技术领域
[0001] 本发明属于药品生产产物应用技术领域，涉及一种中成药生产产物的应用技术，具体为中药药渣的应用。
相关背景技术
[0002] 由何首乌、女贞子、桑椹、墨旱莲、白芍、黄芪、狗脊七味中药材制成的补益类中成药，中医用于滋养肝肾、补益气血，西医用于各类贫血的治疗；其在制作过程中会产生大量的药渣，该药渣中不仅含有大量粗纤维、粗脂肪、粗蛋白、矿物质、氨基酸等营养物质，还包含未提取完全的药用活性成分，包括黄酮类、萜类、甾类及苷类等，据统计，该药渣中含有的药用活性成分甚至超过30％。目前，传统的对于该药渣的处理方式基本上都是通过焚烧、填埋和堆放等，这种处理方式不仅会造成严重的环境污染，而且还会造成大量资源被浪费。因此，寻找一种科学合理的利用中药药渣资源，实现中药药渣的可持续性发展是亟需要解决的问题。
具体实施方式
[0029] 下面结合附图及实施例对本发明的技术方案进行进一步地解释说明，但本发明并不限于以下说明的实施方式。
[0030] 实施例1
[0031] 本实施例中药药渣的应用，其可应用在制备动物饲料方面。具体的可以应用在制备猪饲料、牛饲料和羊饲料以及兔饲料等动物饲料。
[0032] 基于本实施的中药药渣制备而成的动物饲料原料或动物饲料添加剂，具体的可以是制备猪饲料原料或猪饲料添加剂、制备牛饲料原料或牛饲料添加剂、制备羊饲料原料或羊饲料添加剂或制备兔饲料原料或兔饲料添加剂等。
[0033] 优选的，本实施例的中药药渣在制备家禽家畜动物饲料方面的应用，进一步优选的，本实施例的中药药渣在制备兔科动物饲料方面的应用。具体的将中药药渣用作制备兔科动物饲料添加剂原料或兔科动物饲料添加剂；将该兔科动物饲料添加剂与预混浓缩饲料、苜蓿草等混合制备兔科动物饲料。
[0034] 对本实施例的中药药渣的成分进行分析，其分析结果见表1，具体的分析方法为：
[0035] 1)按照下列成分及比例称取中药材或其饮片：
[0036] 取何首乌、女贞子、桑椹、墨旱莲、白芍、黄芪、狗脊适量，各药物重量占总重约5％‑25％。加水浸泡20‑40分钟后，煮沸，持续煎煮2次，每次1‑2小时，过滤，取药渣。将该药渣摊开晒干或烘干。
[0037] 2)将中药药渣打粉，称取0.05g的中药药渣粉末，加入50ml甲醇超声提取40min，过0.22μm微孔滤膜，即为供试样品。
[0038] 3)对步骤2)的供试样品进行液相色谱分析，具体的液相色谱分析条件为：使用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱，流动相为0.1％甲酸水(A)‑乙腈(B)，按梯度条件进行洗脱：0‑25min,2％‑10％B；25‑75min，10％‑24.5％B；75‑77min，24.5％‑40％B；77‑97min，40％B；
97‑102min，40％‑48％B；102‑132min，48％‑80％B；132‑133min，80％‑80.03％B；133‑
138min，80.03％‑2％B；138‑140min，2％B。进样量为5μl；流速为0.3ml/min；检测波长
254nm。
[0039] 表1：中药药渣含有的功能性成分
[0040]
[0041] 参见图1，中药药渣中含有三萜、黄酮、皂苷、氨基酸、维生素等多种类型的小分子化学成分，例如熊果酸、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、山奈素等，这些物质具有抗炎、抗氧化、调节免疫功能、调节肠道微生态和促进消化等活性。
[0042] 将中药药渣与现有的动物饲料进行对比分析，其分析结果见图1，中药药渣中富含碳水化合物、粗蛋白、粗脂肪和粗纤维等营养物质，其中，干物质含量与甘薯藤相近，高达95.28％；总有机物含量为86.53％，与豆粕相近。碳水化合物，高达到69.58％，高于麦麸和小麦；根据营养成分计算出中药药渣的总能量高达1674.75KJ/100g，高于常用的粗饲料原料如苜蓿草、提摩西草、甘薯藤、麦秸、稻杆等；表明中药药渣的营养价值高，药用活性成分丰富。
[0043] 实施例2
[0044] 本实施例中药药渣的应用，在实施例1的基础上，其可应用在改善兔科动物生产性能方面的应用。
[0045] 饲料制备和实验设计：
[0046] 将预混浓缩饲料、苜蓿草、中药药渣分别打成粗粉，用全自动饲料颗粒机制成4mm直径的圆柱形颗粒料，晾干备用。
