[0001] 本发明涉及化妆品技术领域，具体地，涉及一种白藜芦醇微乳及其制备方法和应用。

[0002] 白藜芦醇(RSV)是极强的抗氧化剂、炎症抑制剂以及黑色素抑制剂，具有强大的美容护肤功效，并且安全性高，因此是化妆品领域独特的高功效成分。尽管具有优异的皮肤美白、抗炎及抗老等功效，但是将白藜芦醇配制到化妆品中面临一系列挑战。通常，白藜芦醇分子本身在化妆品中是不稳定的，极易氧化变色。并且几乎不溶于水和油，与化妆品中的其它成分配制到一起后容易从配方中沉淀结晶，从而限制了白藜芦醇在化妆品中的使用。目前常用的技术包括：采用表面活性剂或者乙醇等溶解白藜芦醇后，再直接加入到O/W或者W/O体系中；采用微胶囊包裹技术，如将白藜芦醇包裹在表面活性剂或者脂质体纳米颗粒中，再加入到化妆品配方中。

[0003] 1.专利CN108888608A通过将白藜芦醇加入已溶解在有机溶剂的有机大分子聚合物如PLGA中，经过超声乳化，溶剂挥发后得到一种呈规则球形载有药物的纳米药物载体微粒，提高了白藜芦醇的生物利用率和溶解度。

[0004] 2.专利CN109364029A以牛血清白蛋白，白藜芦醇，植物油，乳化剂，蒸馏水为原料制备了包裹白藜芦醇的蛋白纳米颗粒微球，具有较好的生物相容性和可降解性，且在一定程度上改善了白藜芦醇的光稳定性。

[0005] 3.专利CN101927148A将白藜芦醇用羟丙基‑β‑环糊精包裹，经冷冻干燥得到白藜芦醇微胶囊粉末，提高了白藜芦醇的水溶性和稳定性。

[0006] 4.专利CN102614091A将白藜芦醇负载于乳化剂和复合脂质材料中，高压均质后获得纳米结构脂质载体NLC，提高了白藜芦醇的光热稳定性。但白藜芦醇的添加量有限，仅有0.1％‑1％。

[0007] 5.专利CN103826597A将白藜芦醇溶解于由磷酸酯表面活性剂和固体辅助乳化剂形成的液晶凝胶网络中，展现出良好的感官性质以及长期储存稳定性，未观察到白藜芦醇沉淀。

[0008] 6.专利CN107875034A制备了一种抗氧化自微乳，将白藜芦醇与维生素E，阿魏酸复配，筛选合适的油相，混合表面活性剂和助表面活性剂来溶解复合抗氧化剂，获得粒径小于70nm的自微乳。根据专利要求保护范围计算，该自微乳中白藜芦醇含量最高为3.3％。

[0009] 7.专利CN104173199A制备了一种白藜芦醇亚微乳固体，该固体溶于热水呈透明状态，温度降低后不析出，可以作为原料添加在化妆品中，但以组合物的原料中白藜芦醇含量最高10％，终产品配方中添加10％组合物计，化妆品中最终白藜芦醇的含量应该不超过1％。

[0010] 虽然已有较多的现有技术，但是依然存在诸多问题，例如，采用表面活性剂或者乙醇等溶解白藜芦醇后，直接加入到O/W或者W/O体系中的技术，白藜芦醇容易结晶沉淀，稳定性相对较差。采用微胶囊包裹技术，如将白藜芦醇包裹在表面活性剂或者脂质体纳米颗粒中，再加入到化妆品配方中，存在包裹率低，添加量低，工艺复杂，成本高的问题。采用特殊结构如液晶凝胶网络将白藜芦醇负载在配方载体中(如CN103826597A)，白藜芦醇添加量较低，为0.1‑2％。

[0042] 定义

[0043] 应当理解的是，本文中单数形式“一”、“一个”、“一种”和“所述”包括复数形式，除非上下文另有明确规定。

[0044] 本文中的术语“以上”、“以下”、“以内”包括本数，除非上下文另有明确规定。

[0045] 本文用“包含”、“含有”、“包括”来描述实施方式时，还提供了以“由……组成”和/或“基本上由……组成”描述的其他类似实施方式。还应当理解的是，本文用“基本上由……组成”来描述实施方式时，还提供了以“由……组成”描述的其他类似实施方式。

[0046] 本文中如“A和/或B”等短语中使用的术语“和/或”旨在包括A和B两者；A或B；A(单独)；和B(单独)。同样，如“A、B和/或C”等短语中使用的术语“和/或”旨在包括以下实施方式中的每一种：A、B和C；A、B或C；A或C；A或B；B或C；A和C；A和B；B和C；A(单独)；B(单独)；及C(单独)。

