[0001] 本发明涉及可再生资源领域和生物化工领域，具体地说，涉及一种微藻油脂的提取方法。

[0002] 近年来，由于能源短缺和环境破坏的日益严重，发展生物能源已成为全球关注的焦点。其中，以可再生油脂为原料的生物燃油（生物柴油或航空燃油等）发展备受关注。想要发展以可再生油脂为原料的生物燃油，油脂的可持续供应是关键。近年来，微藻油脂作为生物燃油原料受到国内外专家和学者广泛关注。微藻具有生命周期短，生长速率快，可以适应各种各样的种植条件，并且可以全年采收。另外，微藻培育占用面积少，可以不利用一般农用耕地，节约水资源，是一种非常有前景的可再生油脂原料。然而，绝大多数微藻油脂都在胞内，如何有效破碎微藻细胞并进一步将胞内的油脂提取出来是促进微藻油脂在生物能源领域应用的关键。

[0003] 目前微藻油脂的提取主要为机械法破碎细胞，然后再用有机溶剂抽提，以及先用化学法破碎细胞再用有机溶剂抽提。其中，机械破碎法包括高压匀浆法、超声破碎法、球磨法、微波法等，这些破碎细胞的方法存在能耗大，设备投资大，难以在工业化生产中进一步应用；而化学法主要采用无机酸处理法，一般用强无机酸如硫酸、盐酸等，无机酸破碎细胞存在无机酸用量大（一般用量为基于微藻干物质质量的10%以上），无机酸不仅难以回收，而且，高浓度的无机酸对设备腐蚀严重，含酸废液排放对环境也会产生严重影响。可见，迫切需要开发新型的微藻油脂提取工艺来促进微藻油脂在生物柴油及生物航空燃油制备领域中的应用。

[0013] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。

[0014] 实施例1微藻油脂的提取方法

[0015] 用质量百分比浓度为60%的甲酸溶液与微藻Chlorella vulgaris按液固比10：1（L:kg）混合后，在常压沸点下搅拌处理1.5小时，再用有机溶剂氯仿/甲醇（体积比1:1）进行油脂抽提，有机溶剂与微藻的液固比（L:kg）为3：1，离心后有机相中可得到收率为92%的油脂。实施例2微藻油脂的提取方法

[0016] 用质量百分比浓度为70%的甲酸溶液与微藻Botryococcus sp.按液固比为6：1（L:kg）混合，同时加入有机溶剂氯仿/甲醇（体积比1:1），有机溶剂与微藻的液固比为（L:kg）为3：1，在常压沸点下搅拌处理2小时，离心后有机相中可得到收率为94%的油脂。

[0017] 实施例3微藻油脂的提取方法

[0018] 用质量百分比浓度为80%的乙酸溶液与微藻Chlorella vulgaris按液固比8：1（L:kg）混合后，在常压沸点下搅拌处理3小时，再用有机溶剂氯仿/乙醇（体积比1:1）进行油脂抽提，有机溶剂与微藻的液固比（L:kg）为10：1，离心后有机相中可得到收率为95%的油脂。

[0019] 实施例4微藻油脂的提取方法

[0020] 向质量百分比浓度为70%的丙酸溶液中添加质量百分比浓度（基于微藻干重）为0.3%的硫酸，，所得混合液与微藻Botryococcus sp.按液固比10：1（L:kg）混合后，在常压沸点下搅拌处理3.0小时，再用有机溶剂正己烷（体积比1:1）进行油脂抽提，有机溶剂与微藻的液固比（L:kg）为4：1，离心后有机相中可得到收率为90%的油脂。

[0021] 实施例5微藻油脂的提取方法

[0022] 向质量百分比浓度为70%的乙酸溶液中添加质量百分比浓度（基于微藻干重）为0.2%的硫酸，所得混合液与微藻C.vulgaris按液固比为4：1（L:kg）混合，同时加入正己烷，有机溶剂与微藻的液固比（L:kg）为6：1，在常压沸点下搅拌处理3.0小时，离心后有机相中可得到收率为90%的油脂。

[0023] 实施例6微藻油脂的提取方法

[0024] 向质量分数30%的甲酸溶液中添加质量百分比浓度（基于微藻干重）为0.5%的盐酸，所得混合液与微藻C.vulgaris，按液固比为10：1（L:kg）混合后，在常压沸点下搅拌处理3.0小时，再用有机溶剂氯仿/乙醇（体积比1:1）进行油脂抽提，有机溶剂与微藻的液固比（L:kg）为8：1，离心后有机相中可得到收率为95%的油脂。

[0025] 实施例7微藻油脂的提取方法

[0026] 将质量百分比浓度为70%的甲酸溶液与微藻C.minutissima按液固比10：1