[0001] 本发明属于原生动物养殖技术领域，特别是涉及一种涡虫养殖投饵方法。

[0002] 涡虫是扁形动物门的代表动物，广泛存在于自然环境中，其可再生能力和在生态系统的地位具有重要的科研价值，但由于环境污染的影响，自然界的涡虫数量逐渐变少，捕捉难度增大，人工涡虫养殖对涡虫种源保护和恢复其在自然界中的生态价值具有重要意义。同时国内外研究发现，小型涡虫作为生态系统重要的一部分，其对部分有害生物具有捕食能力，如蚊子幼虫、潮虫等，这表明其具有作为生防天敌的应用价值。

[0003] 涡虫为肉食性动物，自然条件下以生活的蠕虫、小型甲壳类以及昆虫的幼虫等为食物，20世纪初，科学家即开始探索涡虫的人工养殖方法，目前人工饲养可用新鲜的猪肝、牛肝、鱼脾脏或熟鸡蛋黄等喂食，然上述饲养方法存在饲料在水体中易腐烂发臭等问题，严重影响养殖涡虫水体的水质，同时食源量难以控制，无法形成规模化养殖，而导致无法实现人为释放大量涡虫至自然界来体现其生态价值和应用价值。

[0004] 间歇式养殖是多种动物的最优养殖方法，相比于连续式养殖，其明显具有降低饲料浪费，提高养殖效率和降低养殖成本的优势，目前淡水小型涡虫人工养殖方法，如猪肝、蛋黄等养殖方法，均存在饲料过量等问题，即实际为连续式养殖，而粉碎后的饲料(猪肝、蛋黄等)投喂涡虫，极易造成水体变质，而造成该类饲料大部分被细菌等微生物分解，即涡虫实际获取的食源难以评估，然而间歇式养殖的关键在于如何控制食源量，进而实现生物最优化养殖，同时由于涡虫的个体很小，在养殖过程中比较密集，所以无法用机械分离或视觉智能识别的方式来确定涡虫的实际数量，由于无法确定数量所以也无法做到精准投饵喂养，所以投饵量的计算和控制就是一个关键问题。

[0005] 因此本领域技术人员致力于开发一种能精准控制投饵量的涡虫养殖投饵方法。

[0040] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

[0041] 本说明书中公开的所有特征，或公开的所有方法或过程中的步骤，除了相互排斥的特质和/或步骤以外，均可以以任何方式组合，除非特别叙述，均可被其他等效或具有类似目的的替代特征加以替换，即，除非特别叙述，每个特征之一系列等效或类似特征中的一个实施例而已。

[0042] 在以下实施例中，养殖涡虫的涡虫培养系统如图1所示，所述养殖池1设置有若干个，全部所述养殖池1连接有一线虫养殖槽2和一第一充气泵3，所述线虫养殖槽2连接有第二充气泵4和线虫投饵器5，所述线虫投饵器5的中部设置有控制阀6，所述第二充气泵4通过一定时控制阀7与所述线虫养殖槽2连接，涡虫养殖在养殖池1中，线虫养殖在线虫养殖槽2中，第一充气泵3和第二充气泵4分别给养殖池1和线虫养殖槽2内泵入氧气，定时控制阀7规律的控制第二充气泵4输出氧气的强度和时间，控制阀6用于控制投饵量。

[0043] 实施例1

[0044] 以泥栖节中口涡虫(Dochmiotrema limicola)养殖为例，采用小杆线虫进行喂养，包括以下步骤：

[0045] S1.采集涡虫生活史参数的数据：分别取10条涡虫置于培养皿中培养，观察各个涡虫的涡虫生活史，分别记录以下参数后取平均值：该涡虫寿命G＝32天，性成熟期D＝9天，产卵周期E＝22天，产卵数N＝25.5(个)，卵孵化期F＝7天，孵化周期f＝6天，单卵孵化数n＝1，捕食系数L＝4.5(条/2天)，此处捕食系数L为平均每2日单头涡虫捕食线虫的数量，即平均每日捕食线虫的数量×2，每3天进行一次投喂，确保每3天1次间歇喂养的第3天涡虫为饥饿状态。