[0047] 将12只180日龄新西兰家兔随机分为4组，分别为对照组(SXBRc)：饲喂70％浓缩饲料+30％苜蓿草；低比例添加组(SXBRl)：饲喂70％浓缩饲料、25％苜蓿草和5％中药药渣；中比例添加组(SXBRm)：饲喂70％浓缩饲料、20％苜蓿草和10％中药药渣；高比例添加组(SXBRh)：饲喂70％浓缩饲料、10％苜蓿草和20％中药药渣。每组3只动物。经过7天的适应期，正式开始饲喂实验，每只每天定量饲喂90g饲料，分四次喂完，自由饮水。60天后以戊巴比妥钠麻醉新西兰家兔，取血液以及各器官组织进行分析。
[0048] 该科动物生产性能分别从新西兰家兔的体重增量、料重比、屠宰率、滴水损失率等方面进行试验。
[0049] 参见图2和图3B，在饲喂过程中通过观察发现添加有中药药渣的饲料适口性良好，基本不影响新西兰家兔的采食量。且在饲喂过程中通过各组新西兰家兔体重增加趋势可知，高比例添加组体重增长速度总体高于对照组，二者在第44天、第54天以及第57天体重增重具有显著差异，因此，与对照组相比，添加20％的中药药渣能够在很大程度增加新西兰家兔体重。
[0050] 参见图3C，添加了中药药渣后的兔肉的屠宰率均大于对照组，即产肉性能的经济指标高；参见图3D，添加了中药药渣后的兔肉滴水损失率有降低趋势，即兔肉趋于紧致。
[0051] 综合比较可知，添加了中药药渣后新西兰家兔体重增加快，有利于缩短养殖过程；同时还可降低料重比，增加屠宰率，改善兔肉的品质。
[0052] 实施例3
[0053] 本实施例中药药渣的应用，在实施例1的基础上，其可应用在改善兔科动物抗氧化应激功能方面。
[0054] 饲料制备和实验设计：
[0055] 将预混浓缩饲料、苜蓿草、中药药渣分别打成粗粉，用全自动饲料颗粒机制成4mm直径的圆柱形颗粒料，晾干备用。
[0056] 将12只180日龄新西兰家兔随机分为4组，分别为对照组(SXBRc)：饲喂70％浓缩饲料+30％苜蓿草；低比例添加组(SXBRl)：饲喂70％浓缩饲料、25％苜蓿草和5％中药药渣；中比例添加组(SXBRm)：饲喂70％浓缩饲料、20％苜蓿草和10％中药药渣；高比例添加组(SXBRh)：饲喂70％浓缩饲料、10％苜蓿草和20％中药药渣。每组3只动物。经过7天的适应期，正式开始饲喂实验，每只每天定量饲喂90g饲料，分四次喂完，自由饮水。60天后以戊巴比妥钠麻醉新西兰家兔，取血液以及各器官组织进行分析。
[0057] 生物标志物测定：采集新西兰家兔全血制备血清，使用试剂盒分别对血清氧化应激指标总抗氧化能力(AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH‑Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)，肠道屏障功能标志物膦酸酯多糖(LPS)，免疫功能标志物IgA、IgG和IgM，造血功能4+
标志物促红细胞生成素(EPO)等进行测定；同时对新西兰家兔粪便中的常见污染物NH 、H2S进行测定。
[0058] 参见图4A‑图4D，添加了中药药渣对AOC活性基本不影响，但是GSH‑Px活性、SOD活性均有显著增加，尤其是SOD活性随着中药药渣含量的增大，其活性增加非常大，MDA活性随着中药药渣含量的增大而减小，由此可见，饲料中添加中药药渣可显著增加新西兰家兔的血清抗氧化因子水平，降低机体脂质过氧化水平。
[0059] 实施例4
[0060] 本实施例中药药渣的应用，在实施例1的基础上，其可应用在调节兔科动物肠道菌群方面。
[0061] 饲料制备和实验设计：
[0062] 将预混浓缩饲料、苜蓿草、中药药渣分别打成粗粉，用全自动饲料颗粒机制成4mm直径的圆柱形颗粒料，晾干备用。
[0063] 将12只180日龄新西兰家兔随机分为4组，分别为对照组(SXBRc)：饲喂70％浓缩饲料+30％苜蓿草；低比例添加组(SXBRl)：饲喂70％浓缩饲料、25％苜蓿草和5％中药药渣；中比例添加组(SXBRm)：饲喂70％浓缩饲料、20％苜蓿草和10％中药药渣；高比例添加组(SXBRh)：饲喂70％浓缩饲料、10％苜蓿草和20％中药药渣。每组3只动物。经过7天的适应期，正式开始饲喂实验，每只每天定量饲喂90g饲料，分四次喂完，自由饮水。60天后以戊巴比妥钠麻醉新西兰家兔，取新西兰家兔粪便进行分析。
