[0001] 本发明涉及表现出长期亮度/白度改善(褐变减少)的蛋白质(例如酶)粒子，和包含这样的粒子的粉末洗涤剂。

[0002] 许多消费性粉末产品(例如粉末洗涤剂和某些食品)的白度通常与效率和/或高品质相关。但是当这样的粉末产品的粒子同时包含蛋白质和还原糖时，由于这些还原糖和蛋白质的氨基酸之间存在美拉德反应，这些粉末产品的粒子可能随着时间的推移而呈现褐
色。这种褐变效应可以通过添加增白剂(例如二氧化钛)来遮盖，出于这个目的，使用了大量增白剂。

[0003] 然而，特别地，二氧化钛疑似会对环境产生不良影响，并且人们普遍期望开发出避免或减少使用二氧化钛的增白技术。

[0004] 本发明提供了一种减少对包含蛋白质和还原糖的粒子中的增白剂的需求的方法，这些粒子在白色消费性粉末产品中使用。

[0017] 我们已经发现，与白色粒子/颗粒中的蛋白质和还原糖之间的美拉德反应相关的褐变可以通过添加亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐来减少。以这种方式，可以减少或完全避免增白剂(例如二氧化钛)的量。

[0018] 因为用于产生蛋白质的发酵微生物在发酵过程中需要糖或糖前体作为碳源，因此当通过发酵产生蛋白质时，这种方式甚至更为重要。如果在纯化之后留下了少量还原糖和蛋白质，这可能在随后的蛋白质粒子储存期间导致褐变。

[0019] 由于美拉德反应发生在氨基酸和还原糖之间，因此粒子含有的一种或多种蛋白质的种类并不重要。例如，酶是一组熟知的通过发酵产生的蛋白质，广泛用作消费品和生产消费品中的白色粒子。因此，本发明对维持酶粒子/颗粒的白度特别有用。

[0020] 蛋白质粒子

[0021] 如上所述，本发明提供了一种粒子，该粒子包含

[0022] (a)蛋白质；

[0023] (b)亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐；以及

[0024] (c)单糖或二糖，该单糖或二糖是还原糖或可以被降解为还原糖。

[0025] 还原糖可以与蛋白质的氨基酸反应，以产生美拉德反应产物，这些产物降低粒子在储存之后的白度。还原糖的实例包括葡萄糖、果糖、乳糖和麦芽糖。许多二糖(例如蔗糖(或者甚至低聚糖))可以通过糖苷键的水解被降解，以在储存期间产生还原糖，因此实际上充当还原糖。例如，蔗糖的水解产生葡萄糖和果糖，两者都是还原糖。蔗糖的水解由转化酶(EC 3.2.1.26)或蔗糖酶(EC 3.2.1.48)催化，该转化酶或该蔗糖酶经常存在于发酵产物中。因此，在实施例中，单糖或二糖选自由以下组成的组：葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖及其组合。单糖和二糖都在通过由葡糖苷酶催化的淀粉或糊精水解的发酵中产生。因此，该粒子还可以包含转化酶和/或葡糖苷酶。

[0026] 优选地，单糖或二糖是还原糖，可以使用PAHBAH测定以葡萄糖当量对其进行测量。

[0027] 在实施例中，该粒子包含大于0.01％w/w的量的单糖或二糖；优选地大于0.05％w/w。

[0028] 由于本发明的粒子在储存之后表现出较少的褐变，因此该粒子可能包含小于0.5％w/w的二氧化钛，优选地小于0.1％w/w，更优选地小于0.05％w/w，或基本上不含二氧化钛。因此，本发明还提供了另一种粒子，该粒子包含

[0029] (a)蛋白质；

[0030] (b)亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐；以及

[0031] (c)小于0.5％w/w的二氧化钛；优选地小于0.1％w/w的二氧化钛。

[0032] 两种粒子(下文是指“这些粒子”)可以包含大于0.01％w/w的量的亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐；优选地大于0.05％w/w，或大于0.1％w/w。亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐的上限可能是(小于)10％w/w，优选地5％w/w或1％w/w。

[0033] 这些粒子可以包含0.1％‑25％w/w的量的蛋白质。

[0034] 如果将蛋白质和亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐在连续基质中均匀地混合，则是有利的。优选地，这些粒子包含核心和一个或多个包围该核心的包衣，并且该核心包含连续基质，优选地由其组成。

[0035] 如以上提及的，通过发酵微生物产生的蛋白质经常(甚至在纯化之后)含有来自发酵培养基的少量还原糖。因此，在实施例中，通过发酵产生蛋白质。

[0036] 在特别的实施例中，这些粒子的蛋白质是酶，并且蛋白质(酶)的量是活性酶蛋白(AEP)。

[0037] 亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐可能是偏亚硫酸氢盐；优选地是偏亚硫酸氢钠或偏亚硫酸氢钾。

[0038] 如上所述，由于本发明的粒子在储存之后表现出褐变减少，无需添加相同量的增白剂(例如二氧化钛)，该增白剂通常用于改善粒子的白度。因此，这些粒子可以包含小于0.5％w/w的二氧化钛，小于0.1％w/w，或基本上不含二氧化钛。

[0039] 同样，本发明的粒子可以在储存之后表现出白度损失减少；优选地在37℃和70％ RH下储存8周之后，具有小于5的δ亨特白度。可替代地，本发明的粒子在储存之后可能具有的亨特白度与不包含亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐的相同粒子的亨特白度相比，高大于5单位。

[0040] 可以在包括以下步骤的方法中产生如上所述的粒子：

[0041] (a)制备通过发酵产生的蛋白质与亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐的均匀混合物；以及

[0042] (b)从该均匀混合物制备粒子。

[0043] 本发明还提供了一种用于改善蛋白质粒子在储存之后的白度的方法，该方法包括[0044] (a)制备如上所述的粒子；以及

[0045] (b)将该粒子储存超过2周。

[0046] 洗涤剂粉末是特定的消费品，其中白度是重要的参数，因为白度与清洁性能相关。因此，在另一个方面，本发明还提供了粉末洗涤剂，该粉末洗涤剂包含表面活性剂和(洗涤剂)助洗剂、以及任何本发明的粒子。

[0047] 蛋白质粒子典型地具有20‑3000μm，优选地50‑2000μm、100‑1500μm或250‑1200μm的(重量/体积平均)直径。在特别优选的实施例中，蛋白质粒子的(重量/体积平均)直径是200‑700μm。这些粒子(大致上)可以是球形的。

[0048] 在实施例中，蛋白质粒子(基本上)不含有表面活性剂或漂白剂。

[0049] 粒子/核心

[0050] 这些粒子，或如上所提及的核心，可以包括另外的材料例如填充剂、纤维材料(纤维素或合成纤维)、稳定剂、增溶剂、悬浮剂、粘度调节剂、轻球体、增塑剂、盐、润滑剂和芳香剂。粒子和核心在下文都简称为“核心”。

[0051] 该核心可以包括黏合剂，如合成聚合物、蜡、脂肪、或碳水化合物。

[0052] 该核心典型地作为均匀的共混物可以包含多价阳离子的盐、还原剂、抗氧化剂、过氧化物分解催化剂和/或酸性缓冲剂组分；或者活性和非活性成分的其他组合。

[0053] 核心可以由惰性粒子(其中酶施加在惰性粒子的表面上，例如经由种子混合器造粒或流化床中的分层造粒)组成。这样的惰性粒子可以是有机微粒化合物，例如天然化合物，例如凝集的碳水化合物(例如糖、淀粉、糊精、面粉(例如植物粉)或那普瑞尔
(nonpareil))。那普瑞尔是由晶种制成的球形粒子，该晶种被构建在球形上并被磨圆成球形。那普瑞尔典型地由糖(如蔗糖)和粉末(如玉米淀粉)的组合制成。惰性粒子还可以是氯化钠或硫酸钠晶体(或凝集的晶体)，也称为晶种，或其他无机盐晶体；或者蔗糖晶体。

[0054] 核心的制备

[0055] 该核心可以通过粒化成分的共混物来制备，例如通过包括造粒技术的方法，如结晶、沉淀、锅包衣(pan‑coating)、流化床包衣、流化床凝集、旋转雾化、挤出、颗粒化(prilling)、滚圆(spheronization)、粒度减小法、转鼓造粒(drum granulation)和/或高剪切造粒。

[0056] 不含酶的核心通过相同的技术但不使用酶来制备。

[0057] 用于制备核心的方法可见于Handbook of Powder Technology[粉末技术手册]；C.E.Capes的Particle size enlargement[粒度增大]；第1卷；1980；Elsevier[爱思唯尔]中。制备方法包括已知的饲料和粒子配制技术，例如：

[0058] a)喷雾干燥产品，其中在喷雾干燥塔中雾化液体含酶溶液以形成小液滴，在它们在沿干燥塔下降的过程中干燥形成含酶微粒状材料。用这种方法可以产生非常小的粒子(Michael S.Showell(编辑)；Powdered detergents[粉状洗涤剂]；Surfactant Science Series[表面活性剂科学系列]；1998；第71卷；第140‑142页；Marcel Dekker[马塞尔·德克尔公司])。

[0059] b)层状产品，其中酶在预形成的惰性核心粒子周围包衣成层，其中含酶溶液典型地在流化床装置中被雾化，在该流化床装置中预形成的核心粒子被流体化并且含酶溶液附着到核心粒子上并干燥，直到使得干的酶层留在核心粒子的表面上。如果可以发现具有希望尺寸的有用核心粒子，则通过这种方式能够获得具有希望尺寸的粒子。这种类型的产品描述于，例如，WO 97/23606中。

[0060] c)吸收的核心粒子，其中不是将该酶在核心周围包衣成层，而是在核心的表面上和/或表面中吸收该酶。这样的方法描述于WO 97/39116中。

[0061] d)挤出或丸粒化的产品，其中将含酶糊剂压成丸粒或在压力下通过小的开口挤出并切割为粒子，随后干燥这些粒子。此类粒子通常具有相当大的尺寸，因为开有挤出开口的材料(通常是具有钻孔的平板)限制了通过挤出开口可允许的压力降。此外，当使用小开口时，非常高的挤出压力增加了酶糊剂中的热发生，这对酶是有害的(还参见Michael S.Showell(编辑)；Powdered detergents[粉状洗涤剂]；Surfactant Science Series[表面活性剂科学系列]；1998；第71卷；第140‑142页；Marcel Dekker[马塞尔·德克尔公司])。

