[0001] 本发明属于药物领域，涉及防治梗死性疾病的双胍衍生物，以及该双胍衍生物在制备防治梗死性疾病的药物中的应用。

[0002] 现如今，随人们生活方式及饮食结构的变化，以血栓为病理基础的血管性疾病已成为人类生命的最大威胁因素。目前，全世界约有4.15亿的糖尿病患者，且每年约有500万人死于糖尿病及其并发症，而其中约有320万糖尿病患者是死于其血栓型并发症。而目前，在临床上应用的抗血栓药，普遍存在着日益加重的耐受性和毒副影响，其中出血风险和胃肠道副作用是最为常见和最为严重的毒副作用。例如，临床上应用最为广泛的抗血栓药阿司匹林，其使用者可能出现严重出血的风险的概率为1％–4％，且使用者常常伴有胃肠道不适。经现有实验和临床数据证实，有5％–60％的患者对目前临床上常用的抗血栓药物会产生耐受性。因此，研究开发新型的低毒副作用、出血风险更低且抗血栓效果更好的抗血栓药，具有重大意义和价值。

[0003] 在对山羊豆降血糖效果研究的基础上，开发出了一种具有显著降血糖效果的双胍类衍生物—二甲双胍。自1957年以来，二甲双胍作为降血糖药在临床上的应用已有长达70年的历史，是全球目前使用最为广泛的一线口服降血糖药。已有循证医学证实，二甲双胍对糖尿病的治疗中，不仅能降低糖及改善血脂代谢，而且可以降低心血管性疾病的发病率和死亡率，但是还缺乏其具体作用形式和机制研究的报道。在前期研究中，我们已初步验证二甲双胍具有抑制血栓形成的作用，但是它的抗血栓作用与现有临床上常用抗血栓药物相比，效果并不明显。因此，有必要对二甲双胍进行结构改进，以期开发出抗血栓活性更优，出血风险更低的抗血栓药物。

[0020] 以下通过实施例对本发明提供的防治梗死性疾病的双胍衍生物及其应用作进一步说明。有必要指出，以下实施例只用于对本发明作进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，所属领域技术人员根据上述发明内容，对本发明做出一些非本质的改进和调整进行具体实施，仍属于发明保护的范围。

[0021] 因目前市场上，可购买的二甲双胍皆为二甲双胍的盐酸盐(盐酸二甲双胍)，为了得到二甲双胍的单体，要先对其进行除盐酸处理。除盐酸处理的方法如下：取16.5g盐酸二甲双胍(100mmol)、8.4g NaHCO3(100mmol)、300mL双蒸水于500mL烧瓶中室温下搅拌过夜，减压旋干，然后取500mL甲醇将其溶解，减压抽滤，收集滤液减压旋干，即可得到白色粉末状的二甲双胍单体(12.8g，产率99％)。

[0022] 实施例1

[0023] 本实施例中，合成胍基化二甲双胍衍生物，具体包括化合物1～4。

[0024] 1.合成化合物1：N-(4-二甲氨基苯亚甲基)二甲双胍

[0025] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.49g(10.0mmol)4-二甲氨基苯甲醛、150mL乙醇、2mL乙酸于250mL烧瓶中，在78℃条件下进行搅拌反应。TCL检测反应进程，约6小时后反应基本完全。加碳酸氢钠调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:
乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.3g白色粉末状的化合物1，产率为90％。
Rf为0.6(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0026] 对化合物1进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.24(d,J＝8.6Hz,2H),6.73(d,J＝8.9Hz,2H),5.61(s,1H),3.04(s,6H),2.89(s,6H)。

[0027] 13C NMR(100MHz,Methanol-d4)δ159.77(s,1H),158.51(s,1H),153.53(s,1H),129.07(s,1H),128.36(s,1H),114.04(s,1H),65.67(s,1H),41.15(s,1H),37.98(s,1H)。

[0028] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C13H21N6(M+H)+261.18277,found 261.18188。

[0029] 2.合成化合物2：N-(4-氰基苯亚甲基)二甲双胍

[0030] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.31g(10.0mmol)4-氰基苯甲醛、150mL乙醇、2mL乙酸于250mL烧瓶中，在78℃条件下进行搅拌反应。TCL检测反应进程，约6小时后反应基本完全。加碳酸氢钠调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.2g白色粉末状的化合物2，产率为89％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0031] 对化合物2进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.77(d,J＝8.5Hz,2H),7.61(d,J＝8.3Hz,2H),5.89(s,1H),3.08(s,6H)。

