本发明属于微生物采油技术领域，具体涉及一种采油用微生物长效激活剂的筛选方法，具体包括以下步骤：长效激活剂组分的筛选好氧和厌氧条件下长效激活剂组分的筛选；长效激活剂浓度的优化；长效激活剂物模评价，包括注入能力评价和驱油效果评价；最终得到采油用油藏微生物长效激活剂体系。本发明具有方法简单、可操作性及针对性极强；本发明筛选得到的长效激活剂体系不仅可以满足近井地带微生物的营养需求，而且还能满足油藏深部微生物的营养需求；本发明筛选得到的长效激活体系现场应用效果良好，能够改善微生物驱油效果。因此，可广泛地应用于微生物采油技术领域中。