[0062] e)喷射造粒产品，其中将含酶粉末悬浮于熔化的蜡中，并将悬浮液喷射(例如通过转盘喷雾器)到冷却室中，在此冷却室中液滴快速地固化(Michael S.Showell(编辑)；Powdered detergents[粉状洗涤剂]；Surfactant Science Series[表面活性剂科学系
列]；1998；第71卷；第140‑142页；Marcel Dekker[马塞尔·德克尔公司])。所获得的产品是酶均匀分布遍及整个惰性材料而不是集中在其表面上的产品。此外，US 4,016,040和US 4,
713,245是与此技术有关的文献。

[0063] f)混合造粒产品，其中将液体添加至例如常用造粒组分的干燥粉末组合物中，经由液体或粉末或二者引入该酶。将液体和粉末混合，并且因为液体的水分为干燥粉末所吸收，干燥粉末的组分开始附着并凝集，并且粒子将累积，形成包含酶的颗粒。这样的方法描述于US 4,106,991和有关的文献EP 170360、EP 304332、EP 304331、WO 90/09440和WO 90/09428中。在其中可以用各种高剪切混合器作为造粒机的此方法的特定产品中，将由作为酶的酶、填料和黏合剂等组成的颗粒与纤维素纤维混合以强化粒子，而得到所谓的T‑颗粒(T‑granulate)。经强化的粒子更加坚固，酶粉尘释放更少。

[0064] g)粒度减小，其中通过碾磨或压碎含酶的较大的粒子、丸粒、平片体、坯块(briquette)等产生核心。通过将碾磨或压碎的产物过筛获得所需要的核心粒子级分。可以回收尺寸过大和尺寸过小的粒子。粒度减小描述于(Martin Rhodes(编辑)；Principles of Powder Technology[粉末技术原理]；1990；第10章；John Wiley&Sons[约翰·威利父子出版社])中。

[0065] h)流化床造粒。流化床造粒涉及将微粒悬浮于空气流中并经喷嘴喷射液体到流体化粒子上。被喷洒的液滴击中的粒子湿润并发粘。发粘的粒子与其他粒子碰撞并附着到其上并形成粒子。

[0066] i)这些核心可进行干燥，如在流化床干燥器中。本领域技术人员可以使用其他已知的在饲料或洗涤剂工业中用于干燥粒子的方法。干燥优选地在从25℃至90℃的产品温度下进行。对于一些酶来说，重要的是包含酶的核心在包衣之前含有少量的水。如果在过量水除去之前水敏性酶被包衣，则该过量水会截留在核心中并可能消极地影响酶的活性。干燥之后，这些核心优选含有0.1％‑10％w/w的水。

[0067] 包衣

[0068] 蛋白质/酶粒子可以包含至少一个包衣。还可以将一个或多个包衣施加到这些核心上以改善蛋白质储存稳定性，减少处理期间蛋白质粉尘的形成，改善蛋白质包衣对核心的粘附，或用于使粒子着色。

[0069] 该一个或多个包衣可包括盐包衣和/或聚合物包衣。聚合物包衣包含聚乙二醇(PEG)、甲基羟丙基纤维素(MHPC)、或聚乙烯醇(PVA)。

[0070] 具有多个包衣的酶粒子的实例示于WO 93/07263和WO 97/23606中。该一个或多个包衣还可以包含功能成分，如漂白催化剂(例如锰漂白催化剂；MnTACN)和/或漂白活化剂(例如TAED、NOBS)。

[0071] 可以将该包衣按核心的重量计以至少0.1％(例如，至少0.5％、1％或5％)的量施加。该量至多可以是100％、70％、50％、40％或30％。

[0072] 包衣优选地是至少0.1μm厚，特别是至少0.5μm、至少1μm或至少5μm厚。在特别的实施例中，包衣的厚度低于100μm。在更特别的实施例中，包衣的厚度低于60μm。在甚至更特别的实施例中，包衣的总厚度低于40μm。

[0073] 该包衣应当通过形成基本上连续的层来密封该核心(和基质层)。基本上连续的层应当理解为具有极少或没有孔洞的包衣，使得密封/封闭的核心单元具有极少或没有未包衣的区域。层或包衣特别应在厚度上是均匀的。

[0074] 包衣可以进一步含有其他本领域已知的材料，例如填料、防粘剂、颜料、染料、增塑剂和/或黏合剂、高岭土、碳酸钙或滑石。

[0075] 盐包衣

[0076] 盐包衣可以包含按重量w/w计至少60％的盐，例如，按重量w/w计，至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％。

[0077] 该盐可以从盐溶液(其中该盐是完全溶解的)中添加，或者从盐悬浮液(其中该细粒子是小于50μm，如小于10μm或小于5μm)中添加。

[0078] 盐包衣可以包含单一盐或者两种或更多种盐的混合物。该盐可以是水溶性的，特别地具有在20℃下在100g水中至少0.1克的溶解度，优选地至少0.5g/100g水，例如，至少1g/100g水，例如，至少5g/100g水。

[0079] 盐可以是无机盐，例如硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、膦酸盐、硝酸盐、氯盐或碳酸盐或者简单有机酸(小于10个碳原子，例如6个或更少的碳原子)的盐如柠檬酸盐、丙二酸盐或乙酸盐。在这些盐中的阳离子的实例是碱或碱土金属离子、铵离子或第一过渡系的金属离子，如钠、钾、镁、钙、锌或铝。阴离子的实例包括氯、溴、碘、硫酸根、亚硫酸根、亚硫酸氢根、硫代硫酸根、磷酸根、磷酸二氢根、二碱式磷酸根、次磷酸根、焦磷酸二氢根、四硼酸根、硼酸根、碳酸根、碳酸氢根、硅酸根、柠檬酸根、苹果酸根、马来酸根、丙二酸根、琥珀酸根、乳酸根、甲酸根、乙酸根、丁酸根、丙酸根、苯甲酸根、酒石酸根、抗坏血酸根或葡萄糖酸根。特别是，可以使用硫酸根、亚硫酸根、磷酸根、膦酸根、硝酸根、氯或碳酸根的碱或碱土金属盐或者简单有机酸的盐如柠檬酸盐、丙二酸盐或乙酸盐。

[0080] 在包衣中的盐可以在20℃下具有超过60％，特别地超过70％、超过80％或超过85％的恒定相对湿度(也称为“湿度固定点”)，或者它可以是此盐的另一种水合物形式(例如，无水物)。盐包衣可以如WO 00/01793或WO 2006/034710中所述。

[0081] 合适的盐的特定实例是NaCl(CH20℃＝76％)、Na2CO3(CH20℃＝92％)、NaNO3(CH20℃＝73％)、Na2HPO4(CH20℃＝95％)、Na3PO4(CH25℃＝92％)、NH4Cl(CH20℃＝79.5％)、(NH4)2HPO4(CH20℃＝93.0％)、NH4H2PO4(CH20℃＝93.1％)、(NH4)2SO4(CH20℃＝81.1％)、KCl(CH20℃＝85％)、K2HPO4(CH20℃＝92％)、KH2PO4(CH20℃＝96.5％)、KNO3(CH20℃＝93.5％)、Na2SO4(CH20℃＝93％)、K2SO4(CH20℃＝98％)、KHSO4(CH20℃＝86％)、MgSO4(CH20℃＝90％)、ZnSO4(CH20℃＝90％)以及柠檬酸钠(CH25℃＝86％)。其他实例包括NaH2PO4、(NH4)H2PO4、CuSO4、Mg(NO3)2和乙酸镁。

[0082] 该盐可以处于无水形式，或者它可以是水合盐，即具有结晶化的一个或多个结合水的结晶盐水合物，例如描述于WO 99/32595中。具体实例包括无水硫酸钠(Na2SO4)、无水硫酸镁(MgSO4)、七水硫酸镁(MgSO4·7H2O)、七水硫酸锌(ZnSO4·7H2O)、七水磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)、六水硝酸镁(Mg(NO3)2(6H2O))、二水柠檬酸钠以及四水乙酸镁。

[0083] 优选地，作为盐溶液使用该盐，例如使用流化床。

[0084] 蛋白质/酶粒子可以基本上不含二氧化钛。术语“基本上不含”意指酶粒子不含有显著改变酶粒子或对酶粒子有任何实质性影响的量的二氧化钛。在实施例中，“基本上不含”意指酶粒子含有小于0.5％w/w二氧化钛，优选地小于0.1％w/w二氧化钛。

[0085] 蛋白质

[0086] 包含在本发明的粒子中的一种或多种蛋白质可以是任何蛋白质，但是特别是通过发酵产生的蛋白质。如以上和以下提及的，蛋白质可以称为“目的”蛋白，以与转化酶、蔗糖酶和葡糖苷酶进行区分。

[0087] 蛋白质是小生物分子(肽；<50个氨基酸)和大生物分子(多肽；>50个氨基酸)，其在活生物体内执行大量功能，包括催化反应、DNA复制、响应刺激、为细胞和生物体提供结构、以及将分子从一个位置运输到另一个位置。蛋白质由聚合氨基酸链组成，该聚合氨基酸链以非常特殊的三维结构折叠。该三维结构对于维持蛋白质的功能十分重要。一些化学品可以改变折叠，或者甚至将该三维结构解折叠(变性)，这将导致功能丧失，例如酶活性丧失。

[0088] 在实施例中，这些蛋白质是多肽。

[0089] 蛋白质分为至少三个不同的组，即酶、细胞信号传导和配体结合蛋白、以及结构蛋白。

[0090] 下文描述了酶。例如，细胞信号传导和配体结合蛋白包括许多药物蛋白质，例如受体、膜蛋白、离子通道、抗体(例如单结构域抗体)和激素；而结构蛋白为原本是液体的生物组分提供了硬度和刚度。