[0032] 13C NMR(100MHz,Methanol-d4)δ159.09(s,1H),157.72(s,1H),146.61(s,1H),134.15(s,1H),128.54(s,1H),119.34(s,1H),114.29(s,1H),64.09(s,1H),37.72(s,1H)。

[0033] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C12H15N6(M+H)+243.13582,found 243.13497。

[0034] 3.合成化合物3：N-(4-羟基苯亚甲基)二甲双胍

[0035] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.22g(10.0mmol)4-羟基苯甲醛、150mL乙醇、2mL乙酸于250mL烧瓶中，在78℃条件下进行搅拌反应。TCL检测反应进程，约6小时后反应基本完全。加碳酸氢钠调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到3.0g白色粉末状化合物3，产率为91％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0036] 对化合物3进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.24(d,J＝8.4Hz,2H),6.79(d,J＝8.7Hz,2H),5.64(s,1H),3.04(s,6H)。

[0037] 13C NMR(100MHz,Methanol-d4)δ160.05(s,1H),159.37(s,1H),158.12(s,1H),131.55(s,1H),129.27(s,1H),116.83(s,1H),65.13(s,1H),37.68(s,1H)。

[0038] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C11H16N5O(M+H)+334.13549,found 334.13466。

[0039] 4.合成化合物4：N-(乙磺酰基)二甲双胍

[0040] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.28g(10.0mmol)乙基磺酰氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.0g白色粉末状的化合物4，产率为
91％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0041] 对化合物4进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.94(s,6H),2.90(q,J＝7.4Hz,2H),1.17(t,J＝7.4Hz,3H)。

[0042] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ162.47(s,1H),153.22(s,1H),46.12(s,1H),37.03(s,1H),8.70(s,1H)。

[0043] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C6H16N5O2S(M+H)+222.10247,found 222.10178。

[0044] 实施例2

[0045] 本实施例中，合成磺胺化二甲双胍衍生物，具体包括化合物11～20。

[0046] 1.合成化合物11：N-(2,2,2-三氟乙基磺酰基)二甲双胍

[0047] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.82g(10.0mmol)2,2,2-三氟乙基磺酰氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.5g白色粉末状的化合物11，产率为90％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0048] 对化合物11进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.95(s,6H),2.92(s,2H)。

[0049] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ159.48(s),158.33(s),126.98-121.47(m),54.55-53.56(m),36.60(s)。

[0050] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C6H13F3N5OS(M+H)+276.07420,found 276.07331。

[0051] 2.合成化合物12：N-(环己烷磺酰基)二甲双胍

[0052] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.82g(10.0mmol)环己烷磺酰氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.5g白色粉末状的化合物12，产率为
91％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0053] 对化合物12进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.94(s,6H),2.78–2.70(m,1H),1.85–1.51(m,4H),1.35–1.06(m,6H)。

[0054] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ160.42(s,1H),158.37(s,1H),60.80(s,1H),36.43(s,1H),26.39(s,1H),25.03(s,1H),24.63(s,1H)。

[0055] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C10H22N5O2S(M+H)+276.14942,found 276.14853。

[0056] 3.合成化合物13：N-(3,3,3-三氟丙基磺酰基)二甲双胍

[0057] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.96g(10.0mmol)3,3,3-三氟丙基磺酰氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.6g白色粉末状的化合物13，产率为90％。Rf为0.8(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0058] 对化合物13进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.21–3.14(m,2H),2.89(s,6H),2.63–2.53(m,2H)。

[0059] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ162.49(s),153.48(s),128.05-125.30(m),44.76(s),37.17(s),29.45(s),29.44-28.57(m)。

[0060] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C7H15F3N5O2S(M+H)+290.08986,found 290.08895。

[0061] 4.合成化合物14：N-(1,-甲基乙磺酰基)二甲双胍

[0062] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.42g(10.0mmol)异丙基磺酰氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.2g白色粉末状的化合物14，产率为
92％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0063] 对化合物14进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.07–2.96(m,2H),2.94(s,6H),1.19(d,J＝6.8Hz,6H)。

[0064] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ162.11(s,1H),153.65(s,1H),50.99(s,1H),37.05(s,1H),16.92(s,1H)。

[0065] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C7H18N5O2S(M+H)+236.11812,found 236.11735。

