[0001] 本发明属于中医中药技术领域，涉及中药的成药组方，具体涉及治疗风湿骨病的一个中药组方及其中药成药（以下简称“中成药”）的制备方法。

[0002] 风湿痹病是由风寒湿热等外邪入侵而导致经络关节闭阻、气血运行不畅的疾病，其主要临床表现为全身关节呈游走性红、肿、重着和疼痛，俗称“风湿性关节炎”。临床诊断
认为：“风湿性关节炎”的发病主要是由于在人体素体虚弱、正气不足、腠理不密、卫外不固
的前提下，复感风寒湿诸邪，使气血失运，经络痹阻而致。诸邪先后杂至，各有其特点：痛点
不固定或游走性者为风；疼痛剧烈、痛处喜暖畏寒、屈伸不利者为寒；痛处固定、肿胀明显
者为湿；痛处红肿灼热、喜凉恶热者为热。此病若日久失治，病邪深入关节骨节，瘀血、痰浊
等病理产物会继之而生，它们与邪气胶结，阻痹经络，留滞关节，导致关节疼痛、肿胀、变形
或僵直，还可能会伴有关节外多系统受损：关节病变主要表现在四肢大小关节，也可能会累
及颈柱关节。

[0003] 目前，大部分风湿痹病还不能根治。在治疗手段方面，西医主要是通过药物来消除急性发热、发炎、疼痛等症状，使用的药物主要有非甾类抗炎药和肾上腺皮质素类免疫抑
制药物，但是，这些药物大多数对人体的重要器官（肝、肾、膀胱、肺、胃肠和生殖腺）以及组
织（骨髓）会有不同的毒性作用。因而，西医近年来还在继续寻找有效、理想的风湿治疗药
物。中医对风湿痹病的系统研究已有近150年的历史。中医治疗风湿痹病一般以“祛邪、通
络、止痛”为基本原则，或以虫蚁通络、或以温经通络、或以活血通络，再辅以健脾、补肾、理
气等治疗手段；通常是按“风寒湿痹”和“风热湿痹”两种病型来进行分类治疗的。“风寒湿
痹”的治疗方法是：散寒、祛风、除湿、通经活络；其常用的中成药有：风寒湿痹冲剂、风湿关
节炎片、颈复康颗粒、腰痛宁胶囊、追风透骨丸、疏风定痛丸、小活络丹、宝光风湿液、风湿骨
痛丸、祖师麻片、麝香风湿片、老鹳草膏、史国公药酒、冯了性药酒、骨刺消痛液、护骨酒、木
瓜酒等；其外用药有：骨友灵擦剂、麝香壮骨膏、天麻追风膏等。“风热湿痹”的治疗方法是：
清热、祛风、除湿、通经活络；其常用的中成药有：湿热痹冲剂、二妙丸、四妙丸、痹隆清安片
等。上述中成药对治疗风湿痹病虽然具有较好的疗效，但是，由于药材成分复杂并含有很多
非有效物质，且存在药物的毒副作用问题，因此，如何减少中成药中的非有效成分、降低毒
副作用一直是现代中药研究的热点之一。

[0004] 在中药中，同类活性成分组群称为有效部位，可按照其分子结构的基本构架分为生物碱类、黄酮类、皂苷类、挥发油类等。通过系统研究中药复方中有效部位的作用机理以
及它们之间的协同及拮抗作用，能够获得更加合理、安全的组方，降低中药的毒副作用，提
高药效。

[0021] 以下介绍本发明治疗风湿骨病的中药组方及其中成药的制备方法的具体实施方式，提供11个实施例，以此来详细解释本发明的实施情况以及验证本发明制备的治疗风湿
骨病中成药的药效。需要指出的是，本发明的实施不限于以下的实施方式。