[0091] 优选地，这些蛋白质是酶或细胞信号传导和配体结合蛋白；更优选地这些蛋白质是(目的)酶。

[0092] 生产

[0093] 包含在本发明的粒子中的蛋白质、优选地酶，通常通过发酵和后续回收过程产生。蛋白质可以从包含单糖或二糖的发酵液回收，该单糖或二糖是还原糖或可以被降解为还原糖；优选地葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖或蔗糖。发酵液可以包含至少0.1％w/w、或至少1％w/w的量的蛋白质。发酵液还可以包含转化酶和/或葡糖苷酶。可以使发酵液/培养液经历絮凝/沉淀步骤以提供含有经纯化的蛋白质的上清液，并且随后可以将该经纯化的蛋白质上清液进行膜过滤以提供浓缩的蛋白质溶液。优选地，膜过滤包括超滤。浓缩的蛋白质溶液随后可以用于在以下过程中产生本发明的粒子，该过程包括将浓缩的蛋白质溶液和其他粒子成分(例如亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐)混合。可以在制备粒子之前，将水从浓缩的蛋白酶溶液中蒸发。

[0094] 取决于所希望的纯度，可以将(来自发酵的)发酵培养液、(来自絮凝的)蛋白质上清液、或(来自膜过滤的)浓缩的蛋白质溶液进行喷雾干燥(或冷冻干燥)以提供蛋白质粉末。蛋白质粉末随后可以用于在以下过程中产生本发明的粒子，该过程包括将蛋白质粉末和其他粒子成分(例如亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐)混合。

[0095] 酶

[0096] 本发明的粒子中使用的酶是催化蛋白，并且术语“活性酶蛋白”在本文中定义为表现出酶活性的一种或多种催化蛋白的量。这可以使用基于活性的分析酶测定来确定。在这样的测定中，酶典型地催化产生有色化合物的反应。有色化合物的量可以测量且与活性酶蛋白的浓度相关。该技术是本领域熟知的。

[0097] 该一种或多种酶可以是一种或多种(洗涤剂)酶，其例如选自由以下组成的组：蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、核酸酶(DNA酶、RNA酶)、分散蛋白、过氧化氢酶、过水解酶、和氧化酶(如漆酶和/或过氧化物酶)。更优选的洗涤剂酶选自由以下组成的组：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、核酸酶(DNA酶、RNA酶)、分散蛋白、过氧化氢酶、和过水解酶。甚至更优选的酶选自由以下组成的组：蛋白酶(枯草杆菌蛋白酶)、脂肪酶、淀粉酶(α‑淀粉酶)、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、DNA酶、分散蛋白和过氧化氢酶。特别地，酶是蛋白酶(枯草杆菌蛋白酶)或淀粉酶(α‑淀粉酶)。

[0098] 该酶可以是天然存在的细菌或真菌来源的酶，或者它可以是通过基因改组和/或通过取代、缺失或插入一个或多个氨基酸从一种或多种天然存在的酶衍生的变体。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。

[0099] 如本发明中使用的酶粒子含有至少一种酶，该酶以0.1％‑25％w/w活性酶蛋白的量存在；优选地以0.5％‑25％w/w活性酶蛋白的量存在；以及更优选地以0.5％‑20％w/w活性酶蛋白的量存在。

[0100] 蛋白酶

[0101] 合适的蛋白酶可以是任何来源的，但优选地是细菌或真菌来源的，任选地呈蛋白质工程化的或化学修饰的突变体的形式。蛋白酶可以是碱性蛋白酶，如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族的(如胰蛋白酶)或S8家族的(如枯草杆菌蛋白酶(subtilisin))。金属蛋白酶可以例如是嗜热菌蛋白酶，例如来自M4家族的嗜热菌蛋白酶，或另一种金属蛋白酶，如来自M5、M7或M8家族的那些。

[0102] 术语“枯草杆菌酶(subtilase)”是指根据Siezen等人，Protein Eng.[蛋白质工程]4(1991)719‑737和Siezen等人，Protein Sci.[蛋白质科学]6(1997)501‑523的丝氨酸蛋白酶的亚组。丝氨酸蛋白酶是特征为在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的亚组。枯草杆菌酶可以被划分为六个亚类：枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。

[0103] 尽管合适的用于洗涤剂用途的蛋白酶可以从多种生物(包括如曲霉属(Aspergillus)等真菌)获得，但洗涤剂蛋白酶一般已从细菌(特别是从芽孢杆菌属
(Bacillus))获得。衍生枯草杆菌酶的芽孢杆菌属物种的实例包括迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)、嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alkalophilus)、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii)。特别的枯草杆菌蛋白酶包括迟缓枯草杆菌蛋白酶(subtilisin lentus)、枯草杆菌蛋白酶Novo、枯草杆菌蛋白酶
Carlsberg、枯草杆菌蛋白酶BPN'、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168、以及例如蛋白酶PD138(描述于WO 93/18140中)。其他有用的蛋白酶是例如在WO 
01/16285和WO 02/16547中描述的那些。

[0104] 胰蛋白酶样蛋白酶的实例包括镰孢属蛋白酶(在WO 94/25583和WO 2005/040372中描述)，以及衍生自纤维单胞菌(Cellumonas)的糜蛋白酶(在WO 2005/052161和WO 2005/
052146中描述)。

[0105] 金属蛋白酶的实例包括在WO 2007/044993中描述的中性金属蛋白酶(例如衍生自解淀粉芽孢杆菌的那些)，以及例如在WO 2015/158723和WO 2016/075078中描述的金属蛋白酶。

[0106] 有用的蛋白酶的实例是在WO 89/06279、WO 92/19729、WO 96/34946、WO 98/20115、WO 98/20116、WO 99/11768、WO 01/44452、WO 03/006602、WO 2004/003186、WO 
2004/041979、WO 2007/006305、WO 2011/036263、WO 2014/207227、WO 2016/087617和WO 
2016/174234中描述的蛋白酶变体。优选的蛋白酶变体可以例如包含选自由以下组成的组的一个或多个突变：S3T、V4I、S9R、S9E、A15T、S24G、S24R、K27R、N42R、S55P、G59E、G59D、N60D、N60E、V66A、N74D、S85R、A96S、S97G、S97D、S97A、S97SD、S99E、S99D、S99G、S99M、S99N、S99R、S99H、S101A、V102I、V102Y、V102N、S104A、G116V、G116R、H118D、H118N、A120S、S126L、P127Q、S128A、S154D、A156E、G157D、G157P、S158E、Y161A、R164S、Q176E、N179E、S182E、Q185N、A188P、G189E、V193M、N198D、V199I、Q200L、Y203W、S206G、L211Q、L211D、N212D、N212S、M216S、A226V、K229L、Q230H、Q239R、N246K、S253D、N255W、N255D、N255E、L256E、L256D T268A和R269H，其中位置编号对应于WO 2016/001449的SEQ ID NO:1所示的迟缓芽孢杆菌蛋白酶的位置。具有这些突变中的一个或多个的蛋白酶变体优选是WO 2016/001449的SEQ ID NO:1所示的迟缓芽孢杆菌蛋白酶( 也称为枯草杆菌蛋白酶309)的变体或WO 
2016/001449的SEQ ID NO:2所示的解淀粉芽孢杆菌蛋白酶(BPN')的变体。这样的蛋白酶变体优选地与WO 2016/001449的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少80％序列同一性。

[0107] 另一种目的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的碱性蛋白酶(如例如在WO 91/02792中所述)及其变体(这些变体例如在WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147、EP 
1921148和WO 2016/096711中描述)。

[0108] 可替代地，蛋白酶可以是具有WO 2004/067737的SEQ ID NO:1的TY145蛋白酶的变体，例如在与WO 2004/067737的SEQ ID NO:1的位置27、109、111、171、173、174、175、180、182、184、198、199和297对应的一个或多个位置处包含取代的变体，其中所述蛋白酶变体与WO 2004/067737的SEQ ID NO:1具有至少75％但少于100％的序列同一性。目的TY145变体描述于例如WO 2015/014790、WO 2015/014803、WO 2015/014804、WO 2016/097350、WO 
2016/097352、WO 2016/097357和WO 2016/097354中。

[0109] 优选的蛋白酶的实例包括：

[0110] (a)包含选自由以下组成的组的两个或更多个取代的WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的变体：S9E、N43R、N76D、Q206L、Y209W、S259D和L262E，例如具有取代S9E、N43R、N76D、V205I、Q206L、Y209W、S259D、N261W和L262E，或具有取代S9E、N43R、N76D、N185E、S188E、Q191N、A194P、Q206L、Y209W、S259D和L262E的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；

[0111] (b)WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的多肽的具有突变S99SE的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；

[0112] (c)WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的多肽的具有突变S99AD的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；

[0113] (d)WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的多肽的具有取代Y167A+R170S+A194P的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；

[0114] (e)WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的多肽的具有取代S9R+A15T+V68A+N218D+Q245R的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；

[0115] (f)WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的多肽的具有取代S9R+A15T+G61E+V68A+A194P+V205I+Q245R+N261D的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；

[0116] (g)WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的多肽的具有取代S99D+S101R/E+S103A+V104I+G160S的变体；例如，WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的具有取代S3T+V4I+S99D+
S101E+S103A+V104I+G160S+V205I的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID 
NO:2的编号；

[0117] (h)WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的多肽的具有取代S24G+S53G+S78N+S101N+G128A/S+Y217Q的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；

[0118] (i)以登录号BER84782披露于GENESEQP中的多肽，其对应于WO 2017/210295中的SEQ ID NO:302；

[0119] (j)WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的多肽的具有取代S99D+S101E+S103A+V104I+S156D+G160S+L262E的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；

[0120] (k)WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的多肽的具有取代S9R+A15T+G61E+V68A+N76D+S99G+N218D+Q245R的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；

[0121] (l)WO 2016/001449的SEQ ID NO:1的多肽的具有取代V68A+S106A的变体，其中位置编号基于WO 2016/001449的SEQ ID NO:2的编号；以及

[0122] (m)WO 2004/067737的SEQ ID NO:1的多肽的具有取代S27K+N109K+S111E+S171E+S173P+G174K+S175P+F180Y+G182A+L184F+Q198E+N199+T297P的变体，其中位置编号基于WO 
2004/067737的SEQ ID NO:1的编号。