[0047] 除非另有明确说明，本文中“％”表示重量百分比。

[0048] 本发明中，“微乳”、“微乳组合物”、“微乳体系”有时在文中混用，表示相同的含义。“配方体系”、“载体”“载体体系”表示相同的含义。

[0049] 本发明主要包括三个方面：白藜芦醇微乳组合物、白藜芦醇微乳组合物的制备方法以及白藜芦醇微乳在化妆品领域的应用。

[0050] 一、白藜芦醇微乳组合物

[0051] 本发明创造性地采用多元醇包油的配方体系，该体系不仅能够负载高含量(高达5‑10％)的白藜芦醇，且提高了白藜芦醇的溶解性和光照稳定性。

[0052] 原理分析：多元醇，油，和表面活性剂三者混合形成的体系在界面上存在极性的过渡，推测白藜芦醇可溶解在极性与其相近的区域，从而稳定在多元醇包油的体系中。发明人将白藜芦醇添加到该体系中后，发现该体系能够稳定高达10％的白藜芦醇，且可以得到透明至半透明的微乳凝胶，同时白藜芦醇的光照稳定性也得到提升。该醇包油凝胶的制作工艺简单，无需特殊设备和条件即可获得，操作简便，绿色环保，成本低。

[0053] 本发明的微乳组合物中，搭载活性成分白藜芦醇的载体体系为多元醇包油的配方体系，所述载体体系包含油相、表面活性剂和醇相。

[0054] 其中，所述油相中含有酯类和植物油，在一个优选的实施方式中，所述酯类选自辛酸癸酸甘油三酯、棕榈酸乙基己酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯中的一种或两种以上的组合。所述植物油选自月见草油、向日葵籽油、白池花籽油、橄榄油和霍霍巴油中的一种或两种以上的组合，优选月见草油(Even i ng Pr imrose O i l,EPO)，月见草油是从月见草种子提取的植物油，它含有较高比例的亚油酸(约70‑74％)和γ‑亚麻酸(8‑10％)。其中，所述酯类和植物油的比例优选为2：1‑1:2，例如可以是1:1。

[0055] 本发明的载体体系中，表面活性剂主要起乳化作用，能够将油相和醇相混合在一起，形成稳定的微乳。表面活性剂的合适实例包括但不限于维生素E聚乙二醇琥珀酸酯、PEG‑40氢化蓖麻油、蔗糖硬脂酸酯、蔗糖月桂酸酯、聚甘油类乳化剂或枯草菌脂肽钠中的一种或两种以上的组合。

[0056] 本发明的载体体系中，醇相为多元醇，选自少于五个碳原子的二元醇、三元醇。在一个优选的实施方式中，醇相为二元醇，合适的实例包括但不限于1,3‑丙二醇、1,2‑丙二醇或1,3‑丁二醇等中的一种或两种以上的组合。三元醇的合适的实例例如甘油。

[0057] 在一个优选的实施方式中，本发明的载体体系中还可以含有抗氧化剂，抗氧化剂优选维生素E和/或二甲基甲氧基苯并二氢吡喃醇，虽然不是必需成分，但是加入抗氧化剂可以进一步增加微乳的抗氧化性能和稳定性。

[0058] 本发明的白藜芦醇微乳组合物中，以微乳的总重量计，活性成分白藜芦醇的含量为3‑12重量％，优选为5‑10重量％。

[0059] 本发明的白藜芦醇微乳组合物中，以微乳组合物的总重量计，多元醇的含量可以是25‑45重量％。在一个具体的实施方式中，多元醇的用量可以是30‑40重量％。

[0060] 本发明的白藜芦醇微乳组合物中，以微乳组合物的总重量计，表面活性剂的含量可以是15‑30重量％，在一个具体的实施方式中，表面活性剂的含量是20‑25重量％。

[0061] 本发明的白藜芦醇微乳组合物中，以微乳组合物的总重量计，油相的含量可以是30‑55重量％，在一个具体的实施方式中，油相的含量是35‑45重量％。

[0062] 二、白藜芦醇微乳的制备工艺

[0063] 按照如下步骤制备本发明的白藜芦醇微乳：

[0064] (1)将如上所述的油相、表面活性剂和白藜芦醇混合后加热至40‑50℃，搅拌；

[0065] (2)在步骤(1)的混合物中加入如上例举的醇相，搅拌至透明，使白藜芦醇完全溶解；

[0066] (3)搅拌降温，待温度降至室温，即可得到白藜芦醇的醇包油微乳。

[0067] 三、白藜芦醇微乳在化妆品中的应用

[0068] 化妆品常用的多元醇包括1,3‑丁二醇、1,3‑丙二醇、丙二醇、甘油等，白藜芦醇在这些多元醇的溶解度较差，同时，白藜芦醇在常用的护肤油脂如植物油(向日葵籽油，白池花籽油，月见草油，橄榄油，霍霍巴油等)以及合成油脂(如辛酸/癸酸甘油三酯，棕榈酸异丙酯，肉豆蔻酸异丙酯等，碳酸二辛酯，棕榈酸乙基己酯等)的溶解度也很低，在化妆品的配方中使用白藜芦醇时，易结晶析出，不仅影响产品的感官特性，同时也限制了白藜芦醇在皮肤上的透皮吸收和生物利用度。