[0066] 5.合成化合物15：N-(2,2-二氟-3,3-二氟-4,4-二氟-5,5,5-三氟丁基磺酰基)二甲双胍

[0067] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、5.82g(10.0mmol)九氟丁基磺酸酐、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到3.6g白色粉末状的化合物15，为产率88％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0068] 对化合物15进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.25(s,1H),7.90(s,1H),3.01(s,6H)。

[0069] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ156.91(s),155.92(s),118.70(t,J＝33.6Hz),115.99(dd,J＝65.0,31.3Hz),113.58(t,J＝33.5Hz),111.11-109.98(m),28.68(s)。

[0070] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C8H11F9N5O2S(M+H)+412.04897,found 412.04997。

[0071] 6.合成化合物16：N-(乙磺酰基)二甲双胍

[0072] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.28g(10.0mmol)乙基磺酰氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.0g白色粉末状的化合物16，产率为
91％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0073] 对化合物16进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.94(s,6H),2.90(q,J＝7.4Hz,2H),1.17(t,J＝7.4Hz,3H)。

[0074] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ162.47(s,1H),153.22(s,1H),46.12(s,1H),37.03(s,1H),8.70(s,1H)。

[0075] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C6H16N5O2S(M+H)+222.10247,found 222.10178。

[0076] 7.合成化合物17：N-(三氟甲磺酰基)二甲双胍

[0077] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.68mL(10.0mmol)三氟甲基磺酸酐、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.4g白色粉末状的化合物17，产率为92％。Rf为0.6(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0078] 对化合物17进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO).1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.97(s,1H)。

[0079] 13C NMR(100MHz,DMSO)δ159.16(s,1H),158.39(s,1H),120.39(q,J＝324.2Hz),36.94(s,1H)。

[0080] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C5H11F3N5O2S(M+H)+262.05855,found 262.05770。

[0081] 8.合成化合物18：N-(甲磺酰基)二甲双胍

[0082] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.74g(10.0mmol)甲基磺酸酐、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到1.9g白色粉末状的化合物18，产率为
90％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0083] 对化合物18进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.94(s,6H),2.82(s,3H)。

[0084] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ160.40(s,1H),158.57(s,1H),41.33(s,1H),36.73(s,1H)。

[0085] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C5H14N5O2S(M+H)+208.08682,found 208.08682。

[0086] 9.合成化合物19：N-(三氯甲磺酰基)二甲双胍

[0087] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、2.16g(10.0mmol)三氯甲基磺酸氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.7g白色粉末状的化合物19，产率为89％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0088] 对化合物19进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.03(s,1H)。

[0089] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ166.46(s,1H),165.68(s,1H),164.90(s,1H),36.13(s,1H)。

[0090] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for  C5H11Cl3N5O2S(M+H)+309.96990,found 309.97120。

[0091] 10.合成化合物20：N-(二氟甲磺酰基)二甲双胍

[0092] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.50g(10.0mmol)二氟甲基磺酰氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.2g白色粉末状的化合物20，产率为90％。Rf为0.6(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0093] 对化合物20进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.99(s,6H),2.10(s,1H)。

[0094] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ166.51(s,1H),165.74(s,1H),164.92(s,1H),35.88(s,1H)。

[0095] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C5H12F2N5O2S(M+H)+244.06798,found 244.06852。

[0096] 实施例3

[0097] 本实施例中，合成酰胺化二甲双胍衍生物，具体包括化合物5～10。

[0098] 1.合成化合物5：N-(2,2,2-三氟乙酰基)二甲双胍

[0099] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、2.10g(10.0mmol)三氟乙酸酐、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.0g白色粉末状的化合物5，产率为
89％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0100] 对化合物5进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.06(d,J＝6.5Hz,6H)。

[0101] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ166.69(s,1H),164.86(s,1H),162.88(q,J＝34.8Hz),119.19(q,J＝276.6Hz),35.90(s,1H),35.84(s,1H)。

[0102] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C6H11F3N5O(M+H)+226.09157,found 226.09238。

[0103] 2.合成化合物6：N-乙酰基二甲双胍

[0104] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.02g(10.0mmol)乙酸酐、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到1.5g白色粉末状的化合物6，产率为90％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0105] 对化合物6进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.02(s,6H),2.10(s,3H)。

[0106] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ174.02(s,1H),166.56(s,1H),165.25(s,1H),35.65(s,1H).25.14(s,1H)。

[0107] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C6H14N5O(M+H)+172.11984found 172.11876。