[0123] 合适的可商购的蛋白酶包括以下列商品名出售的那些： DuralaseTM、TM TM
Durazym 、 Ultra、 Ultra、Primase 、
Ultra、
Ultra、 Blaze 100T、Blaze
125T、Blaze 150T、Blaze 200T、
Uno、 In和 Excel(诺维信公司(Novozymes 
TM TM
A/S))，以下列商品名出售的那些：Maxatase 、Maxacal 、 Ox、
TM TM exTM TM
OxP、 FN2 、FN3 、FN4 、 Excellenz  P1000、
TM TM TM
Excellenz  P1250、Eraser 、 P100、Purafect Prime、Preferenz P110 、
TM TM TM
Effectenz P1000 、 Effectenz P1050 、 Ox、Effectenz   P2000、
TM TM
Purafast 、 Opticlean 和 (丹斯尼克公司(Danisco)/杜邦公司
(DuPont))、BLAP(在US 5352604的图29中显示的序列)及其变体(汉高公司(Henkel AG))、以及来自花王株式会社(Kao)的KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶)。

[0124] 脂肪酶和角质酶

[0125] 合适的脂肪酶和角质酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体酶或蛋白质工程化的突变体酶。实例包括来自嗜热丝孢菌属(Thermomyce)，例如来自如EP 258068和EP 305216中描述的疏绵状嗜热丝孢菌(T.lanuginosus)(早先命名为疏棉状腐质霉(Humicola lanuginosa))的脂肪酶；来自腐质霉属(Humicola)，例如特异腐质霉
(H.insolens)(WO 96/13580)的角质酶；来自假单胞菌属(Pseudomonas)的菌株(这些中的一些现在改名为伯克霍尔德菌属(Burkholderia))，例如产碱假单胞菌(P.alcaligenes)或类产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)(EP 218272)、洋葱假单胞菌(P.cepacia)(EP 
331376)、假单胞菌属物种(P.sp.)菌株SD705(WO 95/06720和WO 96/27002)、威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO 96/12012)的脂肪酶；GDSL‑型链霉菌属(Streptomyces)脂肪酶(WO 10/065455)；来自稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)的角质酶(WO 10/107560)；来自门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)的角质酶(US 5,389,536)；来自褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412)；嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)脂肪酶(WO 11/084417)；来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO 11/
084599)；以及来自灰色链霉菌(Streptomyces griseus)(WO 11/150157)和始旋链霉菌
(S.pristinaespiralis)(WO 12/137147)的脂肪酶。

[0126] 其他实例是脂肪酶变体，例如EP407225、WO92/05249、WO94/01541、WO94/25578、WO95/14783、WO95/30744、WO95/35381、WO95/22615、WO96/00292、WO97/04079、WO97/07202、WO00/34450、WO00/60063、WO01/92502、WO07/87508以及WO09/109500中描述的那些。

[0127] 优选的商业脂肪酶产品包括LipolaseTM、LipexTM、LipolexTM和LipocleanTM(诺维信公司)、Lumafast(最初来自杰能科公司(Genencor))和Lipomax(最初来自吉斯特‑博克德斯公司(Gist‑Brocades))。

[0128] 仍其他实例是有时称为酰基转移酶或过水解酶的脂肪酶，例如与南极假丝酵母脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO09/67279)以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体(特别是来自亨斯迈纺织品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业化产品Gentle Power Bleach中所用的S54V变体)(WO 10/
100028)。

[0129] 淀粉酶

[0130] 合适的淀粉酶可以是α‑淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以是细菌或真菌来源的。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。淀粉酶包括例如从芽孢杆菌属，例如地衣芽孢杆菌的特定菌株(更详细地描述于GB 1,296,839中)获得的α‑淀粉酶。

[0131] 合适的淀粉酶包括具有WO 95/10603中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或与SEQ ID NO:3具有90％序列同一性的其变体。优选的变体描述于WO 94/02597、WO 94/18314、WO 97/
43424中以及WO 99/019467的SEQ ID NO:4中，如在以下位置的一个或多个中具有取代的变体：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、
209、211、243、264、304、305、391、408和444。

[0132] 不同的合适的淀粉酶包括具有WO 02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或与SEQ ID NO:6具有90％序列同一性的其变体。SEQ ID NO:6的优选的变体是在位置181和182处具有缺失并且在位置193处具有取代的那些。

[0133] 其他合适的淀粉酶是包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的衍生自解淀粉芽孢杆菌的α‑淀粉酶的残基1‑33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中的地衣芽孢杆菌α‑淀粉酶的残基36‑483的杂合α‑淀粉酶或其具有90％序列同一性的变体。此杂合α‑淀粉酶的优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有取代、缺失或插入的那些：G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209、和Q264。包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的衍生自解淀粉芽孢杆菌的α‑淀粉酶的残基1‑33和SEQ ID NO:4的残基36‑483的杂合α‑淀粉酶的最优选变体是具有以下取代的变体：

[0134] M197T；

[0135] H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S；或

[0136] G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。

[0137] 另外的合适的淀粉酶是具有WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或与SEQ ID NO:6具有90％序列同一性的其变体。SEQ ID NO:6的优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有取代、缺失、或插入的那些：R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216和K269。特别优选的淀粉酶是在位置R181和G182、或位置H183和G184中具有缺失的那些。

[0138] 可以使用的另外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的那些淀粉酶，或其与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7具有90％序列同一性的变体。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、或SEQ ID NO:7的优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有取代、缺失或插入的那些：140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304、和476，使用WO 96/023873的SEQ ID 2进行编号。更优选的变体是在选自181、182、183、和184的两个位置(如181和182、182和
183、或位置183和184)中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、或SEQ ID NO:7的最优选的淀粉酶变体是在位置183和184中具有缺失并且在位置140、195、206、243、260、304、和476中的一个或多个位置处具有取代的那些。

[0139] 可以使用的其他淀粉酶是具有WO 08/153815的SEQ ID NO:2、WO 01/66712中的SEQ ID NO:10，或与WO 08/153815的SEQ ID NO:2具有90％序列同一性的其变体，或与WO 
01/66712中的SEQ ID NO:10具有90％序列同一性的其变体的淀粉酶。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有取代、缺失或插入的那
些：176、177、178、179、190、201、207、211、和264。

[0140] 另外的合适的淀粉酶是具有WO 09/061380的SEQ ID NO:2的淀粉酶或与SEQ ID NO:2具有90％序列同一性的其变体。SEQ ID NO:2的优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有C‑末端截短、和/或取代、缺失或插入的那些：Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444、和G475。SEQ ID NO:2的更优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有取代的那些：Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E、以及G475K，和/或在位置R180和/或S181或T182和/或G183中具有缺失的那些。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：

[0141] N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；

[0142] N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K；

[0143] S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；或

[0144] S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K，其中这些变体是C‑末端截短的，并且任选地进一步包含在位置243处的取代和/或在位置180和/或位置181处的缺失。

[0145] 另外的合适的淀粉酶是具有WO 13184577的SEQ ID NO:1的淀粉酶或与SEQ ID NO:1具有90％序列同一性的其变体。SEQ ID NO:1的优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有取代、缺失或插入的那些：K176、R178、G179、T180、G181、E187、N192、M199、I203、S241、R458、T459、D460、G476和G477。SEQ ID NO:1的更优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有取代的那些：K176L、E187P、N192FYH、M199L、I203YF、S241QADN、R458N、T459S、D460T、G476K、以及G477K，和/或在位置R178和/或S179或T180和/或G181中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：

[0146] E187P+I203Y+G476K

[0147] E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K

[0148] 其中这些变体任选地进一步包含在位置241处的取代和/或在位置178和/或位置179处的缺失。

[0149] 另外的合适的淀粉酶是具有WO 10104675的SEQ ID NO:1的淀粉酶或与SEQ ID NO:1具有90％序列同一性的其变体。SEQ ID NO:1的优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有取代、缺失或插入的那些：N21、D97、V128、K177、R179、S180、I181、G182、M200、L204、E242、G477和G478。SEQ ID NO:1的更优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置处具有取代的那些：N21D、D97N、V128I、K177L、M200L、L204YF、E242QA、G477K、以及G478K，和/或在位置R179和/或S180或I181和/或G182中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：

[0150] N21D+D97N+V128I

[0151] 其中这些变体任选地进一步包含在位置200处的取代和/或在位置180和/或位置181处的缺失。

[0152] 其他合适的淀粉酶是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α‑淀粉酶或与SEQ ID NO:12具有至少90％序列同一性的变体。优选的淀粉酶变体是在WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的以下位置中的一个或多个位置处具有取代、缺失或插入的那些：R28、R118、N174；R181、G182、D183、G184、G186、W189、N195、M202、Y298、N299、K302、S303、N306、R310、N314；
R320、H324、E345、Y396、R400、W439、R444、N445、K446、Q449、R458、N471、N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有取代R118K、N195F、R320K和R458K的变体，以及另外在一个或多个选自下组的位置处具有取代的变体：M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345、和A339，最优选的是另外地在所有这些位置处具有取代的变体。

[0153] 其他实例是淀粉酶变体，例如WO 2011/098531、WO 2013/001078和WO 2013/001087中所述的那些。

[0154] 可商购的淀粉酶是DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM、StainzymeTM、Stainzyme TM TM TM TM TMPlus 、Natalase 、Liquozyme X和BAN (来自诺维信公司)，和Rapidase 、Purastar /
TM
Effectenz 、Powerase、Preferenz S1000、Preferenz S100和Preferenz S110(来自杰能科国际有限公司(Genencor International Inc.)/杜邦公司)。

[0155] 纤维素酶

[0156] 合适的纤维素酶包括细菌或真菌来源的酶的单组分和混合物。还设想到了化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。纤维素酶可以例如是单组分内切‑1,4‑β‑葡聚糖酶(又称为内切葡聚糖酶)、或单组分内切‑1,4‑β‑葡聚糖酶的混合物。

[0157] 合适的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、毁丝霉属(Myceliophthora)、镰孢属、梭孢壳属(Thielavia)、木霉属(Trichoderma)、和枝顶孢属(Acremonium)的那些。示例性纤维素酶包括来自特异腐质霉(US 4,435,307)或来自木霉属(例如里氏木霉(T.reesei)或绿色木霉(T.viride))的真菌纤维素酶。其他合适的纤维素酶来自梭孢壳属，例如在WO 96/29397中描述的土生梭孢壳霉(Thielavia terrestris)或在US 5,648,263、US 5,691,178、US 5,776,757、WO 89/09259、和WO 91/17244中披露的由嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)和尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)产生的真菌
纤维素酶。如WO 02/099091和JP 2000210081中所述，来自芽孢杆菌属的纤维素酶也是相关的。合适的纤维素酶是具有护理益处的碱性或中性纤维素酶。纤维素酶的实例描述于EP 0 
495 257、EP 0 531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中。其他实例是如描述于WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307中的那些纤维素酶变体。

