子水中，以30rpm的速率搅拌，制得羟丙甲基纤维素水溶液，备用；

[0038] 再将0.3g亚麻籽胶在70℃下溶解在50mL去离子水中，以30rpm的速率搅拌，制得亚麻籽胶溶液，备用；

[0039] 将亚麻籽胶溶液与羟丙甲基纤维素水溶液在均质器中以12000rpm的速率充气3分钟后，储存于‑20℃下冷冻24小时，再使用冷冻干燥机冷冻干燥24小时，即得多糖凝胶。

[0040] 实施例3

[0041] 一种多糖凝胶的制备方法，包括以下步骤：

[0042] 将3.0g羟丙甲基纤维素在70℃下溶解在去50mL离子水中，以30rpm的速率搅拌，制得羟丙甲基纤维素水溶液，备用；

[0043] 再将0.4g亚麻籽胶在70℃下溶解在50mL去离子水中，以30rpm的速率搅拌，制得亚麻籽胶溶液，备用；

[0044] 将亚麻籽胶溶液与羟丙甲基纤维素水溶液在均质器中以12000rpm的速率充气3分钟后，储存于‑20℃下冷冻24小时，再使用冷冻干燥机冷冻干燥24小时，即得多糖凝胶。

[0045] 实施例4

[0046] 一种植物甾醇食用油，包括以下质量份原料：0.05份大豆蛋白、0.1份实施例1制备的多糖凝胶、3份复合植物甾醇、0.01份抗氧化剂和90份玉米胚芽调和油。

[0047] 一种植物甾醇食用油的制备方法，包括以下步骤：

[0048] 将β‑谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇以12：6：1的质量比混合，在4℃下储存，即得复合植物甾醇，备用。

[0049] 由叔丁基对苯二酚、柠檬酸和维生素C以3：1：1的质量比混合，制得抗氧化剂，备用。

[0050] 将玉米胚芽原料使用双层振动筛筛选10分钟，去除玉米粉、皮屑等杂质；随后使用烘干机以1.5℃/分钟的升温速率升温至60℃，干燥15分钟，再使用压胚机将其压成0.3mm的薄片，使用蒸炒机在70℃下加热50分钟后置于螺旋榨油机进行压榨，得到玉米胚芽毛油；

[0051] 将玉米胚芽毛油与己烷以100：30的质量比混合，在30℃和150rpm的条件下搅拌30分钟后，加入10g氢氧化钾，在50℃和150rpm条件下搅拌60分钟，随后在5000×g下离心15分钟，即得玉米胚芽油，在4℃下保存备用。

[0052] 将玉米胚芽油、白术油、芝麻油和橄榄油按照配方的质量比混合，在40℃下以180rpm的速率搅拌30分钟，将混合油样放置在4℃冰箱中避光保存，即得玉米胚芽调和油。

[0053] 将复合植物甾醇溶解于无水乙醇中，在45℃下以30rpm的速率搅拌30分钟，随后将大豆蛋白与多糖凝胶加入，继续搅拌30分钟，冷却至室温后，使用0.1mo l/L NaOH或0.1mo l/L HCl将pH调节至6.3，加入抗氧化剂和玉米胚芽调和油，在50℃下以30rpm的速率搅拌50分钟，即得植物甾醇食用油。

[0054] 实施例5

[0055] 一种植物甾醇食用油，包括以下质量份原料：0.08份大豆蛋白、0.3份实施例2制备的多糖凝胶、4份复合植物甾醇、0.015份抗氧化剂和95份玉米胚芽调和油。

[0056] 一种植物甾醇食用油的制备方法，包括以下步骤：

[0057] 将β‑谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇以13：6：1的质量比混合，在4℃下储存，即得复合植物甾醇，备用。

[0058] 由叔丁基对苯二酚、柠檬酸和维生素C以3：1：1的质量比混合，制得抗氧化剂，备用。

[0059] 将玉米胚芽原料使用双层振动筛筛选10分钟，去除玉米粉、皮屑等杂质；随后使用烘干机以1.5℃/分钟的升温速率升温至60℃，干燥15分钟，再使用压胚机将其压成0.3mm的薄片，使用蒸炒机在70℃下加热50分钟后置于螺旋榨油机进行压榨，得到玉米胚芽毛油；

[0060] 将玉米胚芽毛油与己烷以100：50的质量比混合，在50℃和200rpm的条件下搅拌30分钟后，加入20g氢氧化钾，在50℃和150rpm条件下搅拌60分钟，随后在5000×g下离心15分钟，即得玉米胚芽油，在4℃下保存备用。