[0022] 实施例1一种治疗风湿骨病中成药的制备方法，包含以下步骤：
（1）制备甘草皂苷
取甘草粉以氨性乙醇超声提取两次；过滤，减压浓缩，离心；过HZ-816大孔树脂柱，收
集乙醇洗脱液；将洗脱液减压浓缩至干，干燥，称重，获得甘草提取物；所述甘草提取物中
甘草皂苷的质量百分比为50%～95%。

[0023] （2）制备甘草黄酮取甘草药材进行粉碎，用乙醇回流提取；离心、浓缩并脱色；先过D101大孔树脂柱，浓
缩后再过HZ915聚酰胺树脂柱；将醇液减压浓缩干燥，称重，获得甘草提取物；所述甘草提
取物中甘草黄酮的质量百分比为20%～80%。

[0024] （3）制备延胡索生物碱称取延胡索药材进行粉碎，用乙醇溶液加热回流，过滤、离心，采用D101大孔吸附树脂
纯化滤液，收集70%乙醇洗脱液，减压浓缩至干膏状，在烘箱中干燥成粉末，获得延胡索提
取物；所述延胡索提取物中延胡索生物碱的质量百分比为20%～70%。

[0025] （4）制备三七皂苷称取三七药材进行粉碎，用乙醇回流提取；过滤、离心，减压浓缩至浸膏；用去离子水
溶解，过 HZ-816大孔树脂柱。

[0026] 重复以上做法一次。

[0027] 收集乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液减压浓缩，干燥，称重，获得三七提取物；所述三七提取物中三七皂苷的质量百分比为60%～95%。

[0028] （5）制备骨碎补黄酮称取骨碎补药材进行粉碎，用乙醇溶液回流提取，过滤离心，减压浓缩，过D101大孔树
脂柱，收集乙醇洗脱液；将乙醇洗脱液减压浓缩，将浓缩液过HZ915聚酰胺树脂柱，收集乙
醇洗脱液，减压浓缩成干膏，再真空干燥，称重，获得骨碎补提取物；所述骨碎补提取物中骨
碎补黄酮的质量百分比为35%～50%。

[0029] （6）配制有效部位组分将步骤（1）至步骤（5）制备的甘草皂苷、甘草黄酮、延胡索生物碱、三七皂苷和骨碎补
黄酮按下述的质量份数进行配制：
甘草皂苷 4.5；
甘草黄酮 0.5；
延胡索生物碱 2.5；
三七皂苷 1.25；
骨碎补黄酮 1.25。

[0030] （7）制成治疗风湿骨病的中成药① 将步骤（6）配制的有效部位组分混合均匀，湿法制粒、然后进行干燥，干燥后的有效
部位组分含水率为3～5%。

[0031] ② 在步骤①干燥后的有效部位组分中按照常规方法加入适量乳糖、糖粉、甘露醇和糊精，粉碎过筛，以90%乙醇为粘合剂制成软材，用20目筛制粒，在烘箱内于40～60℃干
燥至含水2%～4%，然后用10目筛整粒并加入1%的硬脂酸镁混合，压制成每片500mg的片
剂。

[0032] ③ 在步骤①干燥后的有效部位组分中按照常规方法加入适量二氧化硅，混合均匀；然后定量（每粒胶囊400mg）填充在医用胶囊内，制成胶囊。

[0033] 实施例2一种治疗风湿骨病中成药的制备方法，包含以下步骤：
（1）～（5） 同实施例1。

[0034] （6）配制有效部位组分将步骤（1）至步骤（5）制备的甘草皂苷、甘草黄酮、延胡索生物碱、三七皂苷和骨碎补
黄酮按下述的质量份数进行配制：
甘草皂苷 8；
甘草黄酮 0.01；
延胡索生物碱 0.01；
三七皂苷 0.01；
骨碎补黄酮 0.01。

[0035] （7）制成治疗风湿骨病的中成药（同实施例1）。

[0036] 实施例3一种治疗风湿骨病中成药的制备方法，包含以下步骤：
（1）～（5） 同实施例1。

[0037] （6）配制有效部位组分将步骤（1）至步骤（5）制备的甘草皂苷、甘草黄酮、延胡索生物碱、三七皂苷和骨碎补
黄酮按下述的质量份数进行配制：
甘草皂苷 0.01；
甘草黄酮 2；
延胡索生物碱 5；
三七皂苷 5；
骨碎补黄酮 5。