[0108] 3.合成化合物7：N-(琥珀酸基)二甲双胍

[0109] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.01g(10.0mmol)琥珀酸酐、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.1g白色粉末状的化合物7，产率为
91％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0110] 对化合物7进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.02(s,6H),2.59(dt,J＝11.0,5.5Hz,4H)。

[0111] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ175.52(s,1H),174.03(s,1H),166.45(s,1H),165.01(s,1H),35.50(s,1H),32.66(s,1H),30.37(s,1H)。

[0112] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C8H16N5O3(M+H)+230.12531,found 230.12451。

[0113] 4.合成化合物8：N-(马来酸基)二甲双胍

[0114] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、0.98g(10.0mmol)马来酸酐、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.1g白色粉末状的化合物8，产率为
90％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0115] 对化合物8进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.47(d,J＝13.0Hz,1H),6.32(d,J＝13.0Hz,1H),3.08(s,6H)。

[0116] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ166.35(s,1H),166.20(s,1H),164.62(s,1H),163.76(s,1H),136.21(s,1H),133.82(s,1H),36.29(s,1H)。

[0117] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C8H14N5O3(M+H)+228.10966,found 228.10847。

[0118] 5.合成化合物9：N-(4,-甲基苯甲酰基)二甲双胍

[0119] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.91g(10.0mmol)4-甲基苯酰氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.3g白色粉末状的化合物9，产率为
91％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0120] 对化合物9进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.23(d,J＝8.3Hz,2H),7.21(d,J＝8.0Hz,2H),3.19(d,J＝48.1Hz,6H),2.37(s,3H)。

[0121] 13C NMR(100MHz,Chloroform-d)δ170.87(s,1H),167.33(s,1H),166.03(s,1H),141.77(s,1H),134.49(s,1H),129.13(s,1H),128.44(s,1H),36.40(s,1H),21.75(s,1H)。

[0122] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C12H18N5O(M+H)+248.15144,found 248.15189。

[0123] 6.合成化合物10：N-(环己烷甲酰基)二甲双胍

[0124] 取1.29g(10.0mmol)二甲双胍、1.47g(10.0mmol)环己烷甲酰氯、300mL无水丙酮、0.056g(1mmol)氢氧化钾于500mL烧瓶中，常温搅拌过夜。用TCL检测反应进程，待反应产物无明显变化时，加稀盐酸调pH值至中性以淬灭反应，然后减压旋干，得到粗产物，而后以石油醚:乙酸乙酯＝2:1(v/v)作为洗脱剂过硅胶柱，得到2.1g白色粉末状的化合物10，产率为
88％。Rf为0.7(二氯甲烷:甲醇:冰醋酸＝9:1:0.025)。

[0125] 对化合物10进行核磁氢谱、核磁碳谱和质谱检测，结果为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.98(s,6H),2.30–2.16(m,1H),1.71(dd,J＝27.3,12.5Hz,4H),1.42(q,J＝12.3,11.5Hz,2H),1.19(dq,J＝28.0,12.3Hz,4H)。

[0126] 13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ180.10(s,1H),166.78(s,1H),165.29(s,1H),46.11(s,1H),35.47(s,1H),30.58(s,1H),25.75(s,1H),25.60(s,1H)。

[0127] HRMS(LCMS-IT-TOF)calcd for C11H22N5O(M+H)+240.18244,found 240.18198。

[0128] 实施例4

[0129] 本实施例中，考察本发明提供的双胍衍生物抑制血小板激活和保护肺栓塞的作用。

[0130] 目前，对于抗血栓药物研发，药物活性评价较为经典的方法是，凝血酶诱导血小板聚集的模型和胶原-肾上腺素诱导肺栓塞的模型。因此，在此用凝血酶诱导的血小板聚集模型和胶原-肾上腺素诱导的肺栓塞模型，对本发明提供的双胍衍生物的抗血栓活性和其构效关系进行初步评价。

[0131] 1.实验动物

[0132] 雄性C57BL/6小鼠，体重20±2g，购于成都达硕生物科技有限公司。饲养环境：小鼠10只一笼，在恒温(25±2℃)、照明控制(12h白天/黑夜循环)的条件下饲养，均以标准饲料饲养动物，实验前至少饲养7天以适应环境。实验动物的饲养和操作，均按照国家标准执行，所有动物实验操作均按照华西医学中心动物伦理委员会批准的方案执行。