[0069] 本发明制备的微乳将醇包油体系作为白藜芦醇的载体，由于醇油两相之间存在极性过渡区域，白藜芦醇能够稳定且高含量的被负载于该区域，从而实现上述问题的解决。同时由于醇包油体系能够带来滋润不粘腻的良好肤感，使得本发明白藜芦醇微乳在化妆品领域具有良好的应用价值。

[0070] 实施例

[0071] 下面结合实施例对本发明做详细的说明。实施例给出了详细的实施方式和过程，用于充分公开和展示发明可实施，实施例并不代表对发明的限制，本发明的保护范围并不限于下述的实施例。

[0072] 说明书实施例中未注明来源的仪器、试剂、材料等，可通过一般市售途径购得。说明书实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域常规条件或按照制造厂商所建议的条件。

[0073] 白藜芦醇微乳组合物的制备

[0074] 实施例1：

[0075] 按照表1的配方，将油相(辛酸癸酸甘油三酯、月见草油和维生素E)、表面活性剂和白藜芦醇混合后加热至40‑50℃，搅拌；

[0076] 然后在混合物中加入醇相，搅拌至透明，白藜芦醇完全溶解；

[0077] 搅拌降温，待温度降至室温，即可得到白藜芦醇的醇包油微乳组合物。

[0078] 表1：

[0079]

[0080] 实施例2：

[0081] 按照表2所示的处方,将油相、表面活性剂和白藜芦醇混合后加热至40‑50℃，搅拌；

[0082] 然后加入醇相，搅拌至透明，白藜芦醇完全溶解；

[0083] 搅拌降温，待温度降至室温，即可得到白藜芦醇的醇包油微乳组合物。

[0084] 表2

[0085]

[0086] 实施例3:

[0087] 按照表3所示的处方,将油相、表面活性剂和白藜芦醇混合后加热至40‑50℃，搅拌；

[0088] 然后加入醇相，搅拌至透明，白藜芦醇完全溶解；

[0089] 搅拌降温，待温度降至室温，即可得到白藜芦醇的醇包油微乳组合物。

[0090] 表3

[0091]

[0092] 实施例4：

[0093] 按照表4的配方，将油相(辛酸癸酸甘油三酯、月见草油和维生素E)、表面活性剂和白藜芦醇混合后加热至40‑50℃，搅拌；

[0094] 然后在混合物中加入醇相，搅拌至透明，白藜芦醇完全溶解；

[0095] 搅拌降温，待温度降至室温，即可得到白藜芦醇的醇包油微乳组合物。

[0096] 表4

[0097]

[0098] 对比例1

[0099] 按照专利文献CN107875034A实施例1记载的方法制备白藜芦醇微乳。

[0100] 对比例2(本发明体系加入水和卡波凝胶体系形成的乳液，其中白藜芦醇最终含量0.5％)

[0101] 1.按照表5所示的处方,将油相、表面活性剂和白藜芦醇混合后加热至40‑50℃，搅拌；

[0102] 2.然后加入醇相，搅拌至透明，白藜芦醇完全溶解；

[0103] 3.搅拌降温，待温度降至室温，得到白藜芦醇的醇包油微乳组合物；

[0104] 4.将卡波姆在水相中分散均匀，加入精氨酸中和，加入防腐剂，搅拌均匀后得到透明凝胶；

[0105] 5.将步骤3得到的白藜芦醇的醇包油微乳组合物加入到上述凝胶中，搅拌至完全分散均匀，即可得到对比例2样品。

[0106] 表5

[0107]

[0108]

[0109] 对比例3(专利CN103826597A报道的液晶乳化体系，将白藜芦醇添加量提高至0.5％)

[0110] 参照专利CN103826597A实施例2记载的方法，在具有液晶凝胶网络且具有霜剂稠度的乳液中配制白藜芦醇。

[0111]

[0112] 混合水相A的所有成分并加热到40℃。

[0113] 将白藜芦醇溶解于磷酸酯表面活性剂中，将它们混合并加热到40℃。溶液必须完全澄清(相B)。

[0114] 混合相C的所有成分并加热到75℃。

[0115] 将相B加入到油相C中并轻轻混匀。紧接着，将该混合物加入到水相A中。彻底均匀‑1化(13000min )