[0158] 其他纤维素酶是具有以下序列的内切‑β‑1,4‑葡聚糖酶，该序列与WO 2002/099091的SEQ ID NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97％的同一性，或具有以下序列的家族44木葡聚糖酶，该序列与WO 2001/062903的SEQ ID NO:2的位置40‑559具有至少60％的同一性。

[0159] 可商购的纤维素酶包括 Premium、Classic、 (诺维信公司)、 Puradax HA、和Puradax EG(可从杰能科
TM
国际公司获得)、以及KAC‑500(B) (花王株式会社(Kao Corporation))。

[0160] 甘露聚糖酶

[0161] 合适的甘露聚糖酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学或遗传修饰的突变体。甘露聚糖酶可以是家族5或26的碱性甘露聚糖酶。它可以是来自芽孢杆菌属或腐质霉属的野生型，特别是来自粘琼脂芽孢杆菌(B.agaradhaerens)、地衣芽孢杆菌
(B.licheniformis)、嗜碱芽孢杆菌(B.halodurans)、克劳氏芽孢杆菌(B.clausii)、或特异腐质霉。合适的甘露聚糖酶描述于WO 1999/064619中。可商购的甘露聚糖酶是Mannaway(诺维信公司)。

[0162] 核酸酶

[0163] 合适的核酸酶包括脱氧核糖核酸酶(DNA酶)和核糖核酸酶(RNA酶)，它们是分别催化DNA或RNA主链中磷酸二酯键的水解切割从而降解DNA和RNA的任何酶。根据活性的位点有两种主要的分类。外切核酸酶从末端消化核酸。内切核酸酶作用于靶分子中间的区域。核酸酶优选为DNA酶，其优选可获自微生物，优选细菌；特别地，可获自芽孢杆菌属的物种的DNA酶是优选的；特别地，可获自食物芽孢杆菌(Bacillus cibi)、枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的DNA酶是优选的。这些DNA酶的实例在WO 2011/098579、WO 2014/087011和WO 2017/060475中描述。

[0164] 分散蛋白

[0165] 合适的分散蛋白是例如在生物膜中发现的具有氨基己糖苷酶活性的多肽，EC 3.2.1.，其催化N‑乙酰基‑葡糖胺聚合物(聚‑N‑乙酰葡糖胺)的β‑1,6‑糖苷键的水解。

[0166] 过氧化物酶/氧化酶

[0167] 合适的过氧化物酶优选是由国际生物化学与分子生物学联合会(IUBMB)命名委员会(Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry and 
Molecular Biology)陈述的酶分类EC 1.11.1.7，或衍生自其中的表现出过氧化物酶活性的任何片段构成的过氧化物酶。

[0168] 合适的过氧化物酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自拟鬼伞属(Coprinopsis)，例如来自灰盖拟鬼伞(C.cinerea)的过氧化物酶(EP 179,486)，及其变体，如WO 93/24618、WO 95/10602以及WO 98/15257中所述的那些。

[0169] 合适的过氧化物酶还包括卤代过氧化物酶，例如氯过氧化物酶、溴过氧化物酶以及表现出氯过氧化物酶或溴过氧化物酶活性的化合物。根据其对卤素离子的特异性将卤代过氧化物酶进行分类。氯过氧化物酶(E.C.1.11.1.10)催化从氯离子形成次氯酸盐。卤代过氧化物酶可以是氯过氧化物酶。优选地，卤代过氧化物酶是钒卤代过氧化物酶，即含钒酸盐的卤代过氧化物酶。在优选方法中，将含钒酸盐的卤代过氧化物酶与氯离子来源组合。

[0170] 合适的氧化酶特别地包括由酶分类EC 1.10.3.2所构成的任何漆酶或衍生自其的表现出漆酶活性的任何片段、或表现出类似活性的化合物，例如儿茶酚氧化酶(EC 
1.10.3.1)、邻氨基苯酚氧化酶(EC 1.10.3.4)或胆红素氧化酶(EC 1.3.3.5)。

[0171] 固体洗涤剂组合物

[0172] 本发明还提供了固体洗涤剂组合物，该固体洗涤剂组合物包含本发明的粒子和一个或多个另外的清洁组合物(洗涤剂)组分的组合，如下所述。另外的组分的选择处于技术人员的能力范围内并且包括常规的成分，包括下文所阐述的示例性非限制性组分。这样的洗涤剂组合物可以基本上不含二氧化钛。

[0173] 另外的洗涤剂组分的选择可以包括(用于纺织品护理)待清洁的纺织品的类型、污垢的类型和/或程度、进行清洁时的温度、以及洗涤剂产品的配制的考虑。尽管根据特定的功能性对以下提及的组分由通用标题进行分类，但是这并不被解释为限制，因为如将被普通技术人员所理解，组分可以包含另外的功能性。

[0174] 在一个实施例中，本发明涉及ADW(自动餐具洗涤)组合物，该组合物包含一种或多种另外的ADW组合物组分。另外的组分的选择处于技术人员的能力范围内并且包括常规的成分，包括下文所阐述的示例性非限制性组分。

[0175] 固体洗涤剂组合物可基本上由可生物降解的材料(基本上是生物基的)组成。在优选的实施例中，根据USDA认证的生物基产品(使用ASTM D6866测量生物基含量)，固体洗涤剂组合物是>95％生物基的；更优选>97％生物基，并最优选>99％生物基。

[0176] 表面活性剂

[0177] 清洁组合物可以包含一种或多种表面活性剂，它们可以是阴离子的和/或阳离子的和/或非离子的和/或半极性的和/或兼性离子的，或其混合物。在特别的实施例中，洗涤剂组合物包括表面活性剂系统(包含多于一种表面活性剂)，例如一种或多种非离子表面活性剂和一种或多种阴离子表面活性剂的混合物。在一个实施例中，洗涤剂包含至少一种阴离子表面活性剂比至少一种非离子表面活性剂，阴离子表面活性剂与非离子表面活性剂的重量比可以为10:1至1:10。在一个实施例中，阴离子表面活性剂的量高于非离子表面活性剂的量，例如阴离子表面活性剂与非离子表面活性剂的重量比可以为10:1至1.1:1或5:1至
1.5:1。阴离子表面活性剂与非离子表面活性剂的量也可以相等并且重量比为1:1。在一个实施例中，非离子表面活性剂的量高于阴离子表面活性剂的量，并且重量比可以为1:10至
1:1.1。阴离子表面活性剂与非离子表面活性剂的重量比优选为10:1至1:10，如5:1至1:5，或5:1至1:1.2。优选地，非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂的重量分数为0至0.5或0至
0.2，因此如果重量分数为0，则可以存在或不存在非离子表面活性剂，但是如果存在非离子表面活性剂，则非离子表面活性剂的重量分数优选为阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂总重量的至多50％或至多20％。轻垢洗涤剂通常包含比阴离子表面活性剂更多的非离子表面活性剂，并且其中非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂的分数优选为0.5至0.9。一种或多种表面活性剂的总重量典型地以按重量计约0.1％至约60％，例如约1％至约40％，或约3％至约20％，或约3％至约10％的水平存在。基于所希望的清洁应用来选择该一种或多种表面活性剂，并且该一种或多种表面活性剂可以包括本领域中已知的任何一种或多种常规表面活性剂。当被包括在其中时，洗涤剂将通常含有按重量计约1％至约40％的阴离子表面活性剂，例如约5％至约30％，包括约5％至约15％、或约15％至约20％、或约20％至约
25％的阴离子表面活性剂。阴离子表面活性剂的非限制性实例包括硫酸盐和磺酸盐，典型地以钠盐或钾盐可用，或单乙醇胺(MEA，2‑氨基乙‑1‑醇)盐或三乙醇胺(TEA，2,2',2”‑次氮基三乙‑1‑醇)盐；特别是直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体，如支链烷基苯磺酸盐(BABS)和苯基链烷磺酸盐；烯烃磺酸盐，特别是α‑烯烃磺酸盐(AOS)；烷基硫酸盐(AS)，特别是脂肪醇硫酸盐(FAS)，即伯醇硫酸盐(PAS)，例如十二烷基硫酸盐；醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES，也称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)；石蜡磺酸盐(PS)，包括链烷‑1‑磺酸盐和仲链烷磺酸盐(SAS)；酯磺酸盐，包括磺化脂肪酸甘油酯和α‑磺基脂肪酸甲酯(α‑SFMe或SES或MES)；烷基琥珀酸或烯基琥珀酸，如十二碳烯基/十四碳烯基琥珀酸(DTSA)；磺基琥珀酸的二酯和单酯；氨基酸的脂肪酸衍生物。此外，可以包括脂肪酸盐(皂)。

[0178] 当被包括在其中时，该洗涤剂将通常含有按重量计从约1％至约40％的阳离子表面活性剂，例如从约0.5％至约30％，特别是从约1％至约20％、从约3％至约10％，如从约
3％至约5％、从约8％至约12％或从约10％至约12％。阳离子表面活性剂的非限制性实例包括烷基二甲基乙醇季胺(ADMEAQ)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、二甲基二硬脂酰氯化铵(DSDMAC)、以及烷基苄基二甲基铵、烷基季铵化合物、烷氧基化季铵(AQA)化合物、酯季铵及其组合。

[0179] 当被包括在其中时，该洗涤剂将通常含有按重量计从约0.2％至约40％的非离子表面活性剂，例如从约0.5％至约30％，特别是从约1％至约20％、从约3％至约10％，如从约
3％至约5％、从约8％至约12％或从约10％至约12％。非离子表面活性剂的非限制性实例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)(例如AEO系列如AEO‑7)、醇丙氧基化物(特别是丙氧基化脂肪醇(PFA)、乙氧基化醇和丙氧基化醇)、烷氧基化脂肪酸烷基酯(如乙氧基化和/或丙氧基化脂肪酸烷基酯(尤其是乙氧基甲酯，MEE))、烷基多糖苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡糖胺的N‑酰基N‑烷基衍生物(葡糖酰胺(GA)、或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA))，以及可以商品名SPAN和TWEEN获得的产品、及其组合。