[0133] 2.实验试剂

[0134] 实验样品为上述合成的双胍衍生物—化合物1～20，二甲双胍、阳性药阿司匹林购于德国拜耳公司，台氏液、PBS、牛血清白蛋白(BSA)、HEPES缓冲液、生理盐水等实验常规试剂均购于碧云天生物科技，ADP、胶原和异丙肾上腺素购于美国西格玛奥德里奇(Sigma-aldrich)公司产品，水合氯醛、柠檬酸钠等购于美国赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher Scientific)。

[0135] 3.实验方法

[0136] (1)双胍衍生物对血小板聚集度的影响

[0137] 雄性C57BL/6小鼠，每组10只。在测定血小板聚集率前，各组小鼠分别灌胃给药干预7天。双胍衍生物的给药剂量是300mg/kg/d，每天给药两次；阿司匹林的给药剂量是30mg/kg/d，每天给药两次；空白对照组和模型对照组以同样的方式灌胃给予相同体积的PBS。第7天晚上对实验小鼠禁食(不禁水)。第8天，对C57BL/6小鼠腹腔注射戊巴比妥钠溶液(40mg/kg)将其麻醉，心脏穿刺取血，并立即与3.8％的枸橼酸钠抗凝剂以体积比9:1的比例混匀。将血浆样品以100g离心6min取上清，得富血小板血浆(PRP)，再将血样以1000g离心5min得贫血小板血浆(PPP)，然后用PPP调整PRP血小板数至2×l06血小板/μL。

[0138] 采用LBY-NJ4血小板聚集仪测定血小板聚集度。具体步骤如下：

[0139] 在不同的比浊管中加入300μL PPP和PRP，37℃预热5min，将PPP放入测试通道，按下PPP键，显示PPP数值，然后将PRP放入测试通道，按下PRP键，待PRP数字显示，若PRP在200～500之内，则再按下PRP键，用微量注射器加入20μL的凝血酶，按下测试键，观察并记录5min内血小板的最大聚集度，计算各组对血小板聚集度的抑制率。

[0140] (2)双胍衍生物对小鼠发生肺栓塞的影响

[0141] 雄性C57BL/6小鼠，每组10只。在构建肺栓塞模型前，各组小鼠分别灌胃给药干预7天。双胍衍生物和二甲双胍的给药剂量是300mg/kg/d，每天给药两次；阿司匹林的给药剂量是30mg/kg/d，每天给药两次；空白对照组和模型对照组以同样的方式灌胃给予相同体积的PBS。第7天晚上对实验小鼠禁食(不禁水)。第8天，向C57BL/6小鼠尾静脉中以大约20μL/s速度注射栓塞诱导剂(3mg/kg胶原蛋白和0.45mg/kg肾上腺素)以诱导肺栓塞，然后观察记录小鼠死亡或瘫痪的数量，计算保护率。

[0142] 4.统计学方法

[0143] 统计方法应用SPSS 24.0统计软件进行统计，实验数据均以均值±标准误差(±S.E.M)表示，组间差异比较用ANOVA/Dunnet’s检验，P<0.05为有统计学意义。

[0144] 5.实验结果

[0145] 双胍衍生物对凝血酶诱导的血小板聚集和胶原-肾上腺素诱导的肺栓塞的影响情况如表1所示。与二甲双胍、阿司匹林相比，本发明提供的双胍衍生物可显著抑制凝血酶诱导的血小板聚集和胶原-肾上腺素诱导的肺栓塞。

[0146] 表1双胍衍生物对凝血酶诱导的血小板聚集和胶原-肾上腺素诱导的肺栓塞的影响(n＝10)

[0147]  抑制率(％) 保护率(％)   抑制率(％) 保护率(％)
二甲双胍 21.4±4.4 50 阿司匹林 45.4±6.2 50
化合物1 66.7±7.6 60 化合物11 85.4±7.2 80
化合物2 60.4±7.7 60 化合物12 78.1±6.4 70
化合物3 72.6±8.8 70 化合物13 87.3±7.3 80
化合物4 77.3±6.5 70 化合物14 85.2±5.3 80
化合物5 77.5±7.6 45 化合物15 80.4±8.3 70
化合物6 80.7±7.3 70 化合物16 82.3±5.3 80
化合物7 77.2±8.1 60 化合物17 91.2±7.4 90
化合物8 62.3±8.1 50 化合物18 93.3±7.3 90
化合物9 78.5±9.7 60 化合物19 73.3±6.3 70
化合物10 83.5±8.3 70 化合物20 61.2±5.3 50