[0038] （7）制成治疗风湿骨病的中成药（同实施例1）。

[0039] 实施例4一种治疗风湿骨病中成药的制备方法，包含以下步骤：
（1）～（5） 同实施例1。

[0040] （6）配制有效部位组分将步骤（1）至步骤（5）制备的甘草皂苷、甘草黄酮、延胡索生物碱、三七皂苷和骨碎补
黄酮按下述的质量份数进行配制：
甘草皂苷 1；
甘草黄酮 0.5；
延胡索生物碱 2.5；
三七皂苷 0.5；
骨碎补黄酮 0.5。

[0041] （7）制成治疗风湿骨病的中成药（同实施例1）。

[0042] 实施例5一种治疗风湿骨病中成药的制备方法，包含以下步骤：
（1）～（5）同实施例1。

[0043] （6）配制有效部位组分将步骤（1）至步骤（5）制备的甘草皂苷、甘草黄酮、延胡索生物碱、三七皂苷和骨碎补
黄酮按下述的质量份数进行配制：
甘草皂苷 4.5；
甘草黄酮 1.5；
延胡索生物碱 0.5；
三七皂苷 3；
骨碎补黄酮 3。

[0044] （7）制成治疗风湿骨病的中成药（同实施例1）。

[0045] 实施例6用实施例1～5制备的治疗风湿骨病中成药进行的动物实验：将本发明实施例1～
5制备的治疗风湿骨病中成药用于治疗大鼠的佐剂性关节炎，观察所述治疗风湿骨病中
成药对患佐剂性关节炎的大鼠（AA大鼠）继发性足跖肿胀以及对其血清中PGE2、IL-1β、 水平的影响。

[0046] 1、受试药物：根据本发明的中药组方制备的治疗风湿骨病中成药。

[0047] 2、受试动物：SD大鼠40只，雄性，清洁级，6～8周龄。

[0048] 3、实验方法大鼠适应性喂养5天，除正常组之外，其余各组大鼠左后足跖注射0.05mL 5mg/ml弗氏
完全佐剂；造模第10天后开始灌胃给药，每日一次，连续14天，给药剂量为：空白组（10mL/
kg蒸馏水），模型组（10mL/kg蒸馏水），受试药物组（70mg/kg），阳性对照组（40mg/kg雷公藤
多苷片）。给药后，每3天测量一次右足的肿胀度，直至大鼠处死前一天。在第23天时，腹
腔麻醉大鼠，从主动脉取血4ml～6ml，然后处死大鼠，在离心机上3000 离心15min
取血清待测。采用酶联免疫法检测血清中 、IL-1β、PGE2的含量。

[0049] 4、实验结果（1）受试药物对患佐剂性关节炎的大鼠（AA大鼠）继发性炎症的影响见表1
表1. 受试药物对AA大鼠继发性肿胀影响（ ±s，n=10）
** △ △△
注：与正常组比较 P＜0.01；与模型组比较 P＜0.05， P＜0.01。

[0050] 与正常组比较，致炎后第10天各组造模组的继发性肿胀度均显著大于正常组（P＜0.01），继发性病变的产生，表明造模成功；与模型组比较，16天、19天、22天阳性对
照组的肿胀度显著低于模型组（P＜0.05），19天受试药物组的肿胀度显著低于模型组（P
＜0.05），表明阳性对照药、受试药物能不同程度的改善大鼠足跖肿胀现象。这也提示：受
试药物能够显著抑制AA大鼠继发性足爪肿胀。

[0051] （2）受试药物对AA大鼠血清中PGE2、IL-1β、 水平的影响见表2表2. 受试药物对AA大鼠血清中PGE2、IL-1β、 水平的影响
与正常组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较△P＜0.05，△△P＜0.01。

