[0001] 本发明涉及一种牛轮状病毒、牛冠状病毒二联灭活疫苗及其制备方法，属于兽用生物制品领域。

[0002] 犊牛腹泻是导致新生犊牛高死亡率的一种疾病，可造成严重的经济损失，其病原主要包括牛轮状病毒(Bovine Rotavirus,BRV)和牛冠状病毒(Bovine Coronavirus,BCV)。BRV属呼肠孤病毒科、轮状病毒属，为双股RNA病毒，多感染1月龄以内的犊牛，临床症状主要表现为水样腹泻、精神沉郁、食欲废绝、严重脱水与酸中毒。BCV属冠状病毒科、冠状病毒属，为单股正链RNA病毒，主要编码S、M、N、E和HE等5种蛋白，除导致犊牛腹泻外，亦可造成成年牛冬痢、出血性腹泻与各年龄段牛的呼吸道感染。BCV主要感染10日龄以内的犊牛，潜伏期1～2天，以排黄绿色稀便、血便为特征。BRV、BCV均能够单独引起犊牛腹泻，但当BRV、BCV混合感染或继发细菌、寄生虫感染后，可致死亡率上升，造成更严重的经济损失。

[0003] 通常情况下，BRV、BCV均可在患病犊牛的新鲜粪便、肠道内容物中分离得到，BRV可通过接种恒河猴肾细胞(MA-104)进行病毒分离，BCV常接种人结肠癌细胞(HCT-8)进行病毒的分离鉴定。但由于BRV的病毒分离比较困难，需经一定浓度的胰蛋白酶等蛋白水解酶处理后才能有效感染细胞。

[0004] 预防犊牛腹泻最好的措施是免疫疫苗，灭活疫苗安全性好，不存在散毒、毒力返强的风险，可用于怀孕牛的免疫，能够快速服务于市场，有广阔发展前景。