[0148] 实施例5

[0149] 本实施例中，考察本发明提供的双胍衍生物对动静脉血栓形成的抑制作用。

[0150] 1.实验动物

[0151] 雄性SD大鼠，体重200±20g，购于成都达硕生物科技有限公司。饲养环境：小鼠10只一笼，大鼠四只一笼，饲养在恒温(25±2℃)、照明控制(12h白天/黑夜循环)的条件下，动物均以标准饲料饲养，实验开始前至少饲养7天以适应环境。

[0152] 2.实验试剂

[0153] 实验样品为上述合成的双胍衍生物—化合物1～20，二甲双胍、阳性药阿司匹林购于德国拜耳公司。

[0154] 3.实验方法

[0155] (1)双胍衍生物对三氯化铁诱导颈总动脉血栓形成的影响

[0156] 分组：雄性SD大鼠购入后，若7天适应期内未观察到异常反应，则按体重随机分组。

[0157] 给药：给药方式为预防性灌胃给药，在进行造模手术前，药物组SD大鼠分别给予双胍衍生物、二甲双胍和阳性药物阿司匹林进行干预7天，双胍衍生物和二甲双胍的给药剂量均为300mg/kg/d，每天给药两次；阿司匹林的给药剂量为30mg/kg/d，每天给药两次；模型组以同样的方式每天给予等体积的溶媒介质纯净水。第7天晚上对实验SD大鼠进行禁食(不禁水)。

[0158] 造模：第8天，末次给药1h后，对大鼠腹腔注射戊巴比妥钠溶液(40mg/kg)将其麻醉，确定麻醉后，用手术剪刀沿SD大鼠颈正中线将皮肤切开，然后钝性分离SD大鼠左侧颈总动脉使其暴露大约1.3cm的长度，而后放入1.1cm×1.1cm的封口膜，再用0.8cm×1.0cm浸有10μL 20％FeCl3溶液的滤纸条，环裹分离出来的颈总动脉，并用封口膜封住。30min后取下滤纸条，让血栓形成1.5h。

[0159] 检测：血栓形成1.5h后，结扎滤纸条两端血管，精确剪下滤纸条包裹的血管段，用洁净滤纸吸干血管内余血，精确称量血栓的湿重，并测量形成血栓的长度。

[0160] (2)双胍衍生物对下腔静脉结扎诱导静脉血栓形成的影响

[0161] 分组：雄性SD大鼠购入后，若7天适应期内未观察到异常反应，则按体重随机分组。

[0162] 给药：给药方式为预防性灌胃给药，在进行造模手术前，药物组SD大鼠分别给予双胍衍生物、二甲双胍和阳性药物阿司匹林进行干预7天，双胍衍生物和二甲双胍的给药剂量均为300mg/kg/d，每天给药两次；阿司匹林的给药剂量为30mg/kg/d，每天给药两次；模型组以同样的方式每天给予等体积的溶媒介质纯净水。第7天晚上对实验SD大鼠进行禁食(不禁水)。

[0163] 造模：第8天，末次给药1h后，腹腔注射10％水合氯醛1.0–1.5mL(给药剂量0.3mL/kg)麻醉大鼠。麻醉后，使大鼠呈仰卧姿，并铺巾、消毒、备皮，用手术器械做长3cm–4cm的下腹部正中纵行切口，显露腹腔，将部分小肠移至腹腔外，用浸润有无菌生理盐水的湿纱布覆盖小肠以防其脱水。分离SD大鼠肾下段下腔静脉。分离下腔静脉后，在左肾下腔静脉下方用手术结扎线结扎下腔静脉，完成结扎后，检查大鼠腹腔有无出血，而后将肠管回纳入腹腔，逐层关腹，缝合腹膜。手术完成后用暖灯对大鼠进行保暖直至清醒。

[0164] 检测：SD大鼠术后24h，对其进行开腹，并切取结扎线下方的下腔静脉，以磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗静脉，收集血栓，并测量其重量和长度。

[0165] 4.统计学方法

[0166] 统计方法应用SPSS 24.0统计软件进行统计，实验数据均以均值±标准误差(±S.E.M)表示，组间差异比较用ANOVA/Dunnet’s检验，P<0.05为有统计学意义。

[0167] 5.实验结果

[0168] 双胍衍生物对氯化铁诱导的动脉血栓和下腔静脉结扎诱导的静脉血栓的影响情况如表2所示。与二甲双胍、阿司匹林相比，本发明提供给的双胍衍生物可显著抑制动静脉血栓的形成。

