技术领域
[0001] 本发明属于中药制剂技术领域，具体涉及一种降脂养生中药组合物及应用。
相关背景技术
[0002] 高血脂症是机体脂质代谢紊乱的临床表现之一，同时也是冠心病，动脉粥样硬化等相关疾病的病理基础，我国有数目庞大的高血脂人群。临床上的主要考察指标为TG(甘油三酯)、TC(总胆固醇)、LDL‑C(低密度脂蛋白)和HDL‑C(高密度脂蛋白)。研究表明，TG在脂蛋白的调控以及相关的脂质代谢中扮演着关键角色，血液中TG和TC浓度的升高会增加冠状动脉疾病的发病机率，同时血液中LDL‑C浓度的升高会使血液变稠，增加动脉粥样硬化的风险。而大量的研究表明HDL‑C具有抵抗冠状动脉疾病的作用，HDL‑C浓度每升高0.025mmol/L，患冠状动脉疾病的风险则会降低2％‑4％。
[0003] 雪菊是菊科金鸡菊属雪菊的头状花序，味甘，性平，归大肠经。其具有清热解毒、活血化瘀、和胃健脾、降血脂、软化血管等作用，民间多选用雪菊当茶饮用。现已明确雪菊中含有黄酮类、酚酸类、倍半萜类和C14‑聚乙炔苷等多种化学成分，但对其应用尤其是与其他中药组分的联合应用相对较少。
具体实施方式
[0034] 下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
[0035] 实施例1
[0036] 本实施例提供一种雪菊提取物及其制备方法。
[0037] (1)50g雪菊与1L水混合，浸泡30min。
[0038] (2)浸泡后的雪菊在85℃下进行水提，同时进行超声辅助提取和微波辅助提取，提取的时间为1.5h，超声功率为30KHz，微波功率为800W，结束后抽滤得粗提液。
[0039] (3)用大孔树脂D101对粗提液进行分离纯化，喷雾干燥得所述雪菊提取物。
[0040] 实施例2
[0041] 本实施例提供一种雪菊提取物及其制备方法。
[0042] (1)50g雪菊与1L水混合，浸泡30min。
[0043] (2)浸泡后的雪菊在80℃下进行水提，同时进行超声辅助提取和微波辅助提取，提取的时间为1h，超声功率为40KHz，微波功率为1000W，结束后抽滤得粗提液。
[0044] (3)用大孔树脂D102对粗提液进行分离纯化，冷冻干燥得所述雪菊提取物。
[0045] 实施例3
[0046] 本实施例提供一种雪菊提取物及其制备方法。
[0047] (1)50g雪菊与1L水混合，浸泡30min。
[0048] (2)浸泡后的雪菊在95℃下进行水提，同时进行超声辅助提取和微波辅助提取，提取的时间为2h，超声功率为20KHz，微波功率为600W，结束后抽滤得粗提液。
[0049] (3)用大孔树脂AB‑8对粗提液进行分离纯化，沸腾干燥得所述雪菊提取物。
[0050] 实施例4
[0051] 本实施例提供一种雪菊提取物及其制备方法。其与实施例1不同之处仅在于步骤(2)水提时仅进行超声辅助提取，超声辅助提取的频率为40KHz，水提时间2.5h，其他工艺参数保持不变。
[0052] 实施例5
[0053] 本实施例提供一种雪菊提取物及其制备方法。其与实施例1不同之处仅在于步骤(2)水提时仅进行微波辅助提取，微波辅助提取的频率为1000W，水提时间2.5h，其他工艺参数保持不变。
[0054] 应用例1
[0055] 本应用例提供一种降脂养生中药组合物，制备方法如下：
[0056] 将实施例1制得的雪菊提取物20份、黄芪粉15份、茯苓粉15份和山药粉10份混匀即可。
[0057] 应用例2
[0058] 本应用例提供一种降脂养生中药组合物，制备方法如下：
[0059] 将实施例2制得的雪菊提取物10份、黄芪粉10份、茯苓粉10份和山药粉6份混匀即可。
[0060] 应用例3
[0061] 本应用例提供一种降脂养生中药组合物，制备方法如下：
[0062] 将实施例3制得的雪菊提取物30份、黄芪粉21份、茯苓粉23份和山药粉14份混匀即可。
[0063] 应用例4
[0064] 本应用例提供一种降脂养生中药组合物，制备方法与应用例1的区别仅在于将实施例1制得的雪菊提取物等量替换为实施例4制得的雪菊提取物。其他保持不变。
[0065] 应用例5
[0066] 本应用例提供一种降脂养生中药组合物，制备方法与应用例1的区别仅在于将实施例1制得的雪菊提取物等量替换为实施例5制得的雪菊提取物。其他保持不变。
[0067] 对比应用例1
[0068] 本对比应用例提供一种降脂养生中药组合物，其与应用例1不同之处仅在于不包含黄芪粉，黄芪粉减少的部分按比例分配至雪菊提取物、茯苓粉和山药粉中，其他条件保持不变，制备方法参照应用例1。
[0069] 对比应用例2
[0070] 本对比应用例提供一种降脂养生中药组合物，其与应用例1不同之处仅在于不包含茯苓粉，茯苓粉减少的部分按比例分配至雪菊提取物、黄芪粉和山药粉中，其他条件保持不变，制备方法参照应用例1。
[0071] 对比应用例3
[0072] 本对比应用例提供一种降脂养生中药组合物，其与应用例1不同之处仅在于不包含山药粉，山药粉减少的部分按比例分配至雪菊提取物、黄芪粉和茯苓粉中，其他条件保持不变，制备方法参照应用例1。
[0073] 对比应用例4
[0074] 本对比应用例提供一种降脂养生中药组合物，其与应用例1不同之处仅在于不包含雪菊提取物，雪菊提取物减少的部分按比例分配至山药粉、黄芪粉和茯苓粉中，其他条件保持不变，制备方法参照应用例1。
[0075] 测试例1
[0076] 动物分组与模型建立：