[0046] S2.由以上参数计算以下参数：

[0047] 产卵周期内平均每日产卵数e＝N/E＝1.2(个/天)；

[0048] 孵化率P＝72.4％，即孵化周期内平均每日卵块孵化率p＝P/f＝12.1(％)。

[0049] S3.建立涡虫的数量计算公式：

[0050] 设养殖第x天养殖池内涡虫数为Mx，孵化数为mx，产卵数为Lx，初始涡虫数为常数m0，则x与mx关系满足：

[0051] 当0≤x≤D时，产卵数Lx为0，第一天即接种同批次孵化的涡虫，即孵化数m1＝m0，而后续孵化数mx为0，在不考虑非正常死亡的情况下，涡虫数Mx＝m0；

[0052] 当D＜x＜(D+F)时，产卵数Lx＝e(Mx‑D)＝em0，由于涡虫产下的卵块需要经过卵孵化期F后才能孵化，故孵化数mx＝0，而涡虫数Mx则存在两种情况，如x＞G(涡虫寿命)，则Mx＝0，反之x≤G，则Mx＝m0；

[0053] 当x≥(D+F)时，产卵数 如涡虫产卵期到寿命结束，即D+E＝G时，则 取常数0，且如x≤(D+E)≤G， 孵化数
如x‑F‑f+1≤0，则取求和下限为1(时间x为正整数，即下限最小为1)，而
Mx＝Mx‑1+mx‑mx‑G，如x‑G≤0，则取mx‑G＝0(时间x为正整数，即下限最小为1，故x‑G≤0时，定义mx‑G＝0)。计算方法参照下表：

[0054]

[0055] 由以上公式得出具体投饵量如下：

[0056] 投饵量计算：每次投饵前，记载线虫溶液浓度为K(条/mL)，即投饵量(mL)＝涡虫数Mx×4.5/线虫溶液浓度K(条/mL)，具体数值见下表：

[0057]

[0058]

[0059]

[0060] 在步骤S2中，线虫溶液浓度为K(条/mL)的确定采用以下方式：利用实验室培养的线虫通过过滤清洗方法浓缩制成线虫混合液，所述过滤清洗方法包括以下步骤：

[0061] 材料准备：方形塑料盆1个：带盆盖，长53cm，宽32cm，高10cm；圆柱体玻璃容器1个：透明，无盖，高40cm，底部直径5cm；裁剪矩形350目筛网1张：长40cm，宽30cm；裁剪圆形500目筛网1张：直径50cm；塑料篮子1个：长30cm，宽20cm，高3cm；塑料管1根：长50cm，管直径2cm。

[0062] 步骤：(1)将350目筛网平铺于塑料篮子上，再将实验室已培养好线虫的培养基置于350目筛网上；(2)将步骤(1)中的塑料篮子、线虫培养基和350目筛网全部放置于方形塑料盒中，加入自来水，保持水位高度3cm，静置24小时；(3)用塑料管将方形塑料盒内含线虫的自来水抽出到圆柱体玻璃容器(利用虹吸方式，全部抽出即可)，在保持30cm高水位下静置1小时，再将500目筛网覆盖圆柱体玻璃容器口，利用5mL移液枪将500目筛网中间直接塞进线虫混合液中，抽出反渗透出500目筛网表面的液体；(4)加入抽出液体量等体积的清水；(5)重复步骤(3)和步骤(4)3次，充分清洗出线虫混合液中的杂质；(6)重复步骤(3)，浓缩成高密度线虫混合液。

[0063] 以上表中的当日线虫浓度的5500条/mL的计算为例，其计算方法为取充分浓缩并混匀后的高密度线虫混合液50μL，置于体式显微镜下观察线虫数量，重复3次，3次操作后的线虫数量分别为819条，825条和831条，则线虫溶液浓度K(条/mL)＝3次观察线虫数量总和/50μL/3×1000＝5500。

