技术领域
[0001] 本发明涉及莰佛胺(canfosfamide)制剂及其制备。
相关背景技术
[0002] McIntyre和 “Canfosfamide Hydrochloride”，Drugs Fut.，29(10)，985-991(2004)描述了一种由谷胱甘肽S-转移酶P1-1活化的磷二酰胺抗癌剂。这篇文章还用代码TER-286和TLK-286来表示盐酸莰佛胺(canfosfamide hydrochloride)。
[0003] Morgan 等 人，“Tumor Efficacy and Bone Marrow-sparing Properties ofTER286，a Cytotoxin Activated by Glutathione S-Transferase”，CancerResearch，58(12)，2568-2575(1998)描述了关于盐酸莰佛胺的临床前研究，包括动物研究。根据这篇文章，“对于一些研究，在60mM柠檬酸钠中制备其而用于静脉(i.v)递送。”[0004] Tew等人，“TLK-286：a novel glutathione S-transferase-activatedprodrug”，Expert Opin.Investig.Drugs，14(8)，1047-1054(2005)指出“在含有265mg无菌冻干药物的小瓶中的TLK-286制剂允许溶解于注射用水中达到50mg/ml的浓度，随后在5％葡萄糖中稀释到合适剂量用于注射。”
具体实施方式
[0009] 定义
[0010] “基本上由…构成”是限制性(封闭式)短语，意指包括所述成分、基团、步骤等的存在，并且排除实质上改变所要求或所描述的基本特性的其他成分、基团、步骤等的存在。因此，基本上由盐酸莰佛胺构成的制剂包含盐酸莰佛胺，并且不包含另一种活性成分或另一种莰佛胺盐，但附带杂质(incidental impurities)除外。“包含/包括”是包括性(开放式)而非限制性(封闭式)短语，意指包括所述成分、基团、步骤等的存在，但不排除其它成分、基团、步骤等的存在或添加。除非上下文中明确要求其他情况，否则单数也包括复数(含义)；因此，例如，“柠檬酸的钠盐”包括单独一种此类盐和两种或多种此类盐。
[0011] “柠檬酸钠缓冲液”是一种溶液，其基本上由典型地在所述pH下溶解于水中的柠檬酸的钠盐和可选的柠檬酸而构成。
[0012] 由于本发明的制剂含有溶解于水中的盐，因而其必然含有游离的离子和非离子化物质(non-ionized species)。因此，将制剂描述为基本上由柠檬酸钠缓冲液中的盐酸莰佛胺构成，不是描述莰佛胺与盐酸的缔合、或特定离子化状态的莰佛胺(其含有一个胺基和两个羧基)、或钠离子与柠檬酸/柠檬酸氢/柠檬酸二氢离子的缔合、或其它缔合或离子化状态，而是描述该制剂含有在所述pH下所述成分以所述浓度溶解于水中的产物。
[0013] 制剂
[0014] 第一方面，本发明是一种莰佛胺制剂，其基本上由pH为4.6±0.2的(100±10)mM含水柠檬酸钠缓冲液中的(50±5)mg/mL盐酸莰佛胺构成。
[0015] 第二方面，本发明是一种制备本发明第一方面的制剂的方法。该方法包括：
[0016] (a)制备pH为6.5±0.1的含水柠檬酸钠缓冲液，
[0017] (b)将盐酸莰佛胺溶解于缓冲液中，
[0018] (c)如有必要，调节所得溶液的pH至4.6±0.2。
[0019] 含水柠檬酸钠缓冲液可通过以下步骤而制备：将一种或多种柠檬酸钠盐和可选的柠檬酸(如二水合柠檬酸三钠和一水合柠檬酸)溶解于水中，随后如有必要通过加酸如1M盐酸、或碱如1M氢氧化钠而将pH调节至所需值6.5±0.1。
[0020] 将盐酸莰佛胺加入到缓冲液中搅拌至达到溶解。向缓冲液中加入盐酸莰佛胺会将混合物的pH降低至大约4.6±0.2，或稍高；如果pH超过4.8，可通过加入少量酸来降低混合物的pH。
[0021] 典型地，进行步骤(a)至(c)所用的水，少于达到(50±5)mg/mL盐酸莰佛胺和(100±10)mM柠檬酸钠的所需终浓度所要求的水，而作为最后的步骤(d)，加水以达到所需的终浓度。例如，在将固体柠檬酸钠和随后的柠檬酸加入水中来制备含水柠檬酸钠缓冲液时，溶解缓冲液成分的水的初始量，是达到终浓度所需水量的(85-95)％，这允许在配制制剂时使用额外的水来冲洗固体成分；然后，在任何必要的pH调节后，加入剩余量的水以达到所需的终浓度。
[0022] 所得制剂可进行“精密过滤(polish filtered)”，例如通过0.45μm滤膜(过滤器，filter)过滤；然后典型地进行无菌过滤，例如通过0.2μm滤膜过滤，于是该制剂适合用于注射。
[0023] 配制步骤典型地在惰性气体中进行，例如，在氮气吹扫下进行。
[0024] 典型地，将该制剂冻干用于保存(并在给予之前进行后续重构(还原，reconstitution))，所用方法为本领域中常用的方法且如以下实施例中所阐述的，即，分配于合适尺寸的容器中、将容器中的制剂冷冻至基本上低于0℃、减小压力以经由升华而除去制剂中的水分、增大压力并提高温度、以及密封容器。
[0025] 每个容器中制剂的量典型地选择为，容许重构为与原始制剂相同的浓度，并回收适量(例如，250mg或1g)的盐酸莰佛胺。对于250mg的盐酸莰佛胺，可将5.3mL的本发明第一方面的制剂(6％过量(overage))冻干于10mL小瓶中，其允许在用5.2mL水重构后方便回收5.0mL制剂；对于1.0g的盐酸莰佛胺，可将20.6mL的含水制剂(3％过量)冻干于50mL小瓶中，其允许在重构后方便回收20.0mL的该制剂
[0026] 实施例
[0027] 以下实施例描述本发明的制剂和冻干制剂、以及它们的制备方法。混合和过滤操作在氮气吹扫下进行。
[0028] 为了制备50L体积的制剂(密度1.034Kg/L)，将43.5Kg的注射用水(WFI)加入到