[0052] 由表2可知，与正常组大鼠比较，模型组大鼠的血清内PGE2、IL-1β、 水平明显升高（P＜0.01）；与模型组比较，阳性对照组、受试药物组的PGE2、IL-1β、 水平均
明显降低（P＜0.01）；说明阳性对照药、受试药物能够显著降低AA大鼠血清中炎症细胞因
子水平，且两组进行比较发现并无显著性差异。

[0053] 因此，实施例6的动物实验结果说明，根据本发明的中药组方制备的治疗风湿骨病中成药在试验所用的剂量水平上能改善大鼠佐剂性关节炎的症状, 控制 AA 大鼠足爪
肿胀，降低AA大鼠血清中炎症细胞因子水平，具有防治关节炎、祛风除湿、调节免疫的效
果。

[0054] 实施例7实施例7基本同实施例6，所不同的是：实施例7是采用二甲苯致小鼠耳肿胀建立反应
模型以评价受试药物的抗炎作用。

[0055] 1、受试药物：根据本发明的中药组方制备的治疗风湿骨病中成药。

[0056] 2、受试动物：昆明种小鼠30只，雌雄各半，清洁级，体重18～22g。

[0057] 3、实验方法（1）取小鼠30只，随机分为三组，10只/组，分为空白组、阳性对照组（阿司匹林）、受试
药物组。

[0058] （2）连续给药5天，每天1次，末次给药后30min，在各小鼠左耳两面涂二甲苯（50ul/只）致炎；右耳为正常耳不涂二甲苯。lh后脱颈椎处死小鼠，用7mm打孔器打下左
耳和右耳同一部位的圆片，于分析天平上称重。左耳重量减去右耳重量之差为左耳的肿胀
度，计算肿胀率及肿胀抑制率，比较药物的抗炎作用。

[0059] 4、实验结果受试药物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响见表3。

[0060] 表3. 受试药物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响与空白组比较*P＜0.05，**P＜0.01。
*

[0061] 由表3可知，阳性对照药、受试药物组肿胀率均明显小于空白对照组（P＜0.05，**
P＜0.01），其中受试药物组与阳性对照组间没有显著性差异。提示受试药物可有效抑制
二甲苯致小鼠耳肿胀，具有抗炎消肿作用。

[0062] 实施例8实施例8基本同实施例7，所不同的是：实施例8是采用角叉菜胶致小鼠足跖肿胀反应
建立模型以评价受试药物的抗炎作用。

[0063] 1、受试药物：根据本发明的中药组方制备的治疗风湿骨病中成药。

[0064] 2、受试动物：昆明种小鼠30只，雌雄各半，清洁级，体重18～22g。

[0065] 3、实验方法（1）取小鼠30只，随机分为三组，10只/组，分为空白组、阳性对照组（阿司匹林）、受试
药物组。

[0066] （2）连续给药5天，每天1次，第5天先测所有小鼠右后肢足跖厚度作为造模前的正常值，末次给药后30 min于每只小鼠右后肢足跖处皮下注射1%角叉菜胶悬液（0．02
ml／只），以建立急性足跖肿胀模型。再分别测定造模后30分钟、1小时、2小时、3小时后
小鼠致炎右后足跖的厚度，以肿胀度和肿胀抑制率作为检测指标，采用SPSS统计软件包进
行分析。

[0067] 肿胀度（mm）= 致炎后足跖厚度-致炎前足跖厚度。

[0068] 4、实验结果受试药物对角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀的影响见表4。

[0069] 表4. 受试药物对角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀的影响与空白组比较*P＜0.05，**P＜0.01。

[0070] 由表4可知，阳性对照组及受试药物组的肿胀度均小于空白组，表现出明显的抗* **
炎效果及抑制肿胀的作用，并在给药后2～3小时表现出显著疗效（P＜0.05，P＜0.01），
其中，受试药物组与阳性对照组之间没有显著性差异，提示受试药物可有效抑制角叉菜胶
所致小鼠足跖肿胀，具有抗炎消肿作用。