[0064] S3.相关喂养条件的准备及实施

[0065] (1)饲料的准备：取实验室培养的全齿复活线虫，纯水清洗至容器中，将容器中的线虫溶液利用1000目筛网去除水分，置于4℃冰箱保存备用，保存期不超过20天。

[0066] (2)养殖盆：选择长53cm×宽32.5cm×高10cm的PVC材质塑料盆(带盆盖)，在盆盖上钻取0.4cm孔1个，用洗涤剂清洗干净，置于烘箱50℃烘干后备用。

[0067] (3)养殖水的选择：用5L塑料桶接取自来水，置于灭菌锅121℃灭菌45min，冷却后备用。

[0068] (4)养殖室：选择一个可密闭空间，安装一个排气扇，每隔3天打开排气扇8小时，促使养殖室内空气与外界对流，通过温度控制器控制加热器(油汀、小型取暖器等)，控制温度26±1℃，于养殖室门口安装一个工业温度计，用于监控养殖室内温度。

[0069] (5)涡虫饲养装置准备：在养殖室内，将步骤(3)的养殖水中加入步骤(2)养殖盆，保持养殖盆内水位高度6cm，取0.4cm软管一头通过步骤(2)养殖盆盖0.4cm孔后连接气石，将气石放入步骤(2)养殖盆水位以下内，另一头连接气泵，打开气泵供氧，放置6小时以上，利用水体溶氧量测定仪测定水体溶氧量，通过调节气泵保持水体溶氧量在10至11mg/L，利用工业温度计测定水体温度，保持水体温度22±1℃，如水体温度超出范围，应调节环境温度。

[0070] (6)涡虫接种：取同一批次孵化的可捕食线虫涡虫幼虫2000条，利用5mL移液枪加入到养殖盆内。

[0071] (7)饵料投喂方法：根据步骤S2所述计算涡虫数量及当日投饵量，按照投饵量每间隔2天(即3天投饵1次)将投饵量通过投饵口加入投饵装置收集箱，通过投饵装置将线虫溶液泵入涡虫养殖池，根据养殖池内涡虫数量估算投饵量，利用定时装置控制投饵装置进行定量投饵，或使用移液枪或吸管实现。

[0072] 说明：本实例喂养46天时，涡虫数量在养殖池内可见密度较大，根据计算，养殖池内涡虫数量已超过11万条，所述养殖池底部面积为53cm×

[0073] 32.5cm＝1722.5cm2，折算平均密度接近65条/cm2，所述虫体长度为2000μm左右，其可见养殖密度非常大，采用Logisstic方程来分析该涡虫在养殖池内的繁殖模型，在有限条件下，涡虫生存空间、食源等有限，而涡虫数量接近于上限Mmax时，涡虫数量增加接近于0，即增长率k趋近于0，由于涡虫养殖密度过大，接近养殖池内涡虫数量上限，故本实例于46天时，对所饲养的涡虫进行转接新的养殖盆，在实际应用中，应在养殖池内涡虫数量达到上限Mmax的80％时，即对养殖盆内的涡虫进行转接新的养殖盆，确保其快速繁殖，并避免造成食源浪费。

[0074] 实施例2

[0075] 以实验室采集于贵州土壤中的陆生涡虫养殖为例，采用小杆线虫(Rhabditis axei)进行喂养，包括以下步骤：

[0076] S1.采集涡虫生活史参数的数据：分别取10条涡虫置于培养皿中培养，观察各个涡虫的涡虫生活史，分别记录以下参数后取平均值：该涡虫寿命G＝25天，性成熟期D＝7天，产卵周期E＝18天(该涡虫产完最后一个卵后直接解体死亡)，产卵数N＝41.8(个)，卵孵化期F＝4天，孵化周期f＝8天，单卵孵化数n＝1，捕食系数L＝5.3(条/2天)，此处捕食系数L为平均每2日单头涡虫捕食线虫的数量，即平均每日捕食线虫的数量×2，每5天进行一次投喂，确保每5天1次间歇喂养的第5天涡虫为饥饿状态。

