技术领域
[0001] 本发明属于蜂蜜鉴别领域，具体涉及一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法。
相关背景技术
[0002] 蜂蜜是蜜蜂采集植物花蜜或分泌物，与自身分泌物混合后经充分酿造而成的天然甜味物质。气味清香浓郁，味道纯真甜美。
[0003] 蜂蜜有成熟蜂蜜和非成熟蜂蜜之分。成熟蜂蜜是指经过蜜蜂充分酿造后的蜂蜜。蜜蜂把蜜酿造好后会集中储藏在蜂房中，并用蜂蜡封盖。此时取蜜必须用割蜜刀割除蜜盖，非常费工费事。这样的蜂蜜久放后会结晶(蜂蜜整体的凝结)，无需经过任何加工，并可长期保存而不变质。而非成熟蜂蜜没有经过充分的酿造，酿造时间短，蜂蜜中水分含量多，高分子糖没有完全分解，蜂酶含量低，蜜较稀，其营养价值远不如成熟蜂蜜。
[0004] 但由于蜂蜜没有成熟时蜜蜂没有把蜜封盖储藏，蜂农取蜜比较省事，所以大都不等到蜜成熟就取出。这样成本低、产量高，加上目前成熟蜂蜜的鉴别繁琐，用户不宜识别。因此，现在市场上的蜂蜜绝大多数不是成熟蜂蜜，而是非成熟蜂蜜经过加工浓缩得到的，严重扰乱市场秩序和损害消费者利益。而油菜蜂蜜占了蜂蜜市场的四成左右，因此本发明旨在提供一种较为方便准确的鉴别成熟油菜蜂蜜的方法。
具体实施方式
[0027] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。
[0028] 实施例1
[0029] 本实施例提供一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法，包括如下步骤：
[0030] S1、从蜂场采集天然封盖的成熟油菜蜂蜜作为待测样品
[0031] S2、待测样品预处理得到蜂蜜提取物
[0032] 1)称取待测油菜蜂蜜5g，将蜂蜜放入50mL离心管中，加入10mL纯水，超声溶解20min，得蜂蜜的水溶液；
[0033] 2)将SPE柱安装在固相萃取装置上，分别用5mL甲醇和5mL纯水淋洗，后加入蜂蜜溶液，蜂蜜中的有效物质被吸附在SPE柱填充物上；
[0034] 3)吸附有蜂蜜有效物质的SPE柱首先经10mL纯水淋洗两遍，然后用8mL甲醇洗脱，收集洗脱液；
[0035] 4)将所述洗脱液用氮吹仪浓缩至固形物，所述固形物经1mL甲醇超声溶解，移至1.5mL离心管中，用0.2μm滤膜过滤，得进样溶液，即蜂蜜提取物。
[0036] S3、样品检测
[0037] 采用安捷伦高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(Agilent 1290HPLC-Q-TOF/MS6545)进行检测，数据处理采用Agilent Masshunter工作站。
[0038] HPLC条件如下：
[0039] 色谱柱：Proshell 120EC-C18色谱柱(2.1mm×100mm，2.7μm)；
[0040] 流速：0.25mL/min；
[0041] 流动相：0.1％甲酸水溶液(A)，甲醇(B)；
[0042] 梯度洗脱：0-1min 5％B，1-6min 5％-55％B，6-20min 55％-95％B，20-26min 95％B；26-27min，5％B；
[0043] 进样量2μL；
[0044] 柱温：30℃。
[0045] Q-TOF/MS条件如下：
[0046] ESI负离子，气体温度(Gas Temp)：320℃；气体流速(Gas Flow):8L/min；喷雾气压力(Nebulizer)：40psi；毛细管电压：3500V；喷嘴电压：1000V；鞘气温度(Sheath Temp)：350℃；鞘气流速(Sheath Gas Flow)：11L/min；
[0047] 扫描方式：MS scan全扫描，质量数范围100-1700，参比实时校正。
[0048] 经过检测，成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析总离子图如图1中的B所示，成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析特征离子207.0663提取色谱图如图2所示。
[0049] 实施例2
[0050] 从蜂场采集未封盖的非成熟油菜蜂蜜作为待测样品，采用如实施1所述的方法对其进行检测，结果非成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析总离子图如图1中的A所示，非成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析特征离子207.0663提取色谱图如图3所示。
[0051] 从图2与图3的比较可知，207.07±0.01质量数准分子离子峰可以作为鉴别成熟油菜蜂蜜的特征峰，只有成熟油菜蜂蜜中才含有该特征峰，而非成熟油菜蜂蜜中是没有该特征峰的。经过多次重复试验，结果依然如此。
[0052] 虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
