技术领域
[0001] 本发明涉及微生物来源杀菌剂，具体的说是化合物Simplicissin的应用。
相关背景技术
[0002] 核桃在我国栽培历史悠久，具有养神、健胃与润肺等功效。随着核桃的营养与药用价值逐渐被人们重视，其种植面积也越来越大，但随之而来的是病害发生越来越严重。核桃枝枯病作为主要病害之一，发病率高，能够引起核桃枝条枯死，严重影响核桃的产量。目前防治手段主要依靠甲基托布津、多菌灵等化学合成农药，虽然能够取得一定的防治效果，但也易于带来环境污染、农药残留超标等问题。与传统的化学合成农药相比，微生物来源杀菌剂具有对人畜和非靶标生物安全，环境兼容性好，不易产生抗性等优点。因此，微生物来源农药的开发与应用对人类健康、环境保护和农业的可持续发展具有重要的意义。
[0003] 式(一)所示的化合物Simplicissin是由青霉菌Penicillium cf.Simplicissimum(Oudemans)Thom No.410经发酵培养、提取分离而获得(kusano M,et al.Simplicissin,a new pollen growth inhibitor produced by the fungus,Penicillium cf.Simplicissimum(Oudemans)Thom No.410.Biosci.Biotech.Biochem.,1997,61(12),2153–2155)。在上述文献中通过试验证明：该化合物具有抑制花粉生长的活性。
[0004]
具体实施方式
[0011] 实施例1：化合物Simplicissin的制备
[0012] 式(一)所示的化合物Simplicissin的制备参见文献kusano M,et al.Simplicissin,a new pollen growth inhibitor produced by the fungus,Penicillium cf.Simplicissimum(Oudemans)Thom No.410.Biosci.Biotech.Biochem.,1997,61(12),2153–2155。
[0013] 实施例2：抑菌活性试验
[0014] 采用微量稀释法，测定式(一)所示化合物对核桃枝枯病菌(Melanconiumoblongum)的抑菌活性(《从天然产物到新农药创制-原理方法》，吴文君，2006，化学工业出版社)。
[0015] 1)菌悬液的制备
[0016] 将供试真菌接种于PDA培养基表面于28℃培养72h后，吸取2mL无菌0.85％NaCl溶液(含0.25％吐温-20)洗涤培养物，并用玻璃刮刀将菌落轻轻刮下。吸取适量菌悬液于
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无菌试管中，调至0.5麦氏比浊(相当于1.5×10CFU/mL)备用；
[0017] 2)样品的配制
[0018] 分别取1mg待测样品(式(一)化合物)和阳性对照(两性霉素B)，溶解于100μLDMSO中，充分混匀后，吸取50μL样品溶液到另一只离心管中，接着加入50μL DMSO，得到浓度减半的样品溶液。按照此方法，得到12组浓度依次减半的样品溶液。
[0019] 3)MIC测定方法
[0020] (1)采用无菌操作，将倍比稀释后不同浓度的样品溶液分别加到无菌的96孔聚苯乙烯板中，第1至第12孔各加5μL的样品溶液，并以不加样品孔作为空白对照，加5μL
