一种杜氏杆菌在高盐饮食导致的血管疾病中的应用 技术领域： [0001] 本发明涉及生物医药及微生物技术领域，具体涉及一种杜氏杆菌在高盐饮食导致的血管疾病中的应用。 背景技术： [0002] 高血压(hypertension)是指以体循环动脉血压(收缩压和/或舒张压)增高为主要特征(收缩压≥140毫米汞柱，舒张压≥90毫米汞柱)，可伴有心、脑、肾等器官的功能或器质性损害的临床综合征。高血压是最常见的慢性病，也是心脑血管病最主要的危险因素。正常人的血压随内外环境变化在一定范围内波动。在整体人群，血压水平随年龄逐渐升高，以收缩压更为明显，但50岁后舒张压呈现下降趋势，脉压也随之加大。 [0003] 研究表明，高血压的诱发因素很多，除家族遗传外，很多日常行为习惯也是高血压的诱发因素，如高钠低钾饮食、超重肥胖、过量饮酒、长期精神紧张、体力活动不足等。目前高血压患者在改善生活方式的基础上，以24小时长效降压药物控制血压为主。 [0004] 因此，有必要进行相关的生物研究，以作为在高血压及其相关疾病中预防和治疗的应用。 [0005] 公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。 发明内容： [0006] 本发明的目的在于提供一种杜氏杆菌在高盐饮食导致的血管疾病中的应用，以改善高血压及血管内皮功能相关因子。 [0007] 为实现上述目的，本发明提供杜氏杆菌或含有杜氏杆菌的益生菌制剂在高盐饮食导致的血管疾病方面的应用。 [0008] 在本发明的一种实施方式中，所述杜氏杆菌为NYU‑BL‑A4(ATCC:TSD‑64)由国际保藏中心提供，经广东省微生物研究所鉴定合格，并培养于广东省微生物研究所。 [0009] 在本发明的一种实施方式中，所述杜氏杆菌或含有杜氏杆菌的益生菌制剂用于改善高血压及血管内皮功能相关因子。 [0010] 在本发明的一种实施方式中，所述益生菌制剂中除杜氏杆菌外，还含有辅料，所述辅料包括但不限于赋形剂或食品添加剂，所述杜氏杆菌在益生菌制剂中的含量不低于1.0 8 8 ×10cfu/mL或1.0×10cfu/g。 [0011] 在本发明的一种实施方式中，所述杜氏杆菌或含有杜氏杆菌的益生菌制剂用于(a)～(c)至少一方面： [0012] (a)抑制平滑肌细胞增殖； [0013] (b)缓解血管重构和发生炎症病变； [0014] (c)平衡舒血管因子和缩血管因子； [0015] 在本发明的一种实施方式中，所述血管内皮功能相关因子包括血清中NO、ET‑1、VEGF、AngI、EMPs。 [0016] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果： [0017] 本发明的杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血压及小鼠内皮功能相关因子，具体的因子包括ET‑1、NO、AngI、VEGF和EMPs等，而ET‑1、NO、AngI、VEGF和EMPs等在一定程度上揭示了血管内皮细胞损伤，进而影响血管内皮功能稳态，在高血压发展中具有重要作用，因此，杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4对高盐诱导的高血压小鼠血压和内皮功能具有保护作用。 附图说明： [0018] 图1为杜氏杆菌NYU‑BL‑A4对小鼠血压的影响示意图； [0019] 图2为杜氏杆菌NYU‑BL‑A4对小鼠血清中NO的影响示意图； [0020] 图3为杜氏杆菌NYU‑BL‑A4对小鼠血清中ET‑1的影响示意图； [0021] 图4为杜氏杆菌NYU‑BL‑A4对小鼠血清中VEGF的影响示意图； [0022] 图5为杜氏杆菌NYU‑BL‑A4对小鼠血清中AngI的影响示意图； [0023] 图6为杜氏杆菌NYU‑BL‑A4对小鼠血清中EMPs的影响示意图； 具体实施方式： [0024] 下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。 [0025] 选取40只雄性6‑8周龄SPF级C57BL/6J小鼠，由北京华阜康生物科技有限公司提供(NO.110322201101727132)，经中国医学院科学院医学动物研究所鉴定合格。 [0026] 所有SPF级小鼠饲养在暨南大学实验动物管理中心，环境特点：温度为20‑24℃，湿度为50％，昼夜等时。 [0027] 所有小鼠随机分成4组，每组10只，分别为：正常对照组、正常+杜氏杆菌组、高盐饮食组、高盐饮食+杜氏杆菌组。 [0028] 杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4(ATCC:TSD‑64)由国际保藏中心提供，经广东省微生物研究所鉴定合格，并培养于广东省微生物研究所。 [0029] 实施例1：杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血压。 [0030] 在厌氧工作站中，吸取0.2‑0.3mL无氧无菌水将冻干菌粉溶解后涂到平板培养基上37℃厌氧培养2‑3d；待平板长出明显菌落后，用无氧无菌水洗脱菌体，按1:5的接种量传代至液体培养基中；将菌液移至37℃生化培养箱培养48h(平板培养基及无菌水提前转入厌氧工作站驱氧，菌液可直接在普通超净工作台抽吸传代、扩培)。 [0031] 从对数期培养物中收集细菌菌株108‑109(cfus)，将其直接制作成细菌悬液。 [0032] 其中正常对照组使用普通饲料给小鼠喂养，正常+杜氏杆菌组除普通饲料喂养外， 8 取杜氏杆菌按照2×10菌落形成单位(cfus)/200μl为剂量，每天给小鼠灌胃100ul；高盐饮食组使用含有8％Nacl饲料喂养小鼠4周诱导高血压模型；高盐饮食+杜氏杆菌组除使用8％ 8 Nacl饲料外，取杜氏杆菌按照2×10菌落形成单位(cfus)/200μl为剂量，每天给小鼠灌胃 100ul。 [0033] 采用动物无创血压分析系统测量小鼠尾动脉压，试验初期测量一次，喂养2周、4周时分别测量一次，结果如图1所示，图中*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，ns分别代表无统计学意义；实验开始前，各组小鼠血压无明显差异，第4周时，与正常对照组相比，高盐饮食组小鼠血压会随着高盐诱导的时间升高，差异较正常饮食组有统计学意义(p<0.001)，而高盐饮食加入杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4干预后小鼠血压明显下降，差异较高盐饮食组具有统计学意义(p<0.001)。说明杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血压。 [0034] 实施例2：杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中NO因子。 [0035] 使用小动物麻醉呼吸机给予异氟烷麻醉，眼球采血收集于普通离心管中，离心后取上清液于灭菌的离心管中，分装后置于‑80℃保存，采用Elisa法检测血清中NO水平。检测结果如图2所示，图中*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，ns分别代表无统计学意义；从实验结果看，与正常对照组相比，高盐饮食组小鼠血清中NO下降，差异较正常饮食组有统计学意义(p<0.001)，而杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4干预后小鼠血清中NO有升高的趋势。说明杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中NO因子。 [0036] 实施例3：杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中ET‑1因子。 [0037] 使用小动物麻醉呼吸机给予异氟烷麻醉，眼球采血收集于普通离心管中，离心后取上清液于灭菌的离心管中，分装后置于‑80℃保存，采用Elisa法检测血清中ET‑1水平。检测结果如图3所示，图中*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，ns分别代表无统计学意义；从实验结果看，与正常对照组相比，高盐饮食组小鼠血清中ET‑1升高，差异较正常饮食组有统计学意义(p<0.05)，而杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4干预后小鼠血清中ET‑1降低，差异较高盐饮食组有统计学意义(p<0.01)。说明杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中ET‑1因子。 [0038] 实施例4：杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中VEGF因子。 [0039] 使用小动物麻醉呼吸机给予异氟烷麻醉，眼球采血收集于普通离心管中，离心后取上清液于灭菌的离心管中，分装后置于‑80℃保存，采用Elisa法检测血清中VEGF水平。检测结果如图4所示，图中*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，ns分别代表无统计学意义；从实验结果看，与正常对照组相比，高盐饮食组小鼠血清中VEGF升高，差异较正常饮食组有统计学意义(p<0.001)，而杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4干预后小鼠血清中VEGF降低，差异较高盐饮食组有统计学意义(p<0.001)。