[0180] 当被包括在其中时，该洗涤剂将通常含有按重量计从约0.01％至约10％的半极性表面活性剂。半极性表面活性剂的非限制性实例包括氧化胺(AO)，如烷基二甲基氧化胺，特别是N‑(椰油基烷基)‑N,N‑二甲基氧化胺和N‑(牛脂烷基)‑N,N‑双(2‑羟乙基)氧化胺及其组合。

[0181] 当被包括在其中时，该洗涤剂将通常含有按重量计约0.01％至约10％的兼性离子表面活性剂。兼性离子表面活性剂的非限制性实例包括甜菜碱，如烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱、及其组合。

[0182] 可以使用另外的生物基表面活性剂，例如其中表面活性剂是基于糖的非离子表面活性剂，其可以是己基‑β‑D‑麦芽吡喃糖苷、硫代麦芽吡喃糖苷或环状麦芽吡喃糖苷，例如EP 2516606 B1中所述。

[0183] 助洗剂和共助洗剂

[0184] 洗涤剂组合物可以含有按重量计约0‑65％(如约5％至约50％)的洗涤剂助洗剂或共助洗剂、或其混合物。在餐具洗涤洗涤剂中，助洗剂的水平典型地在40％‑65％的范围内，特别是50％‑65％的范围内。助洗剂和/或共助洗剂可以特别是与Ca和Mg形成水溶性复合物的螯合试剂。可以利用本领域已知的用于在清洁洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。

[0185] 助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐如碳酸钠、可溶性硅酸盐如偏硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自科莱恩特公司(Clariant)的SKS‑6)、乙醇胺如2‑氨基乙‑1‑醇(MEA)、二乙醇胺(DEA，也称为2,2’‑亚氨基二乙‑1‑醇)、三乙醇胺(TEA，也称为2,2',2”‑次氮基三乙‑1‑醇)以及(羧甲基)菊粉(CMI)、及其组合。

[0186] 该洗涤剂组合物还可以含有按重量计从约0‑50％，如约5％至约30％的洗涤剂共助洗剂。洗涤剂组合物可以包括单独或与助洗剂(例如沸石助洗剂)组合的共助洗剂。共助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物，如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性实例包括柠檬酸盐、螯合剂(例如氨基羧酸盐、氨基聚羧酸盐、和膦酸盐)、以及烷基琥珀酸、或烯基琥珀酸。另外的特定实例包括2,2',2”‑次氮基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二琥珀酸(IDS)、乙二胺‑N,N'‑二琥珀酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸‑N,N‑二乙酸(GLDA)、1‑羟基乙烷‑1,1‑二基双(膦酸)(HEDP)、乙二胺四亚甲基四(膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五亚甲基(膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N‑(2‑羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸‑N‑单乙酸(ASMA)、天冬氨酸‑N,N‑二乙酸(ASDA)、天冬氨酸‑N‑单丙酸(ASMP)、亚氨基二琥珀酸(IDA)、N‑(2‑磺甲基)天冬氨酸(SMAS)、N‑(2‑磺乙基)天冬氨酸(SEAS)、N‑(2‑磺甲基)谷氨酸(SMGL)、N‑(2‑磺乙基)谷氨酸(SEGL)、N‑甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、丝氨酸‑N,N‑二乙酸(SEDA)、异丝氨酸‑N,N‑二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸‑N,N‑二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸‑N,N‑二乙酸(ANDA)、磺胺酸‑N,N‑二乙酸(SLDA)、牛磺酸‑N,N‑二乙酸(TUDA)以及磺甲基‑N,N‑二乙酸(SMDA)、N‑(2‑羟乙基)亚乙基二胺‑N,N',N”‑三乙酸(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、氨基三亚甲基(膦酸)(ATMP)、及其组合和盐。另外的示例性助洗剂和/或共助洗剂描述于例如WO 09/102854、US 5977053中。

[0187] 本发明的固体洗涤剂组合物可以包含强螯合助洗剂；例如至少0.1％w/w、至少0.5％w/w或至少1％w/w的强螯合助洗剂。强螯合助洗剂的实例是EDTA、EDTMP、NTMP、DTPMP、MGDA、NTA、HEDP、STPP、IDS和GLDA。

[0188] 螯合助洗剂不同于沉淀助洗剂，是因为当最初在中性pH下该助洗剂以足够结合在7°dH水硬度(德国硬度)的水溶液中的所有钙离子的量使用时，没有形成显著量的沉淀。强助洗剂被分类为高效率螯合剂，其能够以高于5，特别是高于6或高于7的阳离子/螯合剂复
2+
合体的对数稳定常数(Log KCa)有力地结合二价阳离子(例如，Ca )。在0.1M的离子强度和
25℃的温度下确定稳定常数。

[0189] 漂白系统

[0190] 该清洁组合物按重量计可以含有0‑50％(如1％‑40％、如1％‑30％、如约1％至约20％)的漂白系统。可以利用包含本领域已知的用于在清洁洗涤剂中使用的组分的任何氧基漂白系统。合适的漂白系统组分包括过氧化氢源；过酸和过酸源(漂白活化剂)；和漂白催化剂或促进剂。

[0191] 合适的过氧化氢源是无机过酸盐，包括碱金属盐如过碳酸钠和过硼酸钠(通常是一水合物或四水合物)，以及过氧化氢‑尿素。

[0192] 过酸可以是(a)直接作为预形成过酸掺入，或(b)从过氧化氢和漂白活化剂(过水解)在洗涤液中原位形成，或(c)从过氧化氢和过水解酶和后者合适的底物(例如酯)在洗涤液中原位形成。

[0193] 合适的预形成过酸包括但不限于过氧羧酸(如过氧苯甲酸)及其环取代的衍生物、过氧‑α‑萘甲酸、过氧邻苯二甲酸、过氧月桂酸、过氧硬脂酸、ε‑邻苯二甲酰亚氨基过氧己酸[邻苯二甲酰亚氨基过氧己酸(PAP)]、和邻‑羧基苯甲酰氨基过氧己酸；脂肪族和芳族二过氧二羧酸，如二过氧十二烷二酸，二过氧壬二酸，二过氧癸二酸，二过氧巴西基酸，2‑癸基二过氧丁二酸，以及二过氧邻苯二甲酸、‑间苯二甲酸和‑对苯二甲酸；过亚氨酸(perimidic acid)；过氧单硫酸；过氧二硫酸；过氧磷酸；过氧硅酸；以及所述化合物的混合物。应理解的是，在一些情况下，所提及的过酸可能最好是作为合适的盐添加，如碱金属盐(例如)或碱土金属盐。

[0194] 合适的漂白活化剂包括属于酯、酰胺、酰亚胺、腈类或酸酐类别的那些，以及适用时，其盐。合适的实例是四乙酰基乙二胺(TAED)、4‑[(3,5,5‑三甲基己酰基)氧基]苯‑1‑磺酸钠(ISONOBS)、4‑(十二酰基氧基)苯‑1‑磺酸钠(LOBS)、4‑(癸酰基氧基)苯‑1‑磺酸钠、4‑(癸酰基氧基)苯甲酸(DOBA)、4‑(壬酰基氧基)苯‑1‑磺酸钠(NOBS)和/或披露于WO 98/17767中的那些。目的漂白活化剂的特别家族披露于EP 624154中并且在该家族中特别优选的是乙酰柠檬酸三乙酯(ATC)。ATC或短链甘油三酯(像三醋精)具有以下优点：它们是环境友好的。而且，乙酰柠檬酸三乙酯和三醋精在储存时在产品中具有良好的水解稳定性，并且是有效的漂白活化剂。最后，ATC是多功能的，因为在过水解反应中释放的柠檬酸盐可以作为助洗剂起作用。

[0195] 漂白催化剂和促进剂

[0196] 该漂白系统还可以包括漂白催化剂或促进剂。可以用于本发明的组合物中的漂白催化剂的一些非限制性实例包括草酸锰、乙酸锰、锰胶原、钴‑胺催化剂、和锰三氮杂环壬烷(MnTACN)催化剂；特别优选的是锰与1,4,7‑三甲基‑1,4,7‑三氮杂环壬烷(Me3‑TACN)或1,2,4,7‑四甲基‑1,4,7‑三氮杂环壬烷(Me4‑TACN)，特别是Me3‑TACN的络合物，如双核锰络合物[(Me3‑TACN)Mn(O)3Mn(Me3‑TACN)](PF6)2、和[2,2',2”‑次氨基三(乙烷‑1,2‑二基氮烷基亚基‑κN‑甲基亚基)三酚并‑κ3O]锰(III)。这些漂白催化剂还可以是其他金属化合物：如铁或钴络合物。

[0197] 在其中过酸源包括在内的一些实施例中，可以使用具有下式之一的有机漂白催化剂或漂白促进剂：

[0198] (i)

[0199] (ii)

[0200] (iii)及其混合物；

[0201] 其中R1独立地是含有从9至24个碳的支链烷基基团或含有从11至24个碳的直链烷基基团，优选地R1独立地是含有从9至18个碳的支链烷基基团或含有从11至18个碳的直链烷基基团，更优选地R1独立地选自由以下组成的组：2‑丙基庚基、2‑丁基辛基、2‑戊基壬基、
2‑己基癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、异壬基、异癸基、异十三烷基以及异十五烷基。

[0202] 其他示例性漂白系统描述于如WO 2007/087258、WO 2007/087244、WO 2007/087259、EP 1 867 708(维生素K)和WO 2007/087242中。