[0061] 将玉米胚芽油、白术油、芝麻油和橄榄油按照配方的质量比混合，在40℃下以180rpm的速率搅拌30分钟，将混合油样放置在4℃冰箱中避光保存，即得玉米胚芽调和油。

[0062] 将复合植物甾醇溶解于无水乙醇中，在45℃下以30rpm的速率搅拌30分钟，随后将大豆蛋白与多糖凝胶加入，继续搅拌30分钟，冷却至室温后，使用0.1mo l/L NaOH或0.1mo l/L HCl将pH调节至6.3，加入抗氧化剂和玉米胚芽调和油，在50℃下以30rpm的速率搅拌50分钟，即得植物甾醇食用油。

[0063] 实施例6

[0064] 一种植物甾醇食用油，包括以下质量份原料：0.1份大豆蛋白、0.5份实施例3制备的多糖凝胶、5份复合植物甾醇、0.02份抗氧化剂和100份玉米胚芽调和油。

[0065] 一种植物甾醇食用油的制备方法，包括以下步骤：

[0066] 将β‑谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇以14：6：1的质量比混合，在4℃下储存，即得复合植物甾醇，备用。

[0067] 由叔丁基对苯二酚、柠檬酸和维生素C以3：1：1的质量比混合，制得抗氧化剂，备用。

[0068] 将玉米胚芽原料使用双层振动筛筛选10分钟，去除玉米粉、皮屑等杂质；随后使用烘干机以1.5℃/分钟的升温速率升温至60℃，干燥15分钟，再使用压胚机将其压成0.3mm的薄片，使用蒸炒机在70℃下加热50分钟后置于螺旋榨油机进行压榨，得到玉米胚芽毛油；

[0069] 将玉米胚芽毛油与己烷以100：80的质量比混合，在70℃和350rpm的条件下搅拌30分钟后，加入30g氢氧化钾，在50℃和150rpm条件下搅拌60分钟，随后在5000×g下离心15分钟，即得玉米胚芽油，在4℃下保存备用。

[0070] 将玉米胚芽油、白术油、芝麻油和橄榄油按照配方的质量比混合，在45℃下以180rpm的速率搅拌30分钟，将混合油样放置在4℃冰箱中避光保存，即得玉米胚芽调和油。

[0071] 将复合植物甾醇溶解于无水乙醇中，在45℃下以30rpm的速率搅拌30分钟，随后将大豆蛋白与多糖凝胶加入，继续搅拌30分钟，冷却至室温后，使用0.1mo l/L NaOH或0.1mo l/L HCl将pH调节至6.3，加入抗氧化剂和玉米胚芽调和油，在60℃下以30rpm的速率搅拌50分钟，即得植物甾醇食用油。

[0072] 对比例1

[0073] 一种植物甾醇食用油，包括以下质量份原料：0.05份大豆蛋白、0.1份实施例1制备的多糖凝胶、3份复合植物甾醇、0.01份抗氧化剂和90份玉米胚芽油。

[0074] 一种植物甾醇食用油的制备方法，包括以下步骤：

[0075] 将β‑谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇以12：6：1的质量比混合，在4℃下储存，即得复合植物甾醇，备用。

[0076] 由叔丁基对苯二酚、柠檬酸和维生素C以3：1：1的质量比混合，制得抗氧化剂，备用。

[0077] 将玉米胚芽原料使用双层振动筛筛选10分钟，去除玉米粉、皮屑等杂质；随后使用烘干机以1.5℃/分钟的升温速率升温至60℃，干燥15分钟，再使用压胚机将其压成0.3mm的薄片，使用蒸炒机在70℃下加热50分钟后置于螺旋榨油机进行压榨，得到玉米胚芽毛油；

[0078] 将玉米胚芽毛油与己烷以100：30的质量比混合，在30℃和150rpm的条件下搅拌30分钟后，加入10g氢氧化钾，在50℃和150rpm条件下搅拌60分钟，随后在5000×g下离心15分钟，即得玉米胚芽油，在4℃下保存备用。

[0079] 将复合植物甾醇溶解于无水乙醇中，在45℃下以30rpm的速率搅拌30分钟，随后将大豆蛋白与多糖凝胶加入，继续搅拌30分钟，冷却至室温后，使用0.1mo l/L NaOH或0.1mo l/L HCl将pH调节至6.3，加入抗氧化剂和玉米胚芽油，在50℃下以30rpm的速率搅拌50分钟，即得植物甾醇食用油。