[0077] 取SD雄性大鼠72只，正常饲养10天后，按体重随机分成12组，每组6只。空白组：喂饲基础饲料，每天经胃灌服饮用水1mL/100g；高脂模型组：喂饲高脂饲料(配方为：含有100g/L胆固醇、200g/L猪油、20g/L胆酸钠和10g/L丙基硫氧嘧啶的脂肪乳剂，4℃保存，使用前加热融化)，每天经胃灌服饮用水1mL/100g；高脂+辛伐他汀(2mg/kg)组：喂饲高脂饲料，每天经胃灌服含有辛伐他汀的饮用水1mL/100g；高脂+各样品组：喂饲高脂饲料，每天经胃灌服含有各组样品(10mg/kg)的饮用水1mL/100g；每日1次，连续喂养45天，实验期间各组自由采食饮水。在第45天，采血分别测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL‑C)含量。测试结果如表1所示(单位均为mmol/L)。
[0078] 表1
[0079]
[0080] 由表1数据结果可知：与空白组相比，模型组的TC，TG，LDL‑C水平显著升高；与模型组相比，各干预组的TC和TG水平均有显著下降。结果表明，本发明所涉及的中药组合物可以降低高脂症小鼠的TC和TG水平，具有改善血脂的作用。
[0081] 测试例2
[0082] 雪菊提取物中活性成分的鉴定：
[0083] HPLC的条件：
[0084] 高效液相色谱仪：沃特世(Waters)1525高效液色谱仪；
[0085] 色谱柱：Water Xbridge TM C18(4.6mm×250mm，5μm)；
[0086] 柱温：35℃；
[0087] 检测波长：200‑400nm；
[0088] 流动相：A：乙腈，B：0.1％磷酸‑水，梯度洗脱。
[0089] 从雪菊提取物中共分离鉴定出了43个化合物，并对分离得到的43个化合物，并将其与对照品进行对比，通过比对出峰时间和紫外光谱图确认6个入血成分分别为异奥卡宁‑7‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷、(2S)‑圣草酚‑5‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷、(Z)‑6,7,3′,4′‑四羟基橙酮‑6‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷、马里苷、3,5‑O‑二咖啡酰奎宁酸和3,4‑O‑二咖啡酰奎宁酸。
[0090] 为明确降脂活性成分，选取血移成分异奥卡宁‑7‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷、(Z)‑6,7,3′,4′‑四羟基橙酮‑6‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷和马里苷进行了高脂饲料致金黄地鼠高血脂模型的药效试验。
[0091] 实验对象为雄性金黄地鼠60只，根据血脂水平及雄性金黄地鼠的体重，随机分为6组：
[0092] (S1)空白组；
[0093] (S2)高脂模型组；
[0094] (S3)高脂+异奥卡宁‑7‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷组；
[0095] (S4)高脂+(Z)‑6,7,3′,4′‑四羟基橙酮‑6‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷组；
[0096] (S5)高脂+马里苷组；
[0097] (S6)高脂+辛伐他汀组。
[0098] 高脂模型组的建立：
[0099] 造模方法：模型组使用高脂饲料进行喂养(配方为：含有100g/L胆固醇、200g/L猪油、20g/L胆酸钠和10g/L丙基硫氧嘧啶的脂肪乳剂，4℃保存，使用前加热融化)。每周对金黄地鼠进行取血，取血前禁食不禁水12h，将血样4℃离心10min，3000r/min，取上层血清进行TC、TG、HDL‑C、LDL‑C测定，使用统计学软件进行统计分析，若正常组与模型组对比，P<0.05或P<0.01，则造模成功。
[0100] 将各组样品与饲料进行混合，各组饲料中样品的质量均为10mg/kg。S3‑S6各组金黄地鼠每天给样品1次，连续7天连续对金黄地鼠给药，给药量与金黄地鼠的体重有关，为5mg/kg，给药体积均为0.2mL/10g。各组的结果如表2所示(以平均值呈现，单位均为mmol/L)。
[0101] 表2
[0102] 组别 TC TG HDL‑C LDL‑C空白组 3.58 1.63 2.05 1.22
模型组 5.69 4.71 1.58 3.34
S3组 5.15 3.86 1.52 2.67
S4组 5.60 4.26 2.04 2.44
S5组 5.76 3.92 2.28 3.52
辛伐他汀组(S6) 3.87 2.49 2.02 1.94
[0103] 由表2数据结果可知：异奥卡宁‑7‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷能显著降低甘油三酯(TG)，总胆固醇(TC)以及低密度脂蛋白含量(LDL‑C)，此外马里苷可显著提升高密度脂蛋白含量(HDL‑C)。因此，可以初步确定雪菊提取物中的降血脂活性可能为其二氢黄酮苷，查尔酮和酚酸类成分。这些水溶性成分为雪菊做茶饮开发提供依据。
[0104] 申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细工艺流程，但本发明并不局限于上述详细工艺流程，即不意味着本发明必须依赖上述详细工艺流程才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