[0071] 实施例9实施例9基本同实施例8，所不同的是：实施例9是采用小鼠扭体反应建立模型以评价
受试药物的镇痛作用。

[0072] 1、受试药物：根据本发明的中药组方制备的治疗风湿骨病中成药。

[0073] 2、受试动物：昆明种小鼠，30只，雌雄各半，清洁级，体重18～22g。

[0074] 3、实验方法（1）取小鼠30只，随机分为三组，10只/组，分为空白组、阳性对照组（阿司匹林
2.5mg/10g）、受试药物组(1.0mg/10g)。

[0075] （2）连续给药5天，每天1次，末次给药后30min，在各小鼠腹腔注射0.7%的醋酸0.1ml/10g，观察记录15min内每只小鼠出现的扭体反应（腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部抬
高、蠕行）的次数，计算镇痛百分率。

[0076] 4、实验结果受试药物对醋酸致小鼠扭体反应的影响见表5。

[0077] 表5. 受试药物对醋酸致小鼠扭体反应的影响与空白组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与阳性对照组比较△P＜0.05，△△P＜0.01。

[0078] 由表5可知，受试药物能够显著减少醋酸致小鼠的扭体反应次数，扭体反应抑制率显著高于阳性对照组，显示受试药物具有显著的镇痛效果（△△P＜0.01)。

[0079] 实施例10实施例10基本同实施例9，所不同的是：实施例10是采用小鼠热板法建立模型以评价
受试药物的镇痛作用。

[0080] 1、受试药物：根据本发明的中药组方制备的治疗风湿骨病中成药。

[0081] 2、受试动物：昆明种小鼠，30只，雌性，清洁级，体重18～22g。

[0082] 3、实验方法（1）取小鼠30只，随机分为三组，10只/组，分为空白组、阳性对照组（阿司匹林）、受试
药物组。

[0083] （2）将小鼠置于温度55±0.5℃的热板，测定痛阈值，以小鼠舔后足作为观察指标。每组给药前重复测定痛阈值，取两次痛阈平均值作为正常痛阈值。连续给药5天，每天1次。
在第五天给药后第0.5h、1h、2h、3h测量小鼠的痛阈值，若小鼠60s内无痛反应，立即取出，
按60s计算。记录结果，计算各组痛阈提高百分率。

[0084] 4、实验结果受试药物对小鼠热板痛阈值的影响见表6。

[0085] 表6. 受试药物对小鼠热板痛阈值的影响与空白组比较*P＜0.05，**P＜0.01。

[0086] 表6结果显示，阳性对照组和受试药物组的用药后痛阈增加率均高于空白组，受试药物组用药后半个小时的痛阈值显著延长，提示受试药物可显著延长小鼠对热刺激痛的
反应时间，具有明显的镇痛作用。

[0087] 实施例11实施例11基本同实施例10，所不同的是：实施例11是采用小鼠腹腔毛细血管通透性
法评价受试药物的活血通络作用。

[0088] 1、受试药物：根据本发明的中药组方制备的治疗风湿骨病中成药。

[0089] 2、受试动物：昆明种小鼠，40只，雌雄各半，清洁级，体重18～22g。

[0090] 3、实验方法（1）取小鼠40只，随机分为四组，10只/组，分别为空白组、模型组、阳性对照组（阿司
匹林）、受试药物组。

[0091] （2）连续给药5天，每天1次。于末次给药1 h后尾静脉注射0.5%的伊文思蓝溶液0.01mL/g，随即腹腔注射新配制的0.5%醋酸溶液0.02mL/g，30min后处死小鼠，打开腹腔，
用5mL生理盐水冲洗腹腔，将冲洗液离心，以生理盐水为对照溶液，于590nm处测吸光度。

[0092] 4、实验结果受试药物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响见表7。

[0093] 表7. 受试药物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响