[0203] 聚合物

[0204] 洗涤剂可以含有按重量计0.005％‑10％(例如0.5％‑5％、2％‑5％、0.5％‑2％、或0.2％‑1％)的聚合物。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何聚合物。该聚合物可以作为如以上提及的共助洗剂起作用，或可以提供抗再沉积、纤维保护、污垢释放、染料转移抑制、油脂清洁、和/或消泡特性。一些聚合物可以具有多于一种的以上提及的特性和/或多于一种的下文提及的基序。示例性聚合物包括(羧甲基)纤维素(CMC)，聚(乙烯醇)(PVA)，聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷)(PEG或PEO)，乙氧基化的聚(乙亚胺)，(羧甲基)菊粉(CMI)，羧酸酯聚合物和聚羧酸酯，如聚丙烯酸酯、马来酸/丙烯酸共聚物、丙烯酸酯/苯乙烯共聚物、聚(天冬氨酸)、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物，疏水修饰的CMC(HM‑CMC)，硅酮，对苯二甲酸和低聚乙二醇的共聚物，聚(对苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯对苯二甲酸乙二酯)的共聚物(PET‑POET)，聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)，聚(乙烯基咪唑)(PVI)，聚(乙烯吡啶‑N‑氧化物)(PVPO或PVPNO)，以及共聚(乙烯基咪唑/乙烯吡咯烷酮)(PVPVI)。合适的实例包括PVP‑K15，PVP‑K30，来自亚什兰公司(Ashland)Aqualon的ChromaBond S‑400、
ChromaBond S‑403E和Chromabond S‑100，以及来自巴斯夫公司(BASF)的 HP 
165、 HP 50(分散剂)、 HP 53(分散剂)、 HP 59(分散剂)、
HP 56(染料转移抑制剂)、 HP 66K(染料转移抑制剂)。另外的示例性
聚合物包括磺化的聚羧酸酯、聚环氧乙烷和聚环氧丙烷(PEO‑PPO)、以及乙氧基硫酸二季铵盐。特别优选的聚合物是来自巴斯夫公司的乙氧基化的均聚物 HP 20，其有助于
防止洗涤液中的污垢再沉积。另外的示例性聚合物包括磺化的聚羧酸酯、环氧乙烷‑环氧丙烷共聚物(PEO‑PPO)、PEG与醋酸乙烯酯的共聚物、和乙氧基硫酸二季铵盐或季铵化硫酸乙氧基化六亚甲基二胺。其他示例性聚合物披露于例如WO 2006/130575中。还考虑了以上提及的聚合物的盐。

[0205] 辅料

[0206] 还可以利用本领域中已知的用于在衣物洗涤/ADW/硬表面清洁洗涤剂中使用的任何洗涤剂组分。其他任选的洗涤剂组分包括防腐蚀剂、防缩剂、抗污垢再沉积剂、抗皱剂、杀细菌剂、黏合剂、腐蚀抑制剂、崩解剂/崩解试剂、染料、酶稳定剂(包括原硼酸、硼酸盐、CMC、和/或多元醇，例如丙二醇)、织物调理剂(包括粘土)、填充剂/加工助剂、荧光增白剂/光学增亮剂、增泡剂、泡沫(泡)调节剂、香料、污垢悬浮剂、软化剂、抑泡剂、暗锈抑制剂、以及芯吸剂，单独或组合使用。可以利用本领域中已知的用于在衣物洗涤/ADW/硬表面清洁洗涤剂中使用的任何成分。这样的成分的选择完全在技术人员的技术范围内。

[0207] 分散剂

[0208] 本发明的洗涤剂组合物还可以含有分散剂。特别地，粉末洗涤剂可以包含分散剂。合适的水溶性有机材料包括均聚的或共聚的酸或其盐，其中聚羧酸包含被不多于两个碳原子彼此分开的至少两个羧基。合适的分散剂例如描述于Powdered Detergents[粉末洗涤
剂],Surfactant science series[表面活性剂科学系列]第71卷，Marcel Dekker,Inc.[马塞尔德克尔公司]中。

[0209] 染料转移抑制剂

[0210] 本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种染料转移抑制剂。合适的聚合物染料转移抑制剂包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮聚合物、多胺N‑氧化物聚合物、N‑乙烯吡咯烷酮和N‑乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯噁唑烷酮和聚乙烯基咪唑、或其混合物。当在主题组合物中存在时，染料转移抑制剂可以按该组合物的重量计以从约0.0001％至约10％、从约0.01％至约5％或甚至从约0.1％至约3％的水平存在。

[0211] 荧光增白剂

[0212] 本发明的洗涤剂组合物将优选地还含有另外的组分，这些组分可以给正在清洁的制品着色，如荧光增白剂或光学增亮剂。当存在时，增亮剂的水平优选为约0.01％至约0.5％。在本发明的组合物中可以使用合适的用于在衣物洗涤剂组合物中使用的任何荧光增白剂。最常用的荧光增白剂是属于以下类别的那些：二氨基芪‑磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和二苯基‑联苯乙烯基衍生物。荧光增白剂的二氨基芪‑磺酸衍生类型的实例包括以下的钠盐：4,4'‑双‑(2‑二乙醇氨基‑4‑苯胺‑s‑三嗪‑6‑基氨基)芪‑2,2'‑二磺酸盐、4,
4'‑双‑(2,4‑二苯胺基‑s‑三嗪‑6‑基氨基)芪‑2.2'‑二磺酸盐、4,4'‑双‑(2‑苯胺基‑4‑(N‑甲基‑N‑2‑羟基‑乙基氨基)‑s‑三嗪‑6‑基氨基)芪‑2,2'‑二磺酸盐、4,4'‑双‑(4‑苯基‑1,2,
3‑三唑‑2‑基)芪‑2,2'‑二磺酸盐以及5‑(2H‑萘并[1,2‑d][1,2,3]三唑‑2‑基)‑2‑[(E)‑2‑苯基乙烯基]苯磺酸钠。优选的荧光增白剂是可从汽巴–嘉基股份有限公司(Ciba‑Geigy AG)(巴塞尔，瑞士)获得的天来宝(Tinopal)DMS和天来宝CBS。天来宝DMS是4,4'‑双‑(2‑吗啉代‑4‑苯胺基‑s‑三嗪‑6‑基氨基)芪‑2,2'‑二磺酸盐的二钠盐。天来宝CBS是2,2'‑双‑(苯基‑苯乙烯基)‑二磺酸盐的二钠盐。还优选的荧光增白剂是可商购的Parawhite KX，由印度孟买的派拉蒙矿物与化学品公司(Paramount Minerals and Chemicals)供应。适合用于本发明中使用的其他荧光剂包括1‑3‑二芳基吡唑啉和7‑氨烷基香豆素。

[0213] 合适的荧光增亮剂水平包括从约0.01、从0.05、从约0.1或甚至从约0.2wt％的较低水平至0.5或甚至0.75wt％的较高水平。

[0214] 污垢释放聚合物

[0215] 本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种污垢释放聚合物，这些聚合物帮助从织物(如棉和基于聚酯的织物)去除污垢，特别是从基于聚酯的织物去除疏水性污垢。污垢释放聚合物可以例如是基于非离子型或阴离子型对苯二甲酸盐的聚合物、聚乙烯基己内酰胺和相关共聚物、乙烯基接枝共聚物、聚酯聚酰胺，参见例如Powdered Detergents[粉末洗涤剂],Surfactant science series[表面活性剂科学系列]，第71卷，第7章，马塞尔·德克尔公司。其他类型的污垢释放聚合物是包含核芯结构和附接至该核芯结构的多个烷氧基化基团的两亲性烷氧基化油脂清洁聚合物。核芯结构可以包含聚烷基亚胺结构或聚烷醇胺结构，如WO 2009/087523中详细所述的(通过引用并入本文)。而且，随机接枝共聚物是合适的污垢释放聚合物。合适的接枝共聚物更详细地描述于WO 2007/138054、WO 2006/108856以及WO 2006/113314中(通过引用并入本文)。其他污垢释放聚合物是取代的多糖结构，尤其是取代的纤维素结构，如修饰的纤维素衍生物，如EP 1867808或WO 2003/040279中所述的那些(将二者都通过引用并入本文)。合适的纤维素聚合物包括纤维素、纤维素醚、纤维素酯、纤维素酰胺、及其混合物。合适的纤维素聚合物包括阴离子修饰的纤维素、非离子修饰的纤维素、阳离子修饰的纤维素、兼性离子修饰的纤维素、及其混合物。合适的纤维素聚合物包括甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、酯羧甲基纤维素、及其混合物。

[0216] 抗再沉积剂

[0217] 本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种抗再沉积剂，如羧甲基纤维素(CMC)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚氧乙烯和/或聚乙二醇(PEG)、丙烯酸的均聚物、丙烯酸和马来酸的共聚物、和乙氧基化的聚乙烯亚胺。以上在污垢释放聚合物下所描述的基于纤维素的聚合物还可以作为抗再沉积剂起作用。

[0218] 其他合适的辅料包括但不限于防缩剂、抗皱剂、杀细菌剂、黏合剂、载剂、染料、酶稳定剂、织物软化剂、填充剂、泡沫调节剂、水溶助剂、香料、色素和抑泡剂。

[0219] 本发明的另外实施例包括：

[0220] 实施例1.一种粒子，其包含

[0221] (a)蛋白质；

[0222] (b)亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐；以及

[0223] (c)单糖或二糖，该单糖或二糖是还原糖或可以被降解为还原糖。

[0224] 实施例2.如前一项实施例所述的粒子，其包含大于0.01％w/w的量的该单糖或二糖。

[0225] 实施例3.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含大于0.05％w/w的量的该单糖或二糖。

[0226] 实施例4.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含大于0.1％w/w的量的该单糖或二糖。

[0227] 实施例5.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中该单糖或二糖是葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖或蔗糖。

[0228] 实施例6.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中该单糖或二糖是葡萄糖、果糖和/或蔗糖。

[0229] 实施例7.如前述实施例中任一项所述的粒子，其进一步包含转化酶。

[0230] 实施例8.如前述实施例中任一项所述的粒子，其进一步包含葡糖苷酶。

[0231] 实施例9.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中该单糖或二糖是葡萄糖、果糖、乳糖和/或麦芽糖。

[0232] 实施例10.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中该单糖或二糖是还原糖；优选地使用PAHBAH测定以葡萄糖当量对该还原糖的量进行测量。

[0233] 实施例11.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中该单糖或二糖是单糖。

[0234] 实施例12.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中该单糖或二糖是葡萄糖和/或果糖。