[0169] 表2双胍衍生物对氯化铁诱导的动脉血栓和下腔静脉结扎诱导的静脉血栓的影响(n＝10)

[0170]

[0171] 实施例6

[0172] 本实施例中，考察本发明提供的双胍衍生物对脑梗的改善作用。

[0173] 1.实验动物

[0174] 成年健康雄性SD大鼠，体重300～350g。饲养环境：小鼠10只一笼，在恒温(25±2℃)、照明控制(12h白天/黑夜循环)的条件下饲养，均以标准饲料饲养动物，实验前至少饲养7天以适应环境。实验动物的饲养和操作，均按照国家标准执行，所有动物实验操作均按照华西医学中心动物伦理委员会批准的方案执行。

[0175] 2.实验试剂

[0176] 实验样品为上述合成的双胍衍生物—化合物1～20，二甲双胍、阳性药阿司匹林购于德国拜耳公司。

[0177] 3.实验方法

[0178] 分组：雄性SD大鼠购入后，若7天适应期内未观察到异常反应，则按体重随机分组。

[0179] 给药：给药方式为预防性灌胃给药，在进行造模手术前，药物组SD大鼠分别给予双胍衍生物、二甲双胍和阳性药物阿司匹林进行干预7天，双胍衍生物和二甲双胍的给药剂量均为300mg/kg/d，每天给药两次；阿司匹林的给药剂量为30mg/kg/d，每天给药两次；模型组以同样的方式每天给予等体积的溶媒介质纯净水。第7天晚上对实验SD大鼠进行禁食(不禁水)。

[0180] 造模：第8天，末次给药1h后，腹腔注射10％水合氯醛1.0–1.5mL(给药剂量0.3mL/kg)麻醉大鼠。采用改良Zea-Longa线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebralartery occlusion，MCAO)模型。

[0181] 检测：模型纳入标准SD大鼠造模后存活6h以上，术后12h取样做TCC染色，检测大脑梗死面积。

[0182] 4.实验结果

[0183] 双胍衍生物对大鼠脑梗模型的影响如表3所示。与二甲双胍、阿司匹林相比，本发明提供的双胍衍生物可显著抑制脑梗。

[0184] 表3双胍衍生物对大鼠脑梗模型的影响(n＝10)

[0185]  大鼠脑梗死面积降低率(％)   大鼠脑梗死面积降低率(％)
二甲双胍 19±7 阿司匹林 38±6
化合物1 33±5 化合物11 61±6
化合物2 41±5 化合物12 63±7
化合物3 45±5 化合物13 69±12
化合物4 62±8 化合物14 69±6
化合物5 61±6 化合物15 76±8
化合物6 73±6 化合物16 65±6
化合物7 67±7 化合物17 89±8
化合物8 48±7 化合物18 91±4
化合物9 76±7 化合物19 58±5
化合物10 78±7 化合物20 67±7

[0186] 实施例7

[0187] 实施例中，考察本发明提供的双胍衍生物对心梗的改善作用。

[0188] 1.实验动物

[0189] SPF级雄性C57BL/6小鼠。饲养环境：小鼠10只一笼，在恒温(25±2℃)、照明控制(12h白天/黑夜循环)的条件下饲养，均以标准饲料饲养动物，实验前至少饲养7天以适应环境。实验动物的饲养和操作，均按照国家标准执行，所有动物实验操作均按照华西医学中心动物伦理委员会批准的方案执行。

[0190] 2.实验试剂

[0191] 实验样品为上述合成的双胍衍生物—化合物1～20，二甲双胍、阳性药阿司匹林购于德国拜耳公司。

[0192] 3.实验方法

[0193] 分组：C57BL/6小鼠购入后，若7天适应期内未观察到异常反应，则按体重随机分组。

[0194] 给药：给药方式为预防性灌胃给药，在进行造模手术前，药物组C57BL/6小鼠分别给予双胍衍生物、二甲双胍和阳性药物阿司匹林进行干预7天，双胍衍生物和二甲双胍的给药剂量均为300mg/kg/d，每天给药两次；阿司匹林的给药剂量为30mg/kg/d，每天给药两次；模型组以同样的方式每天给予等体积的溶媒介质纯净水。第7天晚上对实验C57BL/6小鼠进行禁食(不禁水)。