说明杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中VEGF因子。 [0040] 实施例5：杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中AngI因子。 [0041] 使用小动物麻醉呼吸机给予异氟烷麻醉，眼球采血收集于普通离心管中，离心后取上清液于灭菌的离心管中，分装后置于‑80℃保存，采用Elisa法检测血清中AngI水平。检测结果如图5所示，图中*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，ns分别代表无统计学意义；从实验结果看，与正常对照组相比，高盐饮食组小鼠血清中AngI升高，差异较正常饮食组有统计学意义(p<0.001)，而杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4干预后小鼠血清中AngI降低，差异较高盐饮食组有统计学意义(p<0.01)。说明杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中VEGF因子。 [0042] 实施例6：杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中EMPs因子。 [0043] 使用小动物麻醉呼吸机给予异氟烷麻醉，眼球采血收集于普通离心管中，离心后取上清液于灭菌的离心管中，分装后置于‑80℃保存，采用Elisa法检测血清中EMPs水平。检测结果如图6所示，图中*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，ns分别代表无统计学意义；从实验结果看，与正常对照组相比，高盐饮食组小鼠血清中EMPs升高，差异较正常饮食组有统计学意义(p<0.001)，而杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4干预后小鼠血清中EMPs降低，差异较高盐饮食组有统计学意义(p<0.01)。说明杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4能够改善高盐饮食诱导的高血压小鼠血清中VEGF因子。 [0044] 血管内皮功能稳态在高血压的形成、转归以及预后过程中发挥重要的作用,血管内皮作为血液循环中物质与血管壁之间的选择性屏障，不但能保持血管壁的完整性，而且能响应来自循环血液中各种物理和化学刺激，产生多种细胞因子、生长因子等生物活性物质，在调节血管的功能中起着关键作用。若血管内皮细胞损伤常可引起平滑肌细胞增殖、血管重构和炎症等病理过程，进而形成内皮功能障碍。 [0045] 血管内皮细胞受损常导致所分泌的舒血管因子和缩血管因子失衡，内皮素‑1(ET‑ 1)和一氧化氮(NO)是血管收缩或者舒张的重要细胞因子，与血管内皮功能稳态密切相关。 其中ET‑1的分泌增加和NO的减少不仅可以增强血管收缩和氧化应激作用，而且可以促进血管内皮增生及血管内皮细胞功能失调，诱导血管收缩加强，从而増加了循环阻力，促进高血压的发展。 [0046] 内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)可以维系血管内皮细胞的正常功能，可促进受损内皮细胞自我修复，VEGF可特异性地刺激血管内皮细胞增殖，在血管内皮损伤的自我修复中发挥重要作用。 [0047] 此外，血管紧张素I(AngIotensin I，AngI)作为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的前体存在，进而能调控血管收缩，导致血压升高。 [0048] 内皮微颗粒(Endothelial Microparticles，EMPs)是内皮细胞激活、损伤或凋亡时从浆膜上脱落并携带来自内皮细胞某些抗原特性的囊泡，通过表面分子及内部的核酸物质产生一系列生物学效应，其释放与精确的信号调控机制有关，能反映内皮细胞激活、增殖及凋亡的平衡状态，是高血压血管内皮细胞功能障碍的新型生物学标记物。 [0049] 以上，ET‑1、NO、AngI、VEGF、EMPs等在一定程度上揭示了血管内皮细胞损伤，进而影响血管内皮功能稳态，在高血压发生发展中具有重要作用。 [0050] 而综合上述实验表明，杜氏杆菌(Dubosiella newyorkensis)NYU‑BL‑A4对高盐诱导的高血压小鼠血压和内皮功能相关因子(ET‑1、NO、AngI、VEGF、EMPs等)具有保护作用。因此在高盐饮食导致的高血压及其相关疾病中预防和治疗中能能够得到很好的应用。 [0051] 虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。