[0116] 最后，在连续且轻柔的混合下加入相D。轻轻搅拌1小时，之后在较低速度‑1(9000min )下再均匀化一次1分钟。

[0117] 产品性能测试

[0118] 一、光照条件下的稳定性

[0119] 按照中国药典2020年版《9001原料药物与制剂稳定性试验指导原则》中记载的光照稳定性试验条件，考察本发明实施例1‑4制备的白藜芦醇微乳、以及对比例1‑3制备的白藜芦醇乳化体系的光照稳定性。分别观察并记录各个体系在光照箱中放置0、7、14天后的状态。结果如图1‑4所示。

[0120] 图1表示实施例1制备的白藜芦醇醇包油微乳体系(含5％RSV)的光照稳定性试验结果，其中，(a)、(b)、(c)分别表示在光照箱中放置0、7、14天后的状态。实施例2、3、4的白藜芦醇微乳的光照稳定试验结果与实施例1基本相同，故省略其图示，以图1作为代表。图2表示对比例1的白藜芦醇微乳体系(含5％RSV)的光照稳定性试验结果，其中，(a)、(b)、(c)分别表示在光照箱中放置0、7、14天后的状态。图3表示对比例2制备的白藜芦醇醇包油微乳体系(含0.5％RSV)的光照稳定性试验结果，其中，(a)、(b)、(c)分别表示在光照箱中放置0、7、14天后的状态。图4表示对比例3的水包油液晶体系(含0.5％RSV)的光照稳定性试验结果，其中，(a)、(b)、(c)分别表示在光照箱中放置0、7、14天后的状态。由图1、2、3、4可以看出，实施例1‑4的微乳组合物，在放置7天后无明显变化，没有结晶析出和分层，表面稳定性良好，放置14天后颜色略微加深，无其他稳定性问题。表明实施例1‑4具有相对较好的光稳定性。
对比例1的微乳，在放置7天后虽然也没有结晶析出和分离，但颜色变化较为明显，放置14天后颜色显著加深。对比例2，由实施例1加水形成乳液后，颜色变化相较于对比例3来说，明显优于对比例3的颜色稳定性，表明由实施例1加入水相后得到的对比例2比对比例3具有更好的光稳定性。

[0121] 二.透皮吸收性能：

[0122] 白藜芦醇微乳液体外释放测试(I n Vitro Re l ease Test：I VRT)

[0123] 样品信息

[0124] 白藜芦醇微乳液，批号：20231122_2，来源：化妆品自制。

[0125] 制备方法：

[0126] 取实施例1的样品10g，加水稀释至100g，充分摇匀得到稀释的白藜芦醇微乳液，其中白藜芦醇含量0.5％。

[0127] 测试方法

[0128] 色谱条件：

[0129] 色谱柱：Waters  HSS T3(1.8μm,2.1×100mm)

[0130] 检测波长：306nm

[0131] 柱温：35℃

[0132] 流动相：乙腈‑0.1％乙酸溶液(26:74)

[0133] 流速：0.4m l/min

[0134] 进样量：5μl

[0135] 采集时间：6分钟

[0136] 溶液配制：

[0137] 接收介质：pH7.4 PBS溶液‑乙醇(80：20)

[0138] 膜：PVDF膜，0.45μm

[0139] 上样方式：满环上样

[0140] 转速：400rpm

[0141] 温度：33.5℃

[0142] 取样体积：600μl

[0143] 取样时间点：1h、2h、3h、4h、5h、6h

[0144] 标准曲线溶液：取白藜芦醇原料(陕西华泰生物精细化工，纯度98％)

[0145] 20mg，置200m l量瓶，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液(0.1mg/m l)。精密量取白藜芦醇贮备液适量，用接收介质稀释制成不同浓度溶液，作为线性溶液。如图5所示。

[0146] 实验结果如表6和图6所示。结果表明白藜芦醇微乳在pH7.4 PBS溶液‑乙醇(80：20)介质中释放速率较快，说明将实施例1的微乳用于化妆品中，透皮吸收性良好。

[0147] 同样地，将实施例2‑4的微乳也按照与上述实施例1同样的方法制成化妆品，测试其在pH7.4 PBS溶液‑乙醇(80：20)介质中释放速率，以评价在化妆品中的透皮吸收性能，结果与实施例1的微乳结果相似，实施例2‑4的微乳用于化妆品中，也具有了良好的透皮吸收性。

[0148] 表6白藜芦醇微乳IVRT结果

[0149]

[0150]

[0151] 需要说明的是，本发明不局限于以上实施方式和实施例。上述实施方式和实施例仅为示例，在本申请的技术方案范围内具有与技术思想实质相同的构成、发挥相同作用效果的实施方式均包含在本申请的技术范围内。此外，在不脱离本申请主旨的范围内，对实施方式/实施例进行的本领域技术人员能够想到的各种变形、替换、将实施方式中的一部分构成要素加以组合而形成的其它方式也包含在本申请的范围内，本发明的保护范围以所附的权利要求书界定。