技术领域
[0001] 本发明属于多肽合成技术领域，具体涉及一种铜肽的合成方法。
相关背景技术
[0002] ARK-Cu是一种新型铜肽，是由丙氨酸、精氨酸和赖氨酸组成的三肽与铜形成的络合物，具有深层修复疤痕，修复老损细胞，灭菌以及深层美白等功效。ARK-Cu是基于GHK-Cu的一种改构，用丙氨酸替代甘氨酸，用精氨酸替代组氨酸。现在目前针对这种三肽的合成有固相合成和液相合成两种，固相合成的优点在于快速、方便、产率高、纯度好，缺点在于成本高，以及将肽从固相树脂上切割下来经常用三氟乙酸，因此非常依赖反向色谱纯化以及离子交换。液相合成的优点是成本低，但是合成的纯度较差，每步中间体都需要处理，纯化，周期太长。
具体实施方式
[0021] 下面结合实施例对本发明进一步详细说明，但本发明的保护范围不仅限于这些实例。
[0022] 实施例1
[0023] 1、合成Cbz-Ala-Arg(NO2)-OH
[0024] 将44.6g(0.2mol)Cbz-Ala-OH搅拌溶解于600mL N,N'-二甲基甲酰胺中，然后加入27.6g(0.24mol)N-羟基琥珀酰亚胺、37.8g(0.30mol)N,N'-二异丙基碳二亚胺，室温搅拌3小时，再加入44g(0.2mol)H-Arg(NO2)-OH、26g(0.2mol)N,N'-二异丙基乙胺，室温搅拌2小时，将反应液倒入3L水中，用柠檬酸调节pH＝3～4，室温搅拌30分钟，析出大量固体，过滤，水洗2遍，40℃烘干，得到76g Cbz-Ala-Arg(NO2)-OH，产率90％。
[0025] 2、合成Cbz-Ala-Arg(NO2)-Lys(Cbz)-OH
[0026] 将63.75g(0.15mol)Cbz-Ala-Arg(NO2)-OH搅拌溶解于750mL N,N'-二甲基甲酰胺中，然后加入20.7g(0.18mol)N-羟基琥珀酰亚胺、28.35g(0.225mol)N,N'-二异丙基碳二亚胺，室温搅拌3小时，再加入42g(0.15mol)Lys(Cbz)-OH、19.5g(0.15mol)N,N'-二异丙基乙胺，室温搅拌2小时，将反应液倒入3L水中，用柠檬酸调节pH＝3～4，室温搅拌30分钟，析出大量固体，过滤，水洗2遍，40℃烘干，得到82.5g Cbz-Ala-Arg(NO2)-Lys(Cbz)-OH粗品，用乙酸乙酯重结晶，得到68.7g纯度97％的Cbz-Ala-Arg(NO2)-Lys(Cbz)-OH，产率67％。
[0027] 3、合成H-Ala-Arg-Lys-OH
[0028] 将68.7g Cbz-Ala-Arg(NO2)-Lys(Cbz)-OH搅拌溶解于600mL水与甲醇体积比为1:1的混合溶剂中，加入5g 10％钯碳，常温常压下通入氢气，搅拌5小时，反应完全，减压蒸干甲醇，加入300mL乙酯，搅拌，分层，取水层，将水层冻干，得到35g H-Ala-Arg-Lys-OH，产率
95％。
[0029] 4、合成ARK-Cu
[0030] 将35g(0.093mol)H-Ala-Arg-Lys-OH搅拌溶解于200mL水中，加入18.6g(0.093mol)醋酸铜，室温搅拌2小时，将反应液冷冻干燥，得到40g ARK-Cu产率99％。
[0031] 实施例2
[0032] 1、合成Cbz-Ala-Arg(NO2)-OH
[0033] 将89.2g(0.4mol)Cbz-Ala-OH搅拌溶解于1200mL N,N'-二甲基甲酰胺中，然后加入50.6g(0.44mol)N-羟基琥珀酰亚胺、65.52g(0.52mol)N,N'-二异丙基碳二亚胺，室温搅拌3小时，再加入96.8g(0.44mol)H-Arg(NO2)-OH、57.2g(0.44mol)N,N'-二异丙基乙胺，室温搅拌2小时，将反应液倒入6L水中，用柠檬酸调节pH＝3～4，室温搅拌30分钟，析出大量固体，过滤，水洗2遍，40℃烘干，得到147g Cbz-Ala-Arg(NO2)-OH，产率87％。
[0034] 2、合成Cbz-Ala-Arg(NO2)-Lys(Cbz)-OH
[0035] 将127.5g(0.3mol)Cbz-Ala-Arg(NO2)-OH搅拌溶解于1500mL N,N'-二甲基甲酰胺中，然后加入37.95g(0.33mol)N-羟基琥珀酰亚胺、49.14g(0.39mol)N,N'-二异丙基碳二亚胺，室温搅拌3小时，再加入92.4g(0.33mol)Lys(Cbz)-OH、42.9g(0.33mol)N,N'-二异丙基乙胺，室温搅拌2小时，将反应液倒入3L水中，用柠檬酸调节pH＝3～4，室温搅拌30分钟，析出大量固体，过滤，水洗2遍，40℃烘干，得到163g Cbz-Ala-Arg(NO2)-Lys(Cbz)-OH粗品，用乙酸乙酯重结晶，得到133g纯度96.5％的Cbz-Ala-Arg(NO2)-Lys(Cbz)-OH，产率65％。
[0036] 3、合成H-Ala-Arg-Lys-OH
[0037] 将133g Cbz-Ala-Arg(NO2)-Lys(Cbz)-OH搅拌溶解于1200mL水与甲醇体积比为1:1的混合溶剂中，加入10g 10％钯碳，常温常压下通入氢气，搅拌5小时，反应完全，减压蒸干甲醇，加入600mL乙酯，搅拌，分层，取水层，将水层冻干，得到68g H-Ala-Arg-Lys-OH，产率
96％。
[0038] 4、合成ARK-Cu
[0039] 将68g(0.18mol)H-Ala-Arg-Lys-OH搅拌溶解于400mL水中，加入36g(0.18mol)醋酸铜，室温搅拌3小时，将反应液冷冻干燥，得到77g ARK-Cu，产率98％。