[0077] S2.由以上参数计算以下参数：

[0078] 产卵周期内平均每日产卵数e＝N/E＝2.3(个/天)；

[0079] 孵化率P＝60.8％，即孵化周期内平均每日卵块孵化率p＝P/f＝7.6(％)。

[0080] S3.建立涡虫的数量计算公式：此处计算与实施例1步骤相同，此处不再赘述。

[0081] S4.建立投饵量计算公式：记载线虫溶液浓度为K(条/mL)，即投饵量(mL)＝涡虫数Mx×5.3/线虫溶液浓度K(条/mL)，具体数值见下表3：

[0082]

[0083]

[0084] 相关喂养条件的准备及实施：

[0085] (1)饲料的准备：取实验室培养的小杆线虫，纯水清洗至容器中，将容器中的线虫溶液利用1000目筛网去除水分，置于4℃冰箱保存备用，保存期不超过20天。

[0086] (2)养殖盆：选择长53cm×宽32.5cm×高10cm的PVC材质塑料盆(带盆盖)，在盆盖上钻取0.4cm孔1个，用洗涤剂清洗干净，置于烘箱50℃烘干后备用。

[0087] (3)养殖水的选择：用5L塑料桶接取自来水，置于灭菌锅121℃灭菌45min，冷却后备用。

[0088] (4)养殖室：选择一个可密闭空间，安装一个排气扇，每隔3天打开排气扇8小时，促使养殖室内空气与外界对流，通过温度控制器控制加热器(油汀、小型取暖器等)，控制环境温度26±1℃，于养殖室门口安装一个工业温度计，用于监控养殖室内温度。

[0089] (5)涡虫饲养装置准备：在养殖室内，将步骤(3)的养殖水中加入步骤(2)养殖盆，保持养殖盆内水位高度6cm，取0.4cm软管一头通过步骤(2)养殖盆盖0.4cm孔后连接气石，将气石放入步骤(2)养殖盆水位以下，另一头连接气泵，打开气泵供氧，放置6小时以上，利用水体溶氧量测定仪测定水体溶氧量，通过调节气泵保持水体溶氧量在7至8mg/L，利用工业温度计测定水体温度，保持水体温度22±1℃，如水体温度超出范围，应调节环境温度。

[0090] (6)涡虫接种：取同一批次孵化的可捕食线虫涡虫幼虫2000条，利用5mL移液枪加入到养殖盆内。

[0091] (7)饵料投喂方法：根据步骤S3所述计算涡虫数量及当日投饵量，按照投饵量每间隔4天(即每5天投饵1次)将投饵量通过投饵口加入投饵装置收集箱，通过投饵装置将线虫溶液泵入涡虫养殖池，根据养殖池内涡虫数量估算投饵量，利用定时装置控制投饵装置进行定量投饵，或使用移液枪或吸管实现。

[0092] 说明：本实施例喂养36天时，涡虫数量在养殖池内可见密度较大，根据计算，养殖2
池内涡虫数量已超过18万条，所述养殖池底部面积为53cm×32.5cm＝1722.5cm，折算平均
2
密度约110条/cm，采用Logisstic方程来分析该涡虫在养殖池内的繁殖模型，在有限条件下，涡虫生存空间、食源等有限，而涡虫数量接近于上限Mmax时，涡虫数量增加接近于0，即增长率k趋近于0，由于涡虫养殖密度过大，接近养殖池内涡虫数量上限，故本实例对所饲养的涡虫进行转接新的养殖盆，在实际应用中，应在养殖池内涡虫数量达到上限Mmax的80％时，即对养殖盆内的涡虫进行转接新的养殖盆，确保其快速繁殖，并避免造成食源浪费。

[0093] 实施例3

[0094] 以实验室采集于贵州土壤中的陆生涡虫为例，采用条状猪肝进行喂养，包括以下步骤：

[0095] S1.采集涡虫生活史参数的数据：分别取10条涡虫置于培养皿中培养，观察条状猪肝(长1mm、直径0.5mm)喂养情况下涡虫的生活史，分别记录以下参数后取平均值：该涡虫寿命G＝20天，性成熟期D＝7天，产卵周期E＝13天(该涡虫产完最后一个卵后直接解体死亡)，产卵数N＝25.8(个)，卵孵化期F＝4天，孵化周期f＝8天，单卵孵化数n＝1，捕食系数L＝1.2(条/2天)，此处捕食系数L为平均每2日单头涡虫捕食条状猪肝的数量，每5天进行一次投喂，确保每5天1次间歇喂养的第5天涡虫为饥饿状态。