[0235] 实施例13.如前述实施例中任一项所述的粒子，其进一步包含小于0.5％w/w的二氧化钛。

[0236] 实施例14.一种粒子，其包含

[0237] (a)蛋白质；

[0238] (b)亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐；以及

[0239] (c)小于0.5％w/w的二氧化钛。

[0240] 实施例15.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含大于0.01％w/w的量的该亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐。

[0241] 实施例16.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含大于0.05％w/w的量的该亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐。

[0242] 实施例17.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含大于0.1％w/w的量的该亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐。

[0243] 实施例18.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含小于10％w/w的量的该亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐。

[0244] 实施例19.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含小于5％w/w的量的该亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐。

[0245] 实施例20.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含小于1％w/w的量的该亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐。

[0246] 实施例21.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含0.1％‑25％w/w的量的该蛋白质。

[0247] 实施例22.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含0.5％‑25％w/w的量的该蛋白质。

[0248] 实施例23.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含1％‑25％w/w的量的该蛋白质。

[0249] 实施例24.如前述实施例中任一项所述的粒子，其包含5％‑25％w/w的量的该蛋白质。

[0250] 实施例25.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中通过发酵产生该蛋白质。

[0251] 实施例26.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中将该蛋白质和该亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐在连续基质中均匀地混合。

[0252] 实施例27.如前一项实施例所述的粒子，其包含核心和包衣，并且该核心包含该连续基质，优选地由其组成。

[0253] 实施例28.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中该蛋白质是酶，并且该蛋白质的量是活性酶蛋白(AEP)。

[0254] 实施例29.如前一项实施例所述的粒子，其中该酶选自由以下组成的组：蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、核酸酶、分散蛋白、过氧化氢酶、过水解酶、和氧化酶。

[0255] 实施例30.如前一项实施例所述的粒子，其中该酶选自由以下组成的组：蛋白酶(枯草杆菌蛋白酶)、脂肪酶、淀粉酶(α‑淀粉酶)、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、DNA酶、分散蛋白和过氧化氢酶。

[0256] 实施例31.如前一项实施例所述的粒子，其中该酶是蛋白酶(枯草杆菌蛋白酶)或淀粉酶(α‑淀粉酶)。

[0257] 实施例32.如前一项实施例所述的粒子，其中该酶是枯草杆菌蛋白酶或α‑淀粉酶。

[0258] 实施例33.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中该亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐是偏亚硫酸氢盐。

[0259] 实施例34.如前述实施例中任一项所述的粒子，其中该亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐是偏亚硫酸氢钠或偏亚硫酸氢钾。

[0260] 实施例35.如前述实施例中任一项所述的粒子，其进一步包含小于0.1％w/w的二氧化钛。

[0261] 实施例36.如前述实施例中任一项所述的粒子，其不包含二氧化钛。

[0262] 实施例37.如前述实施例中任一项所述的粒子，其在储存之后表现出白度损失减少；优选地在37℃和70％ RH下储存8周之后，具有小于5的δ亨特白度。

[0263] 实施例38.如前述实施例中任一项所述的粒子，该粒子在37℃和70％ RH下储存8周之后具有的亨特白度与不包含亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐的相同粒子的亨特白度相比，高大于5单位。

[0264] 实施例39.一种用于制备如前述实施例中任一项所述的粒子的方法，该方法包括

[0265] (a)制备通过发酵产生的蛋白质与亚硫酸盐、亚硫酸氢盐或偏亚硫酸氢盐的均匀混合物；以及

[0266] (b)从该均匀混合物制备粒子。

[0267] 实施例40.如前一项实施例所述的方法，其中该蛋白质从包含单糖或二糖的发酵液回收，该单糖或二糖是还原糖或可以被降解为还原糖；优选地葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖或蔗糖。

[0268] 实施例41.如前一项实施例所述的方法，其中该发酵液包含至少0.1％w/w、优选地至少1％w/w的量的该蛋白质。

[0269] 实施例42.如前述实施例中任一项所述的方法，其中将该蛋白质进行絮凝。

[0270] 实施例43.如前述实施例中任一项所述的方法，其中将该蛋白质进行膜过滤。

[0271] 实施例44.如前述实施例中任一项所述的方法，其中该蛋白质从包含转化酶或蔗糖酶的发酵液回收。

[0272] 实施例45.如前述实施例中任一项所述的方法，其中该蛋白质从包含葡糖苷酶的发酵液回收。

[0273] 实施例46.如前述实施例中任一项所述的方法，其中该蛋白质从包含二糖、和转化酶或蔗糖酶的发酵液回收。

[0274] 实施例47.如前述实施例中任一项所述的方法，其中该蛋白质从包含蔗糖、和转化酶或蔗糖酶的发酵液回收。

[0275] 实施例48.如前述实施例中任一项所述的方法，其中该蛋白质是通过喷雾干燥或冷冻干燥蛋白质溶液制备的固体。

[0276] 实施例49.一种用于改善蛋白质粒子在储存之后的白度的方法，该方法包括

[0277] (a)制备如前述实施例中任一项所述的粒子；以及

[0278] (b)将该粒子储存超过2周。

[0279] 实施例50.一种粉末洗涤剂，其包含表面活性剂和(洗涤剂)助洗剂以及如前述实施例中任一项所述的粒子。

[0280] 实施例51.如前一项实施例所述的粉末洗涤剂，其中该表面活性剂的最终浓度是0.5％‑40％w/w，优选地0.5％‑25％w/w。

[0281] 实施例52.如前述实施例中任一项所述的粉末洗涤剂，其中该洗涤剂助洗剂的最终浓度是0.5％‑40％w/w，优选地0.5％‑25％w/w。

[0282] 实施例53.如前述实施例所述的粉末洗涤剂，其中该蛋白质的最终浓度是0.0001％‑1％w/w，优选地0.0005％‑0.5％w/w。

[0283] 实施例54.如前述实施例所述的粉末洗涤剂，其中该表面活性剂是糖脂；优选地槐糖脂、鼠李糖脂、海藻糖脂或甘露糖赤藓糖醇脂。

[0284] 实例

[0285] 化学品是至少试剂级的商品。

[0286] 白度

[0287] 使用本领域所熟知的Hunter L,a,b标度在亨特立公司(HunterLab)的ColorFlex传感器(型号45°/0°)上测量颗粒颜色。

[0288] 这些粒子的白度以亨特白度指数进行测量，WIH＝L‑3b。就在产生这些粒子之后(初始)，以及储存8周之后，测量亨特白度指数。

[0289] 还原糖测定(PAHBAH)

[0290] 试剂：

[0291] ‑乙酸铋(III)：0.55g/L

[0292] ‑四水合酒石酸钠钾：5.0g/L

[0293] ‑PAHBAH(4‑羟基苯酰肼)：1.5g/L

[0294] ‑2％w/w NaOH：添加至100％

[0295] 用于样品和参照(空白)的稀释剂：

[0296] ‑去离子水

[0297] 反应：

[0298] ‑100份样品(用稀释剂适当稀释)

[0299] ‑75份试剂

[0300] ‑在60℃下孵育30分钟

[0301] ‑用分光光度计读取405nm处的光密度(OD405)

[0302] 参照：

[0303] ‑葡萄糖(读取按2倍稀释的5个点，例如20–10–5–2.5和1.25ppm葡萄糖)＝OD405(葡萄糖+试剂)

[0304] ‑使用稀释剂作为试剂重复稀释。从以上葡萄糖读数中减去这个值＝OD405(葡萄糖+空白)

[0305] ‑使用试剂的空白稀释剂(从葡萄糖参照和所有样品中减去信号)＝OD405(空白+试剂)

[0306] 样品：

[0307] ‑按2倍稀释，直至葡萄糖中的至少3个点在标准曲线内＝OD405(样品+试剂)

[0308] ‑使用稀释剂作为试剂重复稀释。从样品读数中减去这个值＝OD405(样品+空白)[0309] 计算的数据：

[0310] ‑葡萄糖信号：OD405(葡萄糖+试剂)‑OD405(葡萄糖+空白)‑OD405(空白+试剂)[0311] ‑样品信号：OD405(样品+试剂)‑OD405(样品+空白)‑OD405(空白+试剂)

[0312] ‑通过葡萄糖信号和样品信号(以及通过0.0)拟合直线(浓度对信号)

[0313] ‑从斜率计算样品的还原糖的量(以葡萄糖当量(ppm))。

[0314] 实例1

[0315] 酶粒子的褐变减少

[0316] 通过在WO 2011/134809的实例1中所述的程序，使用高剪切混合器和流化床包衣机制备酶粒子/颗粒。将PEG 4000和高岭土的降尘膜应用于如US 4,106,991的实例22中所述的混合器中。

[0317] 表1.

[0318]

[0319]

[0320] 表2.通过将包衣应用于表1中的未包衣的粒子而制备的包衣粒子。

[0321]

[0322] 将包衣粒子和未包衣粒子在敞口的玻璃容器中于37℃和70％相对湿度下储存8周。

[0323] 表3.未包衣粒子的葡萄糖当量(ppm)。

[0324]   A1 A2 B1 B2 C1 C2 D1 D2初始 2792 3515 255 235 7613 6063 221 196
8周之后 3510 ‑ 462 ‑ ‑ ‑ ‑ ‑

[0325] 在储存期间，还原糖的水平由于非还原糖的分解而增加。

[0326] 表4.未包衣粒子的亨特白度(A2、B2、C2和D2含有偏亚硫酸氢盐)。

[0327]   A1 A2 B1 B2 C1 C2 D1 D2初始 46 45 33 38 35 38 37 39
8周之后 37 44 21 34 6 30 29 37
差(δ) 9 1 12 4 29 8 8 2

[0328] 表5.包衣粒子的亨特白度(A2C、B2C、C2C和D2C含有偏亚硫酸氢盐)。

[0329]   A1C A2C B1C B2C C1C C2C D1C D2C初始 41 42 39 41 36 39 36 38
8周之后 31 43 29 39 9 30 29 37
差(δ) 10 ‑1 10 2 25 9 7 1

[0330] 从表4和表5中可以清楚地看出，当粒子含有偏亚硫酸氢盐时，在储存之后亨特白度的减少(δ)降低。因此，添加偏亚硫酸氢盐减少了这些粒子在储存之后的褐变。添加硫代硫酸盐并没有相同效应(见于B1、D1、B1C和D1C)。