[0195] 造模：第8天，末次给药1h后，C57BL/6小鼠在3.0％异氟烷吸入麻醉后取仰卧位，头部和四肢固定于手术台上，且四肢涂上导电胶并固定在电极，采用MPA生物信号采集分析系统实时监测小鼠生理指标变化。使用20号套管穿刺针针鞘从口腔进入进行气管插管，插管成功后，连接呼吸麻醉机维持麻醉。待插管与麻醉成功后，左胸部脱毛，沿左胸第2、3肋间切开皮肤、肋间肌肉，打开胸腔，剪开心包膜并充分暴露心脏。以左心耳下缘为标志，左心耳根部下2～3mm用6-0无创缝线穿过冠状动脉左前降支，进针深度0.8mm，缓慢结扎冠脉以防撕裂心肌。结扎后观察局部心肌变化(1min左右左室外膜呈苍白)以及动态心电图监测ST段抬高或压低，初步认为建模成功。然后，常规关闭胸腔且在最后关闭时挤压小鼠胸腔，避免形成气胸，待心跳恢复正常后拔掉气管插管。小鼠术后注意保温及预防感染。假手术对照组开胸后，6-0无创缝线穿过冠状动脉左前降支，结扎。

[0196] 检测：模型纳入标准为造模后存活6h以上实验小鼠，术后12h取样做TCC染色，检测心脏梗死面积

[0197] 4.实验结果

[0198] 双胍衍生物对小鼠心梗模型的影响如表4所示。与二甲双胍、阿司匹林相比，本专利申请的双胍衍生物可显著抑制心梗。

[0199] 表4双胍衍生物对小鼠心梗模型的影响(n＝10)

[0200]

[0201]

[0202] 实施例8

[0203] 实施例中，考察本发明提供的双胍衍生物对出血时间的影响。

[0204] 1.实验动物

[0205] SPF级雄性C57BL/6小鼠。饲养环境：小鼠10只一笼，在恒温(25±2℃)、照明控制(12h白天/黑夜循环)的条件下饲养，均以标准饲料饲养动物，实验前至少饲养7天以适应环境。实验动物的饲养和操作，均按照国家标准执行，所有动物实验操作均按照华西医学中心动物伦理委员会批准的方案执行。

[0206] 2.实验试剂

[0207] 实验样品为上述合成的双胍衍生物—化合物1～20，二甲双胍、阳性药阿司匹林购于德国拜耳公司。

[0208] 3.实验方法

[0209] 分组：C57BL/6小鼠购入后，若7天适应期内未观察到异常反应，则按体重随机分组。

[0210] 给药：给药方式为预防性灌胃给药，在进行出血时间检测前，药物组C57BL/6小鼠分别给予双胍衍生物、二甲双胍和阳性药物阿司匹林进行干预7天，双胍衍生物和二甲双胍的给药剂量均为300mg/kg/d，每天给药两次；阿司匹林的给药剂量为30mg/kg/d，每天给药两次；模型组以同样的方式每天给予等体积的溶媒介质纯净水。第7天晚上对实验C57BL/6小鼠进行禁食(不禁水)。

[0211] 检测：第8天，末次给药1h后，C57BL/6小鼠在3.0％异氟烷吸入麻醉后取仰卧位，头部和四肢固定于手术台上，使游标卡尺的刻度定于16mm处，而后将其定好的固定缺口从小鼠尾部根部开始往上游走，至游标卡尺无法移动，使用剪刀剪断小鼠尾部，并立即将尾巴放于37℃生理盐水中。从尾部出血时开始计时，持续到小鼠停止出血，出血时间的测定采用盲法。

[0212] 4.实验结果

[0213] 双胍衍生物对小鼠出血时间的影响如表5所示。与阿司匹林相比，本发明提供的双胍衍生物对出血时间无明显的影响，且化合物20可以显著缩短出血时间。

[0214] 表5双胍衍生物对小鼠出血时间的影响(n＝10)

[0215]  出血时间(秒)   出血时间(秒)
空白对照 454±40 阿司匹林 452±41
二甲双胍 452±41 化合物11 454±36
化合物1 454±36 化合物12 456±38
化合物2 456±38 化合物13 451±41
化合物3 451±41 化合物14 452±36
化合物4 452±36 化合物15 454±32
化合物5 454±32 化合物16 446±38
化合物6 446±38 化合物17 436±41
化合物7 436±41 化合物18 453±40
化合物8 453±40 化合物19 452±41
化合物9 442±37 化合物20 61±5
化合物10 444±36