[0096] S2.由以上参数计算以下参数：

[0097] 产卵周期内平均每日产卵数e＝N/E＝2.0(个/天)；

[0098] 孵化率P＝60.8％，即孵化周期内平均每日卵块孵化率p＝P/f＝7.6(％)。

[0099] S3.建立涡虫的数量计算公式：此处计算与实施例1步骤相同，此处不再赘述。

[0100] S4.建立投饵量计算公式：记载条状猪肝数K(条/g)，即投饵量(g)＝涡虫数Mx×1.2/条状猪肝数K(条/g)，具体数值见下表3：

[0101]

[0102]

[0103] 相关喂养条件的准备及实施：

[0104] (1)饲料的准备：取新鲜猪肝，置于快速切条机器中，设置切条参数为1mm长、0.5mm厚度。

[0105] (2)养殖盆：选择长53cm×宽32.5cm×高10cm的PVC材质塑料盆(带盆盖)，在盆盖上钻取0.4cm孔1个，用洗涤剂清洗干净，置于烘箱50℃烘干后备用。

[0106] (3)养殖水的选择：用5L塑料桶接取自来水，置于灭菌锅121℃灭菌45min，冷却后备用。

[0107] (4)养殖室：选择一个可密闭空间，安装一个排气扇，每隔3天打开排气扇8小时，促使养殖室内空气与外界对流，通过温度控制器控制加热器(油汀、小型取暖器等)，控制环境温度26±1℃，于养殖室门口安装一个工业温度计，用于监控养殖室内温度。

[0108] (5)涡虫饲养装置准备：在养殖室内，将步骤(3)的养殖水中加入步骤(2)养殖盆，保持养殖盆内水位高度6cm，取0.4cm软管一头通过步骤(2)养殖盆盖0.4cm孔后连接气石，将气石放入步骤(2)养殖盆水位以下，另一头连接气泵，打开气泵供氧，放置6小时以上，利用水体溶氧量测定仪测定水体溶氧量，通过调节气泵保持水体溶氧量在7至8mg/L，利用工业温度计测定水体温度，保持水体温度22±1℃，如水体温度超出范围，应调节环境温度。

[0109] (6)涡虫接种：取同一批次孵化的可捕食线虫涡虫幼虫2000条，利用5mL移液枪加入到养殖盆内。

[0110] (7)饵料投喂方法：根据步骤S3所述计算涡虫数量及当日投饵量，按照投饵量每间隔4天(即每5天投饵1次)将投饵量通过投饵口加入投饵装置收集箱，通过投饵装置将线虫溶液泵入涡虫养殖池，根据养殖池内涡虫数量估算投饵量，利用定时装置控制投饵装置进行定量投饵，或使用移液枪或吸管实现。

[0111] (8)条状猪肝数K计算：以第一天喂养2100条/g为例，秤取步骤(1)切好的条状猪肝1g，置于培养皿中，加入清水将猪肝条分散，再置于显微镜下计数，重复3次，3次计数结果分别为2087条、2211条、2056条，即条状猪肝数K＝3次计数总和/1g/3＝(2087+2211+2056)/
1g/3＝2118(条/g)。

[0112] 说明：在使用猪肝喂养，且采用本投饵方法时，先根据模型计算61天生长数据(即每5天投喂1次，共投喂13次)，可实现涡虫的快速增长，但本试验实行到第31天(即投喂第7次)时，水体已经出现浑浊，涡虫出现死亡，这与猪肝饲料影响水质，导致水体细菌快速增长有关，无法实现与线虫喂养那样高密度、规模化养殖，故在采用本方法且使用猪肝或者蛋黄等饲料进行喂养时，因增加换水频率或于水体中增加净水装置。

[0113] 以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思做出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。