[0064] 肠道菌群测序分析：收集新西兰家兔新鲜粪便置冰上保存，半小时内收集完毕后转移到‑80℃保存。提取粪便总DNA，利用1％琼脂糖凝胶电泳检测抽提的基因组DNA。对16SV3‑V4区(细菌，引物：GGACTACHVGGGTWTCTAAT)和ITS1区(真菌，引物：
CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA)进行PCR扩增，用Agencourt AMPure XP试剂盒纯化后建立Miseq文库，在Illumina MiSeq平台进行测序。下机数据利用Trimmomatic软件进行质控过滤，利用Flash、Pear进行双端拼接，使用UPARSE软件进行聚类(相似度阈值97％)，得到操作分类单元。
[0065] 为探讨中药药渣对肠道菌群的影响，分别对各组新西兰家兔粪便样本进行16SRNA以及ITS1进行基因测序分析。参见图5，韦恩图分析表明各处理组细菌群落大体相似，共有OTU数量约占总数的60％；而真菌各组之间相差较大，可能与OTU数量较少而个体差异较大有关。
[0066] 参见图6，添加了中药药渣可减弱肠道细菌多糖代谢和次级胆汁酸代谢通路，增强氯代烷烃和氯烯烃降解以及抗生素合成和抗药性相关代谢通路，意味着中药药渣能够影响新西兰家兔肠道消化代谢、肠道炎症以及肠道内环境的稳定性。同时通过对新西兰家兔粪便的分析，中药药渣在一定程度上降低了粪便铵态氮和硫化氢含量，有利于在集中饲养环境下减少这些有害代谢产物对健康的危害。即中药药渣能够改善新西兰家兔肠道细菌和真菌群落结构，改善肠道代谢功能，减少不良发酵几率，降低粪便中的有害代谢产物。
[0067] 实施例5
[0068] 本实施例中药药渣的应用，在实施例1的基础上，其可应用在促进兔科动物骨髓造血功能方面。
[0069] 饲料制备和实验设计：
[0070] 将预混浓缩饲料、苜蓿草、中药药渣分别打成粗粉，用全自动饲料颗粒机制成4mm直径的圆柱形颗粒料，晾干备用。
[0071] 将12只180日龄新西兰家兔随机分为4组，分别为对照组(SXBRc)：饲喂70％浓缩饲料+30％苜蓿草；低比例添加组(SXBRl)：饲喂70％浓缩饲料、25％苜蓿草和5％中药药渣；中比例添加组(SXBRm)：饲喂70％浓缩饲料、20％苜蓿草和10％中药药渣；高比例添加组(SXBRh)：饲喂70％浓缩饲料、10％苜蓿草和20％中药药渣。每组3只动物。经过7天的适应期，正式开始饲喂实验，每只每天定量饲喂90g饲料，分四次喂完，自由饮水。60天后以戊巴比妥钠麻醉新西兰家兔，取器官组织进行分析。
[0072] 取各组新西兰家兔股骨固定进行TUNEL检测进行骨髓造血功能考察：结合血常规分析与EPO试剂盒检测结果可见，中药药渣对新西兰家兔造血功能表现出积极影响，骨髓中凋亡细胞明显减少。
[0073] 上述实施例2‑5中兔科动物饲料中中药药渣的质量份添加量至少为5％，具体的可以是5％、10％、15％、20％、25％等。
[0074] 上述实施例2‑5中的兔科动物除了新西兰家兔之外，其还可以是蒙古兔、野兔、雪兔等，其中，对野兔也和雪兔进行和新西兰家兔同样的试验条件，分别进行生产性能测试、抗氧化应激功能测试以及肠道菌群测序分析和骨髓造血功能考察，其结果与新西兰家兔相同；表明添加有生血宝提取液沉淀物的饲料能够提高动物的表观消化率，增强动物的抗氧化应激能力、促进对碳水的消化作用以及减少骨髓细胞凋亡，增强骨髓造血功能。
[0075] 需要说明的是本发明内容中所描述的SXBR是指中药药渣。
[0076] 为了验证中药药渣的安全性，本发明从组织病理切片、血清生化指标以及血清免疫球蛋白几个方面对其潜在毒性进行表征。参见图7以及表2和表3，结果表明各组新西兰家兔脏器指数和血常规各项指标基本持平，组织病理切片未见异常，血清生化结果中除中比例添加组和高比例添加组血清尿素含量显著低于对照组之外，其余各项指标各组间均无显著差异。血清免疫球蛋白和LPS测定发现各组IgA、IgG、IgM以及反映肠道屏障功能的血清LPS含量均无显著差异。
[0077] 综合以上数据，在饲料中添加中药药渣并长期饲喂新西兰家兔，对其心、肝、脾、肺、肾等主要脏器功能、对机体免疫功能、对肠道屏障功能均无明显损伤作用，证明中药药渣作为食草动物饲料添加剂具有良好的安全性。
[0078] 表2：血清生化指标检测结果
[0079]
[0080] 表3：机体免疫功能检测结果
[0081]