[0080] 对比例2

[0081] 一种植物甾醇食用油，包括以下质量份原料：3份复合植物甾醇、0.01份抗氧化剂和90份玉米胚芽油。

[0082] 一种植物甾醇食用油的制备方法，包括以下步骤：

[0083] 将β‑谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇以12：6：1的质量比混合，在4℃下储存，即得复合植物甾醇，备用。

[0084] 由叔丁基对苯二酚、柠檬酸和维生素C以3：1：1的质量比混合，制得抗氧化剂，备用。

[0085] 将玉米胚芽原料使用双层振动筛筛选10分钟，去除玉米粉、皮屑等杂质；随后使用烘干机以1.5℃/分钟的升温速率升温至60℃，干燥15分钟，再使用压胚机将其压成0.3mm的薄片，使用蒸炒机在70℃下加热50分钟后置于螺旋榨油机进行压榨，得到玉米胚芽毛油；

[0086] 将玉米胚芽毛油与己烷以100：30的质量比混合，在30℃和150rpm的条件下搅拌30分钟后，加入10g氢氧化钾，在50℃和150rpm条件下搅拌60分钟，随后在5000×g下离心15分钟，即得玉米胚芽油，在4℃下保存备用。

[0087] 将复合植物甾醇加热至40℃后，加入抗氧化剂和玉米胚芽油，在50℃下以30rpm的速率搅拌50分钟，即得植物甾醇食用油。

[0088] 现对实施例4‑6与对比例1‑2制备的植物甾醇食用油进行稳定性测试。将实施例4‑6与对比例1‑2制备的20g油样在离心机下以10000rpm的速率搅拌5分钟观察状态，判断体系稳定性。

[0089] 分别向1.5mL甲醇溶液中加入实施例4‑6与对比例1‑2中制备的油样，将0.5mL DPPH甲醇溶液分别加入，充分摇匀后混合，在黑暗条件下放置15分钟。使用7mmo l/L TBS溶液与过2.45mmo l/L硫酸钾以2：1的体积比混合制得ABS˙+溶液，将0.2mLABS˙+溶液分别加入其中，并在30℃下孵育5分钟，并在734nm处测量吸光度，空白对照为2.5mLABTS溶液，根据其抗氧化效果判断组分的稳定性。每个样品获得五个读数并取平均值，测试结果如下表1所示。

[0090] 表1实施例4‑6与对比例1‑2制备的植物甾醇食用油稳定性测试

[0091]项目 抗氧化能力(μg/mL) 油样状态
实施例1 12846 无沉淀、无分层
实施例2 13167 无沉淀、无分层
实施例3 12917 无沉淀、无分层
对比例1 10905 无沉淀、无分层
对比例2 89515 无明显分层

[0092] 由上表1可知，实施例4‑6与对比例1‑2中制备的油样都具有良好的稳定性，包封的植物甾醇具有更好的抗氧化性。

[0093] 现在对实施例4‑6与对比例1‑2制备的油样进行癌细胞抑制效果测试。以结肠癌细6
胞系HT‑29为例，将50×10 /mL密度的HT‑29细胞使用PBS缓冲液清洗3边以后，再使用胰酶消化，除去胰酶后，将细胞放入培养箱孵育5分钟后吹打3分钟得到单细胞悬液，使用2.0g实施例1‑3与对比例1‑2中的油样分别处理，通过CCK‑8试剂盒试剂盒检测细胞4小时后的OD值。通过OD值比较不同样品对癌细胞的抑制率，每个样品获得五个读数并取平均值，测试结果如下表2所示。

[0094] 表2实施例4‑6与对比例1‑2制备的油样进行癌细胞抑制效果测试

[0095] 项目 抑制率(％)实施例1 85.3％
实施例2 87.7％
实施例3 86.3％
对比例1 75.6％
对比例2 74.8％

[0096] 从表2的结果来看，实施例1‑3与对比例1‑2中制备的植物甾醇食用油对癌细胞都具有抑制作用，实施例1‑3中样品对癌细胞的抑制率更好，由于其低温制备的特点，保留了植物甾醇的生物活性，表现出对癌细胞的抑制效果。

[0097] 在说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

[0098] 以上内容仅仅是对本发明所作的举例和说明，